LB2102 | 又一双表位纳米抗体 CAR-T 疗法

前言

DLL3是在小细胞肺癌SCLC（~80%阳性）和其他神经内分泌肿瘤中普遍和均匀表达的有前景靶点，而在正常细胞组织中极少表达且仅存在细胞质中。小细胞肺癌占所有肺癌患者比例约15%，全球每年约27万新发患者，目前小细胞肺癌总生存期中位数不足10个月，五年总生存期比例不到3%，临床存在较大未满足需求。

传奇生物近日宣布与诺华就传奇生物的特定靶向DLL3的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法签订了独家全球许可协议，包括其自体CAR-T细胞疗法候选药物LB2102。传奇生物开发的 LB2102 是一款靶向DLL3双表位的CAR-T 疗法，并利用“武装”CAR-T技术克服肿瘤微环境的抑制因素。本期我们将通过传奇生物公开的专利，为大家梳理靶向DLL3纳米抗体的早期发现路径。

图1. 靶向DLL3纳米抗体的早研发现流程示意图

关键数据解读

骆驼sdAb的人源化

选择4条序列进行人源化，大部分sdAb在人源化后保持其结合亲和力（下表）。

图2. 人源化序列只存在两个半胱氨酸，且都位于骨架区。

人源化VHH CAR-T与scFc CAR-T活性比较

CAR3为一种人类抗DLL3 scFv（scFv自合成人类Fab噬菌体文库获得），在所有测定中CAR3 CAR-T细胞用作参考以比较测定变化，充当对照。

图3. 在SHP-77肿瘤细胞的3轮刺激下，大部分CAR-T构建体扩增超过CAR3 CAR-T。

图4. 在SHP-77肿瘤模型中，与基准CAR3相比，CAS64380VH5及CAS63997VH5展示优良抗肿瘤活性。

人源化抗DLL3串联CAR-T细胞的活体外活性的评估

为提高CAR-T的抗肿瘤功效，构建三个串联CAR(T1、T2及T3)。对于T1，sdAb 1及sdAb 2均为AS64380VH5。对于T2，sdAb 1及sdAb 2均为AS63997VH5。对于T3，sdAb 1及sdAb 2分别为AS63997VH5及AS64380VH5。

图5. Tandem CAR构建体的示意图

图6. 活体外细胞毒性结果表明，在长期刺激中T3具有优良细胞毒性及扩增。

TGF-β-DNR增强DLL3 CAR-T细胞的抗肿瘤功效

为提高DLL3 CAR-T细胞在肿瘤微环境中的抗肿瘤性能，将TGF-β-DNR序列合并至DLL3CAR中。TGF-β-DNR为TGFBRII的截短型式，其由TGFBRII的细胞外结构域及跨膜域组成。体外细胞毒性测定证明TGF-β-DNR能够增强DLL3 CAR-T细胞针对DLL3阳性SCLC细胞的细胞毒性。

图7. TGF-β-DNR装甲的CAR-T细胞诱发比未装甲的CAR-T细胞更多的靶细胞特异性溶解(左）和抗原活化后较高的IFN-γ释放能力（右）。

人源化抗DLL3 PD-1DNR或CSR装甲的CAR-T细胞的活体内活性的评估

为提高CAR-T的持久性，构建PD-1显性负性受体(PD-1DNR)或PD-1嵌合转换受体(PD-1CSR)装甲的DLL3 CAR。在经SHP-77细胞反复刺激后，与常规CART相比，装甲的CAR-T细胞未增加细胞毒性效力，且未提高扩增能力。在经SHP-77/PD-L1细胞(SHP-77细胞中过度表达人PD-L1)反复刺激后，PD-1 CSR装甲的CAR-T细胞显示优良细胞毒性效力及扩增能力。

图8. PD-1 CSR装甲的CAR-T细胞显示优良细胞毒性效力及扩增能力。

小结

类似于首款基于VHH开发的，靶向双表位BCMA的CAR-T产品西达基奥仑赛(cilta-cel)，LB2102同样采用了串联设计靶向DLL3的双表位，体内体外活性评估证明串联的双表位CART构建体相较于单价VHH和scFv的CART构建体，具有更显著的抗肿瘤疗效和扩增能力。

参考专利：CN114072427A抗DLL3嵌合抗原受体及其用途

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