案例分享|| 坑连坑地检出抗M抗体1例

今天这个案例，真所谓坑连坑（当然，有些坑，是笔者自己挖的，蠢哭😭😭），与大家分享，希望能为大家以后避坑提供一点参考。      

一、基本信息

女性，29岁，孕37周待产，孕2产0，因ABO正反定不符和抗筛阳性，临床输血科送检我中心输血技术研究室进行疑难血型鉴定、抗体鉴定以及交叉配血。

二、输血相容性检测

    1、血型检测 正反定不符，亚型？意外抗体干扰？非特异性干扰？ 回顾患者临床资料，抗筛阳性，故先考虑意外抗体。

 2、抗筛结果如下： Sanquin筛细胞结果如下：  

博迅筛细胞结果如下：

Sanquin和博迅的抗细胞都提示可能是抗-Lea和/或抗-M，考虑到该案例为孕妇，Lea抗体可能更常见。于是，走个捷径先验证Lea看看。 

3、挑选七个谱细胞（Sanquin），以及两个Lea抗原阴性献血者进行试验。 谱细胞反应格局（阴阳性）符合抗-M，但凝集程度不符合剂量效应。孕妇血浆与两名Lea抗原阴性献血者反应，结果为一阴一阳，阳性结果凝集程度为2+。根据初步抗鉴结果，暂排除抗-Lea。进一步检测两名献血者MN血型，结果均为M+N+。这是什么鬼？同样的杂合子细胞，反应怎么差这么大呢？ 

4、继续补齐剩余谱细胞，反应格局仍符合抗-M。  

5、继续上酶谱试验，凝集程度减弱，支持抗-M的推断。但剂量效应问题还是没有解决。  

6、增加一套谱细胞继续抗体鉴定： 阴阳格局依然符合抗-M，但剂量效应还是不相符。即便M纯合子的强弱都不统一，怎么解释？用什么方法可以印证鉴定结论的正确性？ 唉，剂量效应不符就不符吧。 

7、继续用2-me处理后抗鉴 用2-me破坏后，反应格局依然符合抗-M，说明血清中有IgG类抗-M，该抗体可能会通过胎盘进入新生儿体内，有MNS系统的新生儿溶血风险。 综合以上所有试验结果，可确认该意外抗体为抗-M。    

三、那么，问题来了：

1、 为什么 ABO 反定型中只有 A1c 出现 1+ ，而 Bc 和 Oc都均为阴性? 

2、供者4号和5号的抗原均为M+N+，卡上配血结果4号阴性，5号2+，这是为什么？

3、抗体鉴定过程中，血清与谱细胞的反应凝集程度不符合剂量效应，但阴阳性格局相符，且即便是M纯合子，其反应的强弱都不统一，怎么解释？用什么方法可以印证鉴定结论的正确性？

对于以上3个问题，笔者在公号小编群里发起了求助。经梁延连老师和张志昇老师仔细解答，现将笔记整理如下。 梁延连老师： 不同个体间的M抗原数量可以存在明显的差异。MM型的M抗原在不同个体间存在差异，相对MN型的数量明显多。

张志昇老师： 从这段Mur的形成图中, 大 致需要了解一下, Mur是在GYB的B3插入了GYA的pseudo A3 ( Tsai , 也就是那个像叉子状的罗马字, 念Tsai)。在GYPB插入了pseudo A3, 形成B_A_B杂交, 就会有几种情形, 如果基因型是M(Mia), 他的GPYA上的M抗原偏弱, 且GYPB上会有pseudo N出现, 为什么叫伪N抗原, 因为不是表达在正常的GPYA上, 而是在GPYB上表现出伪N, 因为基因型是M。 這篇文章是我試了不同廠牌的抗-N測試MN上含Mia及無Mia, 偽N的強度。简单的说, 基因型是M/M(Mia)的, 表达型会表现出MN-Mia或MM-Mia但M抗原会有纯合子的强度, 如下图的3号谱细胞,但若基因型是M(Mia)/M(Mia)则可能出现MN杂合子表达量, 且M会非常弱。

问题1： 为什么 ABO 反定型中只有 A1c 出现 1+ ，而 Bc 和 Oc都均为阴性?

答：对反定细胞进行M抗原检测：A1c 4+，Bc 2+mf，Oc 1+mf。国产的反定细胞都是由三个同型的A/B/O细胞混合而来，推测估计是三个同型的Ac献血者都是M+，Bc应是两个献血者M+,Oc只有一位献血者M+。可能是由于抗-M效价不是很高，故只能与Ac反应，而与Bc、Oc不反应。

问题2：供者4号和5号的抗原均为M+N+，卡上配血结果4号阴性，5号2+，这是为什么？

答：猜测4号献血者有可能是基因型M(Mia)/N而5号献血者可能是正常的MN基因型, 这个猜测, 无法确认, 除非做一下4号的Mia抗原。

问题3：抗体鉴定过程中，血清与谱细胞的反应凝集程度不符合剂量效应，但阴阳性格局相符，且即便是M纯合子，其反应的强弱都不统一，怎么解释？用什么方法可以印证鉴定结论的正确性？

答：感觉Sanquin的格局大至还符合剂量, 仅第12号特别强, 本来我怀疑有抗-cE, 但显然抗筛己可排除, 所以, 我也无法解释Sanquin的第12号为什么特别强, 也许如梁延连老师的流式试验所验证, 某些就是M抗原会多一点。但營安的細胞, 第7號的M特別弱, 我懷疑基因型應是M(Mia)/N或者M(Mia)/M(Mia)但會表達出MNMia的表達型, 这个可以使用标清测一下营安的7号谱细胞M抗原强度就可验证。所以大致解释一下, 基因型若是M(Mia), 会表达出伪N抗原, 也会弱化M抗原强度, 也会弱化s表达, 所以若纯合子Mia/Mia, 就可能连带s抗原几乎为阴性(不同厂牌的标清测到不同表达), 甚至出现JENU抗原阴性。

以上两位老师的解答，让笔者大开眼界。没想到MNS血型系统的抗原如此复杂，还须继续加强理论知识的学习。  

四、回顾性分析总结     

该标本是下午快下班的时候送来的，根据临床医院的抗筛结果和我们的初步抗筛试验，可能为抗-M或抗-Lea，我们根据经验，孕妇标本，猜想抗-Lea可能性更大，于是就走了捷径，直接验证Lea，没想到却哐当掉进了坑里。初步试验结果指向抗-M，但是随机两名献血者都是M+N+，结果却相差甚远，这是第二个坑。继续补齐抗鉴试验，发现其并不符合常规的剂量效应，这是第三个坑。最后，通过酶试验及增加另外的谱细胞等方法，才最终确认为抗-M。

该案例给笔者的另外一个最大的提示就是，经验很重要，但有时也会失灵，当试验结果与预期不符时，还得一步一步按流程来，有时候，捷径反而是最远的路。

好啦，以上就是本案例的全部过程和分析总结，希望能给到大家一点提示和帮助，以后再遇到同类型的标本时，能够有效的避坑哦。

本文作者：李卿，单位：太原市血液中心。编辑整理：曾群娟。修改、审核：梁延连、张志昇。

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