肌酸激酶同工酶（CKMB）介绍

肌酸激酶同工酶(Creatine kinase isoenzymes，CK)是广泛存在于骨骼肌、心肌等肌肉组织中的一种成分，而肌酸激酶同工酶是心脏中肌酸激酶的特殊成分，属于肌酸激酶的一种亚型，只存在于心脏中，因此可以作为心肌损伤特异性标志物。CK-MB在正常血液中检测不到或仅有微量肌酸激酶同工酶存在。只有心肌损伤后，心肌细胞破裂，肌酸激酶从心肌细胞中释放吸收进入到血液中，才可通过抽血化验发现肌酸激酶同工酶升高，此时便提示心肌存在损伤。肌酸激酶同工酶升高常见病因有急性心肌梗死、急性心肌炎等。

CKMB蛋白分子结构：

肌酸激酶(CK)通常存在于动物的心脏、肌肉及脑等组织的细胞浆和线粒体中，是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP 再生有直接关系的重要激酶，它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应。是由M和B两个亚基组成的一种二聚体，存在四种同功酶形式：肌肉型(MM)、脑型(BB)、杂化型(MB)和线粒体型(Mt)。MM 型主要存在于各种肌肉细胞中，BB 型主要存在于脑细胞中，MB 型主要存在于心肌细胞中，Mt 型主要存在于心肌和骨骼肌线粒体中。正常人血清中以CKMM为主，CKBB含量极微，CKMB较少并主要存在于心肌细胞中，急性心肌梗死(AMI)时心肌细胞受损，膜的完整性和通透性改变，使细胞内的大分子逸出，能在外周血中被检测到。这些大分子物质因而被称为心肌损伤标志物。在这些心肌标志物中CK-MB是升高最早，上升幅度最大的一种酶，它是迄今为止诊断AMI最佳，临床应用最广泛的血清酶指标之一。

图1 CKMB分子结构示意图

CKMB的生物学功能

目前测定CK-MB有几种主流的方法：免疫抑制法（活性）、胶乳免疫比浊法（质量）、化学发光免疫分析法（质量），目前大部分的检验科采用的仍然是免疫抑制法测定，其原理为CK-MB本身含有一半的M亚基，采用CK-M抗体抑制M亚基活性后，其只剩下了CK-B亚基，将结果乘以2后即为CK-MB真实含量，但是该方法学是假定CK-BB活性可忽略不计的情况下来计算的，但实际上，溶血及血液中巨CK、CK-BB和CK-MM亚型等都会对测定结果产生干扰现象，导致 CK-MB活性结果偏高，甚至出现CK-MB>CK的现象出现，这也是CK-MB的活性检测的弊端。而CK-MB质量测定则不同，是由于其采用了抗原抗体特异性反应的原理，血清中的CK-MB只与试剂盒中的抗CK-MB抗体反应，故不会受到CK-BB等物质的干扰，提高了检测特异性与准确度。

抗原和抗体是制备免疫诊断类试剂的重要原料，抗原包括重组抗原、天然抗原等，通过基因工程重组技术、蛋白纯化技术、细胞生物学技术及化学合成技术等方法制备；抗体包括单克隆抗体及多克隆抗体等，通过免疫技术、杂交瘤细胞技术、细胞发酵技术等方法制备。