脐带间充质干细胞移植干预61例卵巢早衰患者的临床案例分析

女性卵巢早衰近年来呈上升和年轻化趋势，对女性生殖健康的两大威胁主要是雌激素水平降低及生育能力丧失，还容易引发各种心理问题。然而目前仍未找到关于卵巢早衰切实有效的治疗方法，随着干细胞技术的成熟和发展，越来越多干细胞干预卵巢早衰的临床研究出现并获得成功。

今天跟大家分享一则中国科学院干细胞与再生研究所通过人脐带间充质干细胞异体移植治疗卵巢早衰的临床分析。研究人员移植注射GMP临床级脐带间充质干细胞（UCMSCs）到患者卵巢，长期随访发现脐带间充质干细胞能够有效地恢复卵巢功能，促进卵母细胞成熟。经体外受精（IVF）和胚胎移植后，4例患者在移植后成功受孕，婴儿均发育正常。

目的：中国科学院干细胞与再生研究所用脐带来源的MSCs(UCMSCs)治疗卵巢早衰（POF）患者，然后通过随访研究卵巢功能的恢复和临床结果。

材料和方法：61名诊断为POF的患者参与了本研究。按照GMP标准分离培养UCMSCs，在阴道超声引导下原位注射移植至患者卵巢。我们在随访期间监测了副作用、生命体征和临床变化，并收集了血液学和影像学参数。

临床研究设计：这项非随机临床试验在广州医科大学第三附属医院进行，旨在评估卵巢内注射UCMSCs治疗的POF女性的临床结果。在整个UCMSC治疗期间，所有患者都接受了标准的雌二醇激素替代方案。纳入研究的所有个体均在第一轮注射中接受卵巢内注射UCMSCs（n=61）；一些人继续接受第二次卵巢内注射UCMSCs(n=50)；最后，一些患者接受了第三次卵巢内注射UCMSCs(n=30)。MSC注射液在100µL盐水中含有0.5×107UCMSCs，单侧卵巢含5%AB血浆，1×107UCMSCs用于双侧卵巢。所有组均在注射UCMSCs后随访6个月。

主要结果：通过超声引导下经阴道注射将脐带间充质干细胞移植给患者，结果定义为干细胞干预后每月成熟卵母细胞的数量（表2）。所有患者均接受了第一轮手术；但部分患者未能接受第二轮和第三轮移植，导致数例失访。术后每月收集AMH、窦卵泡（AFC）、优势卵泡数（DFC）和成熟卵泡数（MFC）的数据。特别是，我们只能在第一次移植五个月后获得六名患者的结果；因此，我们将第5个月和第6个月的数据整合到一个项目中以更加直观。

结果，分别有31.1%（19/61）、11.8%（6/50）和13.3%（4/30）的患者在第一次、第二次和第三次手术后获得了成熟的卵泡。患者卵泡发育有明显改善趋势，包括AFC上升，DFC和MFC数量增加，尽管排除了失访，但AMH水平升高。50名患者在经过严格的临床评估后进行了第二次移植。30名患者参加了第三轮手术。同样，最近两次注射的患者在相关卵泡计数指标方面似乎获得了更好的卵巢功能。此外，三名患者接受了单侧注射，因为通过阴道超声检查对侧卵巢不可见（参加最后两次注射的患者在相关卵泡计数指标方面似乎获得了更好的卵巢功能。)

干细胞治疗后的卵泡发育

缩写：AFC，窦卵泡计数；AMH，抗苗勒管激素；

DFC，优势卵泡计数；MFC，成熟卵泡计数

取卵和妊娠特征

收集了15名接受取卵的患者的基本特征，包括取卵周期、胚胎移植和妊娠次数。一般来说，四个胎儿没有出生缺陷，三个胚胎来自ICSI的受精类型，而最后一个是自然受孕的。1例术中超声扫描显示，在经阴道超声（TVUS）引导下，卵巢未见间质增生或其他异常卵巢结构（图2A）。这名妇女在体外受精后成功怀孕，并在第8周进行了基本产前程序的超声扫描（图2B)，第13周（图2C)和第32周(图二D)显示正常的胎儿发育。微卫星位点分析显示，胎儿（图2F）与母亲有遗传关系（图2E)供体UCMSC以外的其他人（图2G）。

图2：妊娠和新生儿结局。(A)超声扫描显示USMSCs移植过程中有穿刺过程；(B-D)孕周8周 (B)、13周 (C)和32周 (D)妊娠患者的超声检查；(E-F)母血(E)、胎儿脐带(F)和供体细胞(UCMSCs)(G)的微卫星位点分析

干细胞移植治疗卵巢早衰之前与治疗后的相关性

为了确认治疗效果与治疗之前之间的关系，我们比较了19名在UCMSC注射后获得成熟卵泡的患者和其他42名未发育成熟卵泡的患者的基本临床特征。MFC患者的中位年龄为30岁，闭经持续时间为1.3年。这些MFC患者的E2血激素水平有高于无MFC组的趋势，两组之间LH和FSH水平没有差异。作为卵巢储备的有效指标，还测试了AMH水平。总体而言，MFC组36.8%的AMH水平≥0.06ng/mL，而无MFC组的比例为 21.4%。

表3：有和没有MFC患者的基线特征，缩写：AFC，窦卵泡计数；AMH，抗苗勒管激素；BMI，体重指数。a平均直径。b左侧卵巢。c右侧卵巢。

探索影响干细胞临床治疗疗效的因素

基于上述发现，我们接下来分析了闭经时间和术前窦卵泡（AFC）对主要结局的影响。

首先，我们根据绝经期将患者分为三组（小于1年、1-3年和大于3年）（表4）。三组首次手术后成熟卵泡数（MFC）获得率分别为70%、41.2%和14.7%（P=0.002）；第二次移植后MFC获得率为33.3%、20%和3.1%，而第三次移植后的数量分别为33.3%、16.7%和5.6%。

结果表明，在前两轮脐带间充质干细胞移植期间，闭经超过三年的患者MFC和优势卵泡数（DFC）发展的频率显著降低。然后，我们比较了19例术前有窦卵泡的患者和没有的患者的特征。考虑了年龄、闭经持续时间、BMI、怀孕和分娩史、性激素水平、卵巢直径。发现这两组之间的闭经持续时间（2 (0.33, 3) vs 4 (2, 9)）和卵巢直径有显着差异，表明这两个基线特征可用作术前AFC的指标。

表4：闭经持续时间和治疗效果

年龄通常被认为是影响女性生殖结果的重要因素。此外，研究期间发现总窦卵泡被视为影响该治疗期间成熟卵泡数发展的潜在因素。

表5：影响主要结局的危险因素的逻辑回归分析，缩写：AFC，窦卵泡计数；AMH，抗苗勒管激素；BMI，体重指数；CI，置信区间；年龄、闭经持续时间、BMI、妊娠史、分娩史、E2、LH、FSH和卵巢直径是非正态分布的连续变量。AMH：总AFC和移植数量是分类变量。a平均直径。b左侧卵巢。c右侧卵巢。

不良事件：干细胞临床治疗的安全性是临床应用中最关注的问题。在这项试验中，所有患者均未出现与治疗相关的严重副作用或并发症。

结果：所有患者均表现出正常的临床行为，没有与治疗相关的严重副作用或并发症。脐带间充质干细胞的移植挽救了卵巢功能不全患者的卵巢功能，表现为卵泡发育增加和卵子收集改善。闭经时间较短（<1年）的POF患者在干细胞干预后似乎更容易获得成熟卵泡，卵巢状况较好的患者（术前窦卵泡）更有可能通过脐带间充质干细胞注射获得更好的结果。脐带间充质干细胞移植后卵巢早衰患者临床分娩成功4例，均发育正常。

参考资料：

Yan L, Wu Y, Li L, Wu J, Zhao F, Gao Z, Liu W, Li T, Fan Y, Hao J, Liu J, Wang H. Clinical analysis of human umbilical cord mesenchymal stem cell allotransplantation in patients with premature ovarian insufficiency. Cell Prolif. 2020 Dec;53(12):e12938. doi: 10.1111/cpr.12938. Epub 2020 Oct 29. PMID: 33124125; PMCID: PMC7705906.

打赏