多糖纯化干货指南

多糖是由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物，广泛存在于动物细胞膜、植物细胞壁及微生物细胞壁中，是构成生命体的重要分子基础。它不仅参与多种生命活动，还具备免疫调节、抗凝、降血糖等多种生物活性，在医药研发、保健品生产、食品工业等领域应用广泛。

一、多糖基础科普：分类与核心特点

1. 按来源分类

动物多糖：常见如甲壳素、肝素、硫酸软骨素、透明质酸等，在医学治疗（抗凝、免疫疾病干预）和美容保健领域应用广泛；

植物多糖：以枸杞多糖、海藻多糖、中药多糖为代表，核心优势是免疫调节、抗肿瘤等保健功能，是市面上多糖保健品的主流类型；

微生物多糖：包括黄原胶、右旋糖苷（工业领域）和灵芝多糖、虫草多糖（养生保健领域），其中发酵多糖在石油化工、制药行业占据重要市场份额。

2. 核心理化与生物学特点

分子量较大，结构稳定，三级结构不易被破坏，可耐受变性剂、酚氯仿等处理；

在 206nm 波长下有特征吸收信号，便于通过检测判断存在与纯度；

分子中含大量羟基，水溶液呈粘稠状，需针对性优化纯化流路；

易溶于水但不溶于乙醇，“醇沉法” 是多糖经典提取方式；

部分多糖带有负电，为阴离子交换层析纯化提供了技术基础。

二、多糖纯化核心方案

传统多糖纯化常用苯酚法，存在毒性大、收率低、工艺耗时长等问题。Cytiva 基于层析技术，开发了针对性解决方案，凭借专用填料与标准化流程，实现 “环境友好、收率高、易放大” 的纯化目标，以下为两个典型应用案例：

1. 贻贝多糖（海洋生物过敏源多糖）纯化

样品前处理：贻贝肉洗净搅碎，经酶法处理后，用 Sevage 法去除大量蛋白质，得到粗多糖；

层析纯化：第一步用Sephacryl S-300 凝胶过滤层析（分离范围 10KDa-1500KDa），基于分子量差异去除蛋白、核酸等杂质，同时分离不同聚合度的多糖；第二步用Capto Q 阴离子交换层析精细纯化，利用多糖负电特性，结合 Capto 系列高流速、高载量的优势，实现目标多糖与残留杂质的高效分离；

核心优势：分步纯化针对性强，纯度与活性保留效果好，适配实验室研发需求。

2. 肺炎多糖结合疫苗中多糖纯化

层析工艺流程：10% 脱氧胆酸钠处理后的粗糖样品，先经Capto DEAE与Capto adhere层析柱（1-2 步），采用 “流穿模式”—— 多糖直接流穿柱子，带负电的杂质结合于填料上，快速完成除杂；最后用Sephadex G-25 凝胶过滤层析脱盐，得到高纯度多糖；

核心优势：收率较传统工艺提升 30%-50%，全程仅需一周；产品质量符合欧洲药典标准；无有毒试剂，保障操作人员安全，且工艺易放大至中试生产。