CAR-T细胞治疗进展（25）

编者按

随着CAR-T细胞疗法的蓬勃发展，每月都会出现新的CAR-T理念和技术。小编尝试把其中一些编录于此，以鼓励我们的患者——抗癌路上，有无数的科学家、医务工作者和我们并肩作战，并且不断取得新的胜利。

利用T细胞突变增强CAR-T疗法

2024年2月7日，来自美国的研究团队在Nature杂志上发布了他们的研究成果。该研究揭示了一种新的策略：利用自然发生的T细胞突变，显著提高CAR-T细胞治疗癌症的能力。

长久以来，CAR-T细胞疗法已在血液癌症治疗中取得了革命性的进展，但其在实体瘤治疗上的应用仍面临诸多挑战，如疗效短暂、易受免疫抑制环境影响等。研究团队发现，导致淋巴瘤的恶性T细胞的自然突变为它们赋予了在体内持续存在和增强抵抗力的能力。这一发现启发研究者探索将这些有益的基因突变应用于CAR-T细胞疗法中，以期克服现有疗法的局限。

研究过程中，团队首先筛选了导致T细胞肿瘤适应性突变，然后将这些突变引入到CAR-T细胞中，通过体外和体内实验评估其对T细胞功能的影响。其中，一种名为CARD11-PIK3R3的基因融合引人注目，这种突变显著增强了CAR-T细胞的肿瘤杀伤能力，并提高了它们在体内的持久性和治疗效果。

更令人振奋的是，整合了CARD11-PIK3R3突变的CAR-T细胞在治疗剂量上显著降低了需求，从而有望减轻患者在治疗过程中的身体负担。值得一提的是，研究期间并未发现这种改良后的CAR-T细胞有任何恶性转化的迹象，证实了其安全性。

第四代CAR-T细胞治疗乳腺癌

最近，《International Immunopharmacology》杂志刊登了一篇关于第四代抗Trop2 CAR-T细胞对乳腺癌细胞毒性的研究。该项研究展现了这种CAR-T细胞针对乳腺癌细胞的潜力，为未来在此领域的应用提供了科学依据。

研究团队集中在Trop2阳性乳腺癌细胞上进行了深入探索。Trop2是一种在多种肿瘤细胞上高度表达的分子，成为新一代CAR-T细胞疗法的目标。通过慢病毒技术，研究者构建了针对Trop2的CAR-T细胞，并在乳腺癌细胞系中测试其效能。

实验结果显示，这些改造后的T细胞能有效识别并杀灭Trop2阳性的乳腺癌细胞，而对正常细胞的毒性极低，并表现出比前代更强的杀伤力和更长的持久性。

在体外实验中，第四代CAR-T细胞展现出对乳腺癌细胞显著的杀伤效果，并在与癌细胞共培养后，产生了更多的IFN-γ，显示出它们强大的免疫激活能力。进一步的实验还证明了这些CAR-T细胞能在体内持续发挥作用，减少了对高剂量治疗的需求。

此外，研究还采用了三维球体模型来更贴近实际肿瘤环境的研究。结果表明，第四代抗Trop2 CAR-T细胞能够有效渗透并消灭这些模拟肿瘤结构，证实了它们在更复杂条件下的功效。

（抗 Trop2 CAR-T 细胞对表达 Trop2 的 BC 细胞系的细胞毒性有效性）

用CAR-T细胞治疗多种自身免疫病

德国埃尔朗根-纽伦堡大学的研究团队于2024年2月22日在《新英格兰医学杂志》发表论文，展示了CD19靶向CAR-T细胞疗法在治疗自身免疫病中的突破性进展。

论文详细报道了15位自身免疫病患者在接受CAR-T细胞疗法后病情显著好转的情况。这些患者中，8人患有系统性红斑狼疮，4人患有系统性硬化症，3人患有特发性炎性肌病。在经过15个月的中位随访期后，所有患者均无需进一步治疗，且完全停止了免疫抑制治疗。

以一位20岁的系统性红斑狼疮女性患者为例。在接受CAR-T细胞疗法前，她的病情严重，几乎触及生命的边缘。治疗后，她的症状不仅得到了完全缓解，而且在两年多的时间里保持无病状态。

研究过程中，大部分患者仅出现了轻微的细胞因子释放综合征，验证了CAR-T细胞疗法的安全性。其中一位患者发生了2级细胞因子释放综合征、1级免疫效应细胞相关神经毒性综合征和导致需住院治疗的肺炎，但没有发生严重不良事件。

这项研究为进一步的临床试验和疗法优化奠定了基础，有望为自身免疫疾病患者带来更有效的治疗方法。

以RNA靶向提升CAR-T疗效

斯坦福大学的研究团队最近开发出了一种新的基因编辑系统，命名为MEGA，即多重效应器引导阵列。这一系统不同于传统的CRISPR-Cas9技术，它采用Cas13d酶靶向RNA而非DNA，通过切割信使RNA（mRNA）分子来调节基因表达。

MEGA系统的开发基于这样一个核心理念：通过调整短暂存在的mRNA分子来实现基因表达的可逆调节，相比于直接编辑DNA，这种方法减少了永久性改变可能带来的风险。在细胞疗法中，这一优势尤为重要，即使发生错误的编辑，也不用担心，因为其影响会随着mRNA分子的降解而消失。

在CAR-T细胞疗法的应用上，MEGA系统展示了独特的优势。通过同时靶向多个mRNA分子，MEGA能够在人类T细胞中一次性关闭多达十个基因的表达。这种能力使其可以针对一系列复杂的生物学问题，尤其是那些涉及多个基因同时发挥作用的情况。

研究团队特别关注了CAR-T细胞面临的一个主要挑战——T细胞耗竭。这种耗竭状态使得T细胞在长时间对抗肿瘤的过程中失去活性，成为限制CAR-T疗法应用于实体瘤治疗的一大障碍。为了解决这一问题，研究人员通过MEGA技术调节了与糖代谢相关的基因组，使T细胞从快速糖酵解转向氧化磷酸化的能量生产方式，从而提升了它们在肿瘤环境中的生存时间和抗肿瘤能力。

实验结果证实，经过MEGA技术改造的CAR-T细胞，在体外以及癌症模型小鼠中均表现出比传统CAR-T细胞更强的耐力和更有效的肿瘤清除能力。这一发现不仅为CAR-T细胞疗法在实体瘤治疗中的应用开辟了新途径，也为细胞疗法的安全性和效能提供了新的调控手段。

参考文献：

1、Garcia J, Daniels J, Lee Y, et al. Naturally occurring T cell mutations enhance engineered T cell therapies[J]. Nature, 2024: 1-9.

2、Somboonpatarakun C, Phanthaphol N, Suwanchiwasiri K, et al. Cytotoxicity of fourth-generation anti-Trop2 CAR-T cells against breast cancer[J]. International Immunopharmacology, 2024, 129: 111631.

3、Müller F, Taubmann J, Bucci L, et al. CD19 CAR T-Cell Therapy in Autoimmune Disease—A Case Series with Follow-up[J]. New England Journal of Medicine, 2024, 390(8): 687-700.

4、Tieu V, Sotillo E, Bjelajac J R, et al. A versatile CRISPR-Cas13d platform for multiplexed transcriptomic regulation and metabolic engineering in primary human T cells[J]. Cell, 2024.