BNP及NT-proBNP检测异质性问题相关解决方案

1.识别表位

在抗体生产和免疫分析设计选择表位时，应考虑到BNP/NT-proBNP的异质性[3]。1）为降低不同BNP检测平台间的差异，避免降解短肽段的漏检，BNP 6-26区段（包含环状区在内）为最佳的抗体识别表位[4]。2）为减少糖基化的影响，NT-proBNP检测抗体的识别表位应避开糖基化区域[4]。试剂厂家应明确抗体识别的精确表位，以供参考[3]。

2.样本采集

当测量BNP时，血液应用含有EDTA的塑料管采集。EDTA螯合可以使中性内肽酶（NEPs）失活。但BNP仍会继续降解，添加蛋白酶抑制剂（如抑酶蛋白），可稳定更长时间[3]。

3.样本保存

如在室温下储存，BNP样品应在收集后4小时内尽快检测。或离心分离血浆，加入钾化钾素或丝氨酸特异性蛋白酶抑制剂，在4℃下冷藏。如保存超过72小时，应在-70℃下冷冻[3]。

NT-proBNP在血清、肝素化血浆和EDTA血浆中的浓度相对稳定，可在室温或4℃保存72小时，-80℃下保存一年[3]。

4.试剂校准

目前，尚无参考物质可用，无法实现BNP/NT-proBNP标准化。试剂厂家应提供校准品的来源、种类等尽可能详尽的信息；以及材料纯度和浓度的分析文件，并提供校准曲线的描述（例如：点数、曲线或直线响应）等[3][4]。

5.国际单位

由于缺乏对SI单位的可追溯性，建议使用ng/L代替pmol/L[3]。

6.交叉反应性

试剂厂家应提供BNP和NT-proBNP检测与BNP 3-32的交叉反应性，以及所有NP和其他肽激素（包括proBNP及其多聚体）的交叉反应性。BNP检测应证明与BNP 3-32具有100%的交叉反应性[3]。

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