干货：基质胶是什么？有什么作用？

EHSgel® Basement Membrane Matrix

EHSgel® matrix基质胶是从富含细胞外基质蛋白的小鼠肉瘤Engelbreth-Holm-Swarm (EHS)中提取纯化制备的可溶基底膜基质。EHSgel®基质胶的主要成分是四种基底膜基质蛋白：Laminin, Collagen IV, Entactin/Nidogen 以及 Heparin sulfate proteoglycan，此外还包含如TGF-β1、IGF、FGF等多种细胞因子等（Growth Factor Reduced类产品去除了小分子量蛋白因子）。EHSgel® matrix基质胶在37℃自组装成超级分子结构，在物理特性、组成成分和功能特征方面与天然基底膜类似。 

EHSgel® matrix基质胶为细胞培养提供更加接近生理条件的微环境，适用于类器官培养、干细胞维持和分化，血管生成，肿瘤浸润，体内疾病模型构建及再生医学等多种实验或研究领域。  

图1. EHSgel Basement Membrane Matrix 产品图片

图2. EHSgel Matrix RGF, Phenol Red Free 在细胞培养板中形成凝胶滴的实拍照片

图3. EHSgel Matrix RGF在细胞培养板中形成凝胶悬滴的实拍照片

EHSgel® Matrix的主要基底膜基质蛋白含量

基质胶的主要成分为Collagen IV，Laminin，Entactin/Nidogen和Heparin sulfate proteoglycan（Perlecan）。我们用特异性抗体建立ELISA检测方法。实验检测相同体积的MG和6个不同批次的EHSgel中4种主要组分相对定量，发现相同体积下，EHSgel的4种主要成分均显著高于MG。（图4）

图4. EHSgel主要成分ELISA相对定量检测

EHSgel® Matrix 质量控制

每一批次的EHSgel® Matrix基质胶在上市前都已通过以下质量控制检测：

EHSgel® Matrix 应用数据

人非小细胞肺癌类器官建模培养测试：

图5. 人非小细胞肺癌类器官就培养明场

人非小细胞肺癌样本PT-79094分离的肿瘤细胞，使用Competitor C MG基质胶和EHSgel Matrix 进行平行建模及扩增培养测试，上图为在两种细胞基质产品中进行类器官培养的对比照片。

图6. 人非小细胞肺癌类器官培养照片

人非小细胞肺癌样本PT-91495分离的肿瘤细胞，使用Competitor C MG基质胶和EHSgel Matrix进行平行建模及扩增培养测试，上图为在两种细胞基质产品中进行类器官培养的对比照片。

人乳腺癌类器官建模培养测试：

图7. 人乳腺癌类器官培养照片

人乳腺癌样本PT-83107分离的肿瘤细胞，使用Competitor C MG基质胶和EHSgel Matrix进行平行建模及扩增培养测试，上图为在两种细胞基质产品中进行类器官培养的对比照片。

人卵巢癌类器官建模培养测试：

 图8. 人卵巢癌类器官培养照片

人卵巢癌样本PT-56800分离的癌细胞，使用Competitor C MG基质胶和EHSgel Matrix 进行平行建模及扩增培养测试，上图为在两种细胞基质产品中进行类器官培养的对比照片。

人胃癌类器官建模培养测试：

图9. 人胃癌类器官培养照片

人胃癌样本KO-42212分离的肿瘤细胞，使用Competitor C MG基质胶和EHSgel Matrix 进行平行建模及扩增培养测试，上图为在两种细胞基质产品中进行类器官培养的对比照片。

人胆管癌类器官建模培养测试：

图10. 人胆管癌类器官培养照片

人胆管癌样本PT-98890分离的癌细胞，使用Competitor C MG基质胶和EHSgel Matrix 进行平行建模及扩增培养测试，上图为在两种细胞基质产品中进行类器官培养的对比照片。

体外血管生成检测 (In Vitro Angiogenesis Assay)

血管生成检测是一种在基质胶上的血管内皮细胞形成具有微血管结构的检测，用于评价促进或者抑制血管生成的影响因素。如果环境条件适合形成血管，血管内皮细胞会形成类似于血管的微管腔网格结构。EHSgel测试可以提供血管内皮细胞形成血管所需要的ECM支撑环境，在加入适当的培养基和生长因子（FGF,VEGF 等）可以形成微管腔网格结构。图A和B分别为HUVEC细胞在MG和EHSgel上，在30ng/ml FGF2的HUVEC完全培养基中培养3小时后采集的照片。图C和D为HUVEC细胞在MG和EHSgel上，在含有30ng/ml FGF2的完全培养基中培养5小时，用钙黏素染色后，在荧光显微镜下采集的照片。

图11. 人血管内皮细胞体外血管生成测试

移植瘤模型体内成瘤率测试 (In Vivo Tumorigenicity Test)

EHSgel可以显著增强肿瘤细胞或组织在原位或皮下移植瘤成瘤效果。本测试实验采用MDA-MB-231三阴性乳腺癌细胞进行皮下移植瘤成瘤率测试。MDA-MB-231细胞单独皮下移植的成瘤率低，但是细胞在混合基质胶注射移植后，可以明显提高该移植瘤的瘤体生长速度和成瘤率。在该检测中，1x106个MDA-MB-231细胞按1:1体积分别与MG，EHSgel 或PBS混合后，注射到BALB/c裸鼠皮下，测试30天内移植瘤的生长速度和成瘤率。测试表明，EHSgel组在成瘤率和生长速度方面，均与MG组相当，且两组均明显高于PBS对照组。（图12. A和C）。实验表明，EHSgel可以支持MDA-MB-231细胞体内成瘤。（图12，B和D）

 图12. 人乳腺癌细胞系MDA-MB-231体内成瘤测试