Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78,T淋巴细

2025
03/27

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优宁维生物
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为了解决大家不知道如何选择合适的细胞培养体系、不了解细胞生长特性等细胞培养难题,小优特地开启《细胞探险队》专栏,向大家介绍上百种常见细胞的形态、特点、培养体系、

为了解决大家不知道如何选择合适的细胞培养体系、不了解细胞生长特性等细胞培养难题,小优特地开启《细胞探险队》专栏,向大家介绍上百种常见细胞的形态、特点、培养体系、传代周期、注意事项、常见问题等,帮助大家快速熟悉自己的"细胞宝宝"!

Jurkat1. 名称:Jurkat(人T淋巴细胞白血病细胞)2. 别称:Jurkat E6-1、Jurkat, Clone E6-1、Jurkat Clone E6-1、Jurkat(clone E6-1)、JURKAT E-6.1、JURKAT E-61、Jurkat-CloneE61、Jurkat-E6、Jurkat E63. 简介:Jurkat,Clone E6-1细胞来源于一名14岁男孩的急性T细胞白血病患者的外周血,最常见的Clone E6-1是Jurkat细胞的一个克隆株,是肯德尔·史密斯博士将Jurkat细胞在41°C孵育48h,于巨噬细胞上进行有限稀释克隆得到的。该细胞株用佛波酯或针对T3抗原的凝集素或单克隆抗体刺激后可产生大量的IL-2。4. 种属:人5. 组织来源:外周血6. 生长特性:悬浮生长7. 应用:免疫系统疾病研究;T细胞信号传导研究;病毒学研究;药物筛选和免疫治疗和肿瘤学研究等。8. 细胞形态:淋巴细胞样

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图片来源于ATCC△点击放大图片

9. 培养条件:(1)完全培养基配方:RPMI-1640(SH30809.01)+10%FBS(SV30208.02)+1%双抗(SV30010)(2)温度:37°C(3)CO2:5%CO210. 换液频率:每2-3天更换培养基11. 传代周期:不超过3*106/ml,建议将活细胞密度控制在1*105-1*106/ml;当细胞密度到达80%时,及时进行传代,以防细胞过度生长状态变差12. 传代比例:1:2-1:513. 冻存液配方:95%完全培养基+5%DMSO(abs9187)或商品化细胞冻存液(130-129-552)14. 注意事项:(1)细胞碎片较多且较易分化,可能是因为细胞受到机械刺激或培养基变质等原因,导致细胞死亡或损伤,形成碎片,可以通过离心去除碎片或调整培养条件等去调整细胞状态;在某些情况下,Jurkat细胞也可能会发生分化,导致细胞形态和功能发生变化,可以通过控制培养条件(如:适当细胞密度)和培养基组分(如:选择优质澳洲胎牛血清)等方法来调整细胞状态,也可以使用细胞因子或化学物质等对细胞分化状态进行人工干预;(2)冻存复苏活率低,Jurkat细胞作为悬浮细胞,容易受到冻存的影响。提高冻存密度(一般建议冻存时细胞密度为2-3*106/mL),并在复苏时逐步恢复培养条件,可提高复苏活率;(3)细胞聚团过多:Jurkat细胞在培养过程容易形成细胞团,少量细胞聚团属于正常现象,但过多聚团可能影响细胞生长和实验结果,可以通过使用优质血清、控制细胞密度等方法来减少聚团。

CTLL-21. 名称:CTLL-2(小鼠T淋巴细胞)2. 别称:CTLL2;CTLL(2)3. 简介:CTLL-2是来源于C57BL/6小鼠的细胞毒性T细胞克隆。此细胞生长依赖于白细胞介素-2(IL-2),可用于检测IL-2。4. 种属:小鼠5. 生长特性:悬浮细胞6. 应用:三维细胞培养;免疫学。7. 细胞形态:淋巴母细胞

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图片来源于ATCC△点击放大图片

8. 培养条件:(1)完全培养基配方:RPMI-1640(SH30809.01)+10%FBS(SV30208.02)+100U/ml IL-2(402-ML-100)[1](2)温度:37°C(3)CO2:5%CO29. 换液频率:每周两次10. 传代周期:在细胞密度达到2*105/mL之前进行传代,否则IL-2将很快被耗尽,细胞将迅速失去活力11. 传代比例:建议细胞接种密度为1-2*104/mL12. 冻存液配方:82.5%完全培养基+10%FBS+7.5%DMSO(abs9187-100mL)或商品化细胞冻存液(130-129-552)13. 注意事项:细胞复苏后开始培养后的第1-4天,细胞活力可能会很差,不过一般在开始培养后的第3-5天,细胞悬液中开始出现可存活的细胞团。通常情况下复苏后的第7-10天再进行传代培养。另外,可能需要2-3周才能观察到细胞的旺盛生长,所以在细胞进入生长期之前,要保持细胞静养。

MT-41. 名称:MT-4(人T细胞白血病细胞)2. 别称:MT43. 简介:MT-4细胞是从一名50岁日本男性成人T细胞白血病(ATL)患者的外周血中分离出来的T细胞。4. 种属:人5. 组织来源:外周血6. 生长特性:悬浮细胞7. 应用:T细胞白血病研究;免疫系统紊乱研究;免疫学;免疫肿瘤学;毒理学;细胞和基因治疗(CGT)开发。8. 细胞形态:淋巴细胞样

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图片来源于JCRB△点击放大图片

9. 培养条件:(1)完全培养基配方:RPMI-1640(SH30027.01)+10%FBS(SV30208.02)+1%双抗(SV30010)(2)温度:37°C(3)CO2:5%CO210. 换液频率:2-3次/周11. 传代周期:细胞密度达到3*105-5*105/mL即可传代12. 传代比例:建议细胞接种密度为1.3*105/mL13. 冻存液配方:55%RPMI-1640+40%FBS+5%DMSO(abs9187-100mL)或商品化细胞冻存液(130-129-552)14. 注意事项:(1)部分MT-4细胞会附着瓶底,轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落,不需要胰酶消化;(2)建议使用培养皿培养,更适合吹打细胞操作,吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

HuT-781. 名称:HuT-78(人T淋巴细胞白血病细胞)2. 别称:HUT 78;HuT-78;HUT-78;HuT78;Hut78;HUT78;NCI-H783. 简介:HuT-78细胞系是一种来源于人类T淋巴细胞的白血病细胞系,最初从一名患有成人T细胞白血病(Adult T-cell Leukemia,ATL)的患者外周血中分离而来。4. 种属:人5. 组织来源:外周血6. 生长特性:悬浮细胞7. 应用:T细胞免疫反应;白血病;病毒感染及相关疾病机制。8. 细胞形态:淋巴母细胞样

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图片来源于ATCC△点击放大图片

9. 培养条件:(1)完全培养基配方:IMDM(SH30228.01)+20%FBS(SV30208.02)+1%双抗(SV30010))(2)温度:37°C(3)CO2:5%CO210. 换液频率:2-3次/周11. 传代周期:每2-3天传代一次,维持细胞浓度在5*104-8*105/mL之间12. 传代比例:1:2-1:413. 冻存液配方:95%完全培养基+5%DMSO(abs9187-100mL)或商品化细胞冻存液(130-129-552)14. 注意事项:(1)HuT-78会少量聚团生长,为正常现象;(2)HuT-78可通过半量换液或者离心换液(1000rpm,3min)两种方式更换培养基。

参考资料

1. Fukushima, K. and K. Yamashita, Interleukin-2 Carbohydrate Recognition Modulates CTLL-2 Cell Proliferation. Journal of Biological Chemistry, 2001. 276(10): p. 7351-7356.

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关键词:
细胞,培养,培养基,生长,传代

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