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肌酸激酶同工酶(CKMB)介绍

2023-09-19 15:21   卡梅德生物

抗原和抗体是制备免疫诊断类试剂的重要原料,抗原包括重组抗原、天然抗原等,通过基因工程重组技术、蛋白纯化技术、细胞生物学技术及化学合成技术等方法制备。

肌酸激酶同工酶(Creatine kinase isoenzymes,CK)是广泛存在于骨骼肌、心肌等肌肉组织中的一种成分,而肌酸激酶同工酶是心脏中肌酸激酶的特殊成分,属于肌酸激酶的一种亚型,只存在于心脏中,因此可以作为心肌损伤特异性标志物。CK-MB在正常血液中检测不到或仅有微量肌酸激酶同工酶存在。只有心肌损伤后,心肌细胞破裂,肌酸激酶从心肌细胞中释放吸收进入到血液中,才可通过抽血化验发现肌酸激酶同工酶升高,此时便提示心肌存在损伤。肌酸激酶同工酶升高常见病因有急性心肌梗死、急性心肌炎等。

CKMB蛋白分子结构

肌酸激酶(CK)通常存在于动物的心脏、肌肉及脑等组织的细胞浆和线粒体中,是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP 再生有直接关系的重要激酶,它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。是由M和B两个亚基组成的一种二聚体,存在四种同功酶形式:肌肉型(MM)、脑型(BB)、杂化型(MB)和线粒体型(Mt)。MM 型主要存在于各种肌肉细胞中,BB 型主要存在于脑细胞中,MB 型主要存在于心肌细胞中,Mt 型主要存在于心肌和骨骼肌线粒体中。正常人血清中以CKMM为主,CKBB含量极微,CKMB较少并主要存在于心肌细胞中,急性心肌梗死(AMI)时心肌细胞受损,膜的完整性和通透性改变,使细胞内的大分子逸出,能在外周血中被检测到。这些大分子物质因而被称为心肌损伤标志物。在这些心肌标志物中CK-MB是升高最早,上升幅度最大的一种酶,它是迄今为止诊断AMI最佳,临床应用最广泛的血清酶指标之一。

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图1 CKMB分子结构示意图

CKMB的生物学功能

目前测定CK-MB有几种主流的方法:免疫抑制法(活性)、胶乳免疫比浊法(质量)、化学发光免疫分析法(质量),目前大部分的检验科采用的仍然是免疫抑制法测定,其原理为CK-MB本身含有一半的M亚基,采用CK-M抗体抑制M亚基活性后,其只剩下了CK-B亚基,将结果乘以2后即为CK-MB真实含量,但是该方法学是假定CK-BB活性可忽略不计的情况下来计算的,但实际上,溶血及血液中巨CK、CK-BB和CK-MM亚型等都会对测定结果产生干扰现象,导致 CK-MB活性结果偏高,甚至出现CK-MB>CK的现象出现,这也是CK-MB的活性检测的弊端。而CK-MB质量测定则不同,是由于其采用了抗原抗体特异性反应的原理,血清中的CK-MB只与试剂盒中的抗CK-MB抗体反应,故不会受到CK-BB等物质的干扰,提高了检测特异性与准确度。

抗原和抗体是制备免疫诊断类试剂的重要原料,抗原包括重组抗原、天然抗原等,通过基因工程重组技术、蛋白纯化技术、细胞生物学技术及化学合成技术等方法制备;抗体包括单克隆抗体及多克隆抗体等,通过免疫技术、杂交瘤细胞技术、细胞发酵技术等方法制备。

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