毕赤酵母蛋白表达

毕赤酵母蛋白表达是指利用毕赤酵母（Pichia pastoris）系统来高效表达目标蛋白。毕赤酵母是一种常用的真菌表达系统，具有许多优势，包括高产量、可溶性表达、易于培养和适应多种表达条件等。

蛋白表达是指利用细菌、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术，是基因工程技术中的重要组成部分之一。毕赤酵母表达系统由于其低成本高产出并具有一定翻译后修饰等优点而被越来越多的使用。

一、毕赤酵母表达系统特征

酵母表达系统包括酿酒酵母表达系统，甲醇酵母表达系统以及其他酵母表达系统。毕赤酵母属于甲醇营养型酵母，能够将甲醇作为唯一碳源[1]。那么毕赤酵母表达系统有哪些优势呢，我们总结了以下主要几点：

（1）拥有目前最强，调控机理最严格的启动子之一醇氧化酶基因AOX1启动子，非常利于外源基因的表达调控[1]；

（2）具有翻译后的蛋白加工修饰功能例如磷酸化、糖基化等，是一种不可多得的集聚多种优势的真核表达系统；

（3）既可以在细胞内表达，也可在细胞外表达[1]；

（4）培养基成本低廉，培养条件简单，生长繁殖速度迅速；

（5）外源基因可以单拷贝或者多拷贝的形式在特定的位点整合进酵母染色体上，伴随着染色体的复制而复制，有较高的遗传稳定性，同酿酒酵母一样以稳定的表达菌株存在[2]；

（6）可以进行大规模发酵，适合高密度培养，非常适合重组真核蛋白的工业放大化生产制备。

表达毕赤酵母蛋白的一般步骤包括：

克隆：将目标基因插入适合的表达载体中，构建表达载体。

转化：将表达载体导入到毕赤酵母细胞中，使其成为转基因细胞。

筛选：通过选择性培养基或标记基因来筛选出带有目标基因的转基因毕赤酵母细胞。

培养和诱导表达：将筛选出来的转基因毕赤酵母细胞进行适宜的培养，然后通过添加适当的诱导剂来诱导目标蛋白的表达。

蛋白纯化：通过各种蛋白纯化技术，如离子交换层析、亲和层析或凝胶过滤等，纯化目标蛋白。

毕赤酵母蛋白表达系统在产生重组蛋白方面具有很高的效率，可应用于研究和产业领域。

打赏