总 ERK1/2 检测与应用要点
一、ERK1/2 是什么
ERK1/2 全称为细胞外调节蛋白激酶 1/2,是 MAPK 信号通路中至关重要的丝氨酸 / 苏氨酸蛋白激酶,也是细胞内信号传递的核心枢纽。它广泛分布于各类组织细胞中,主要负责接收胞外生长因子、炎症刺激等信号,进而调控细胞增殖、分化、凋亡及迁移等基础生命活动。ERK1/2 的功能激活依赖于特定位点的磷酸化修饰,细胞内同时存在活化的磷酸化形式与静息的非磷酸化形式,二者共同组成了细胞内的总 ERK1/2。

图片来源:《Negative feedback regulation of the ERK1/2 MAPK pathway》
二、ERK 通路的负反馈调控与上游关键成分
ERK 通路的信号传导并非持续激活,而是受严密的负反馈机制调控,ERK1/2 被活化后会直接对上游信号成分进行抑制,避免通路过度激活,以此维持细胞信号稳态。
受该负反馈机制直接调控的 ERK 上游核心成分主要包括:Raf 家族激酶、MEK1/2 激酶、SOS 鸟苷酸交换因子、细胞膜表面受体酪氨酸激酶(RTK)等。
这些上游分子是 ERK 通路逐级信号传递的关键节点,负反馈调控可快速终止上游信号传导,从源头控制 ERK1/2 的磷酸化水平,也是细胞防止增殖紊乱、炎症过激等病理状态的重要自我调节方式。

来源:PhosphoSite,来觅数据整理
二、总 ERK1/2 的分子定位与检测意义
总 ERK1/2 包含磷酸化与非磷酸化两种形式,可反映细胞内该蛋白的整体表达水平。
1.作为信号通路研究的内参照分子,表达水平稳定,独立于通路激活状态变化
2.弥补仅检测磷酸化 ERK 的结果偏差,排除样本上样、蛋白提取效率带来的实验误差
3.与磷酸化 ERK 联合检测,通过计算 p-ERK/Total-ERK 比值,大幅提升数据真实性与可靠性
三、总 ERK 检测的核心科研价值
总 ERK1/2 检测是 ERK 通路研究的必备校准步骤,核心作用突出:
· 归一化磷酸化 ERK1/2 检测数据,有效校正实验系统误差
· 精准评估药物对 ERK 通路的真实抑制效果,避免结果误判
· 适配不同细胞样本、不同处理条件下的信号数据横向对比
· 为肿瘤、炎症等疾病的 ERK 通路机制研究提供稳定参照标准
四、适配总 ERK1/2 检测的专用试剂盒方案
THUNDER™ Total ERK1/2 TR-FRET Cell Signaling Assay Kit,专为总 ERK1/2 的半定量检测设计,完美适配 ERK 信号研究中的数据归一化需求,是实验室常规检测的优选工具。
试剂盒采用三明治 TR-FRET(均相时间分辨荧光)免疫分析技术,以鼠为宿主,特异性识别 ERK1/2 抗原,可精准检测细胞裂解物中的总 ERK1/2(包括磷酸化与非磷酸化两种形式),检测结果稳定、灵敏度高,无需复杂洗涤步骤,操作简便高效。
其核心优势的在于,可与 THUNDER™ Phospho-ERK1/2 (T202/Y204) Kit、THUNDER™ Extreme Phospho-ERK1/2 (T202/Y204) Kit 完美配对使用,对后两款试剂盒检测的 p-ERK1/2 数据进行归一化处理,有效消除实验误差,提升数据可靠性。
名称货号规格
THUNDER™ Total ERK1/2 TR-FRET Cell Signaling Assay KitKIT-ERKT-100100points
THUNDER™ Extreme Phospho-ERK1/2 (T202/Y204) TR-FRET Cell Signaling Assay KitKIT-XTM-ERKP-100100points
THUNDER™ Phospho-ERK1/2 (T202/Y204) TR-FRET Cell Signaling Assay KitKIT-ERKP-100100points
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