SLC22A1可预测聚乙二醇干扰素α治疗慢乙肝的疗效

编者按：

慢乙肝临床治愈是当前肝病治疗领域的热点方向，聚乙二醇干扰素α（PegIFNα）已成为慢乙肝患者实现HBsAg清除的最佳选择，但患者的临床疗效存在个体差异。因此，如何通过早期预测为慢乙肝患者提供更优的治疗策略也成为当前的研究热点。此前已有研究表明，血清标志物如IL-5、sPD-L1、sCD163、LY6E和TRIM6水平对于预测HBsAg清除具有潜在价值。

溶质载体家族22成员1（SLC22A1）在肝脏中特异性表达，其蛋白产物有机阳离子转运蛋白1主要分布于肝细胞窦间隙膜，调节肝细胞对内源性和外源性有机离子的摄取。近期，中山大学附属第三医院高志良教授团队在The Journal of Infectious Diseases上发表了相关研究，揭示SLC22A1通过激活JAK/STAT通路抑制HBV复制，可作为预测PegIFNα治疗疗效的新型生物标志物。

研究方法：

基础实验：利用RNA测序（RNA-seq）比较HBV感染细胞系（hepG2.2.15、转染pHBV1.3的hepG2、HBV感染的hepG2-NTCP）与对照细胞系（hepG2）的基因表达差异，筛选关键靶点SLC22A1。

临床样本验证：检测血清和肝组织样本中的SLC22A1水平，并分析其与治疗应答的关系。

肝活检样本：3例健康受试者和13例慢乙肝患者（5例获得HBsAg清除）；

血清样本：21例未经治疗的慢乙肝患者、11例健康受试者及200例参与珠峰项目的慢乙肝患者（PegIFNα ± NAs治疗至少48周或在48周前获得HBsAg清除）。

功能机制研究：通过过表达SLC22A1的hepG2.2.15细胞系，结合转录组测序、qPCR及Western blot验证SLC22A1对HBV的抑制作用及其分子通路。

研究结果

1. 在HBV感染的细胞系中，SLC22A1表达下调

通过RNA-seq分析hepG2.2.15和hepG2细胞之间的转录差异。分析显示，与有机阳离子跨膜转运相关的通路被富集（图1A），SLC22A1在hepG2.2.15中降低（图1B）。在多种HBV表达细胞系中，SLC22A1的mRNA和蛋白质水平均显著低于hepG2（图1C，D）。

图1. HBV抑制细胞系中SLC22A1的表达

HBV抑制hepG2衍生细胞系中SLC22A1的表达。

2. 慢乙肝患者的肝脏和血清中SLC22A1表达均下调

研究分析来自GEO数据库的RNA-seq数据，其中包括78个来自不同自然史分期的慢乙肝患者和健康受试者的肝活检样本（图2A）。与健康对照组相比，慢乙肝患者肝脏中的SLC22A1水平下调，特别是在免疫耐受期（IT）患者中。

免疫组化染色也证实了SLC22A1在健康对照组中高表达，而在病毒载量高的慢乙肝患者中表达量极低（图2B）。病毒载量低的患者肝脏中SLC22A1表达相对较高，而在实现HBsAg清除的患者中表达量非常高，与健康对照组相近（图2C）。

图2. 健康受试者和慢乙肝患者肝脏中SLC22A1的表达水平

注：HC：健康对照组；IT：免疫耐受期；IA：免疫活动期；IC：非活动性HBsAg携带状态；ENEG：HBeAg阴性慢乙肝

对11名健康受试者和21名慢乙肝患者血清中的SLC22A1进行定量检测（图 3）。慢乙肝患者的 SLC22A1表达水平显著低于健康对照组，且在HBV DNA高载量或HBeAg阳性的患者中，SLC22A1水平进一步降低。

图3. 健康受试者和慢乙肝患者血清中SLC22A1的表达水平

慢乙肝患者的SLC22A1表达降低，且随着HBV病毒载量的升高，SLC22A1的降幅增大，肝脏和血清中的变化趋势一致。

3. 血清SLC22A1水平可用于预测PegIFNα治疗慢乙肝的疗效

研究纳入200例参与珠峰项目的慢乙肝患者，其中80例患者经PegIFNα治疗48周后获得HBsAg清除，120例仍为HBsAg阳性。HBsAg清除组在治疗12周和24周的血清SLC22A1水平均显著高于HBsAg未清除组，基线无显著差异（表1，图4C）。HBsAg清除组在治疗后血清 SLC22A1显著升高，相反，HBsAg未清除组显著下降（图4B）。

表1. HBsAg清除组和未清除组在基线、治疗12周和24周的患者特征

图4. 血清SLC22A1水平在HBsAg清除组和未清除组中呈现不同的变化趋势

评估SLC22A1水平是否可用于预测PegIFNα治疗的疗效，分析基线、治疗12周和24周时SLC22A1及HBsAg水平预测HBsAg清除的AUC（图5）。血清SLC22A1及HBsAg的AUC随着治疗时间呈现上升趋势，并在24周达到最高值（AUC：0.887 vs. 0.892，p = 0.8492）。治疗24周时SLC22A1与HBsAg联合预测的AUC显著高于单独使用SLC22A1（p = 0.0099）或HBsAg（p = 0.0129）。

图5. 基线、治疗12周和24周的SLC22A1水平在预测HBsAg清除时的ROC曲线

在接受PegIFNα治疗后，HBsAg清除组的血清SLC22A1水平与HBsAg未清除组呈现出不同的趋势，前者上升而后者下降。

治疗24周时的SLC22A1水平可预测慢乙肝患者接受基于PegIFNα治疗的疗效，当与24周时的HBsAg水平结合时预测能力更佳。

4. SLC22A1通过激活JAK/STAT通路抑制HBsAg和HBeAg的表达

经PegIFNα治疗后，HBsAg清除组的血清SLC22A1水平升高，但PegIFNα本身并不影响SLC22A1的表达（图6A）。

利用过表达SLC22A1的hepG2.2.15细胞系实验发现，SLC22A1过表达导致细胞中HBsAg和HBeAg的表达降低（图6B）。

SLC22A1过表达组与对照组间的差异基因分析表明，部分干扰素刺激基因（ISGs）上调，如ISG15、OASL、IFI44、TREM1、IFIT1和IFIT2（图6C）。GO富集分析显示，SLC22A1过表达导致与病毒应答和I型干扰素应答相关通路的上调（图6C）。

测序结果通过qPCR和Western blot进行验证，SLC22A1过表达及IFNα激活JAK/STAT通路，STAT1磷酸化增加，并促进下游基因ISG15的表达（图6D）。

图6. 过表达SLC22A1通过激活JAK/STAT通路抑制HBV

SLC22A1通过激活JAK/STAT通路发挥抗HBV作用。

肝霖君有话说：

本研究发现经基于PegIFNα-2b的治疗获得HBsAg清除的慢乙肝患者在治疗期间血清SLC22A1水平显著升高，SLC22A1可通过激活JAK/STAT通路发挥抗HBV作用，并可作为预测PegIFNα治疗疗效的新型生物标志物。

前期高志良/林炳亮教授的相关研究表明，IFNα可能通过上调ACSL1增加甘油三酯水平，诱导肝细胞脂肪变性，促进HBsAg清除。而SLC22A1也可通过调节肝脏的能量代谢影响肝脂肪变性，其抑制HBV的作用或许也与肝脂肪变性相关。但SLC22A1与肝脂肪变性及PegIFNα-2b疗效间是否确实存在一定关联仍需更深入的探索。

参考文献：

Yu H, Li B, Guo H, et al. SLC22A1 resists HBV by activating JAK/STAT pathway and predicts effect of pegIFNα-based therapy on CHB[J]. J Infect Dis, 2025.