表达稳转株的常见分类与应用解析

表达稳定细胞株（Expression Stable Cell Lines）是指通过基因工程手段，将特定基因序列整合到宿主细胞染色体上，使目的基因能够在宿主细胞内长期且稳定表达的细胞模型。

主要分类

组成型报告基因稳定细胞系

原理：通过引入荧光蛋白（如GFP、RFP、YFP、mCherry）或luciferase等报告基因到细胞基因组中，并利用CMV、EF1a等组成型启动子驱动报告基因持续稳定表达。

应用：细胞定位示踪、体内/外成像、药物筛选等领域。

信号通路元件稳定细胞系

原理：通过将信号通路相关元件（如信号受体、转录调控元件、启动子等）稳定整合到细胞中，以监测和研究特定信号通路的活性和调控。

应用：常见的信号通路有NFkB, STAT, AP1, NFAT等，这些信号通路与多种疾病的发生和治疗有关，因此与其相关的稳定表达细胞系在基础科研与药物筛选中起着重要的作用。

肿瘤特异性抗原表达稳定细胞系

原理：肿瘤组织本身是多种细胞的混合体，基因表达杂乱无章。通过构建过表达稳定细胞系，研究人员可以在纯净的背景下，研究目标基因如何影响肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭、死亡等恶性行为及相关信号通路。同时，这种表达特定肿瘤抗原的稳定细胞系还可用于验证该抗原作为预后指标或治疗靶点的可行性。

稳定表达特定肿瘤抗原的工程细胞系构建及应用

应用：不仅适用于高通量筛选和评估靶向药物的体外生物学活性，还能有效评价CAR-T细胞、TCR-T细胞等免疫细胞的杀伤活性和特异性。此外，该细胞系也为研究肿瘤细胞与周围细胞（如成纤维细胞）之间的相互作用提供了有力工具。

激酶稳定细胞系

在激酶研究中，构建能稳定表达特定激酶（包括野生型或疾病相关突变型）的细胞系，是破解激酶功能、开发靶向药物的核心实验策略。这类细胞系为在均一细胞背景下研究特定激酶的生物学功能、进行高通量药物筛选以及评估耐药机制提供了关键且可靠的工具。

免疫相关细胞系

原理：通过基因工程技术，将特定的免疫分子（如免疫检查点蛋白、细胞因子受体、抗原提呈相关分子等）稳定整合到宿主细胞基因组中，使细胞能够持续表达这些功能蛋白。

癌症治疗中的免疫检查点及其抑制剂，图源doi: 10.2147/BCTT.S175360

应用：为研究免疫应答的启动、调控机制以及进行免疫药物筛选提供理想的实验模型。

风险提示：细胞授权合规性不可忽视

使用未经授权或来源不明的的细胞系进行实验，不仅可能涉及知识产权风险，还可能因细胞系的遗传背景不明确、存在潜在污染等问题，影响研究结果的准确可靠与否。

在生物药研发领域，国内外药品监管机构在受理新药临床试验申请（IND）和生物制品许可申请（BLA）时，要求对用于药物活性测定、毒理学研究、质量控制（QC）放行等关键环节的细胞株，提供清晰的来源证明和合法的商业化授权文件，非授权或来源不明的细胞则无法提供要求文件，可能导致申报资料被拒绝。

因此，建议在选购或定制过表达稳定细胞株时，优先选择能够提供清晰、完整的细胞株溯源文件以及合法商业化授权证明的供应商。

定制案例

经WB验证，目的基因表达极显著上调；亚细胞定位结果显示其位于细胞膜上。（Advanced Science, 2024, 11(24): e2306675. IF=14.299，Q1）

构建目的基因dcas9-SAM胃癌细胞A（左）和胃癌细胞B（右），经RT-qPCR验证：目的基因上调倍数分别达20和30倍以上。

构建的MGC-803 PCSK9过表达细胞系，经WB验证，目的基因表达量极显著上调。