换个方法，让这个意外抗体“现出原形”！

意外抗体，指正常ABO血型中抗A、抗B之外的血型抗体。由于意外抗体可能导致血型鉴定及交叉配血困难、溶血性输血反应、新生儿溶血病、红细胞输注无效等,因此在检测到意外抗体后，应鉴定其特异性，并评估其临床意义。但是在实际工作中，受到抗体筛查细胞的质量或抗原分布、试验方法的敏感性、被检抗体的效价或亲和力等因素影响，不是所有意外抗体都能“原形毕露”。这个时候，输血科工作人员要客观分析各种试验方法的局限性，利用不同方法的优势互补，在有限条件下做最优选择，提高抗体检测效率。

案例分享：

患者张X、42岁、女性、有孕产史、无输血史、发现腹部包块1月，入院后完善检查后拟行包块切除，术前HGB：92g/L，申请常规备血2U

①初次常规试验结果：

血型（试管法）：

抗筛(抗人球蛋白卡)：

抗鉴（10组谱细胞）(抗人球蛋白卡)：

由以上试验结果，患者血浆中存在意外抗体。但抗鉴结果阴性，特异性未明确。需进一步行补充试验。

理思路：

→患者女性，有孕育史，术前已轻度贫血，接近中度贫血，输血可能较大（应尽量输注不含针对该抗体相对应抗原的供者红细胞）；

→常规抗筛阳性，抗鉴阴性，可能是由于抗鉴细胞新鲜度较差、抗体效价低，常规检测无增强介质、反应时间短等，应进一步改变试验方法，增强抗原抗体反应，明确抗体特异性；

明方向：

→根据本实验室现有条件，加做试管法抗筛（室温、4℃）、改良抗人球抗筛及抗鉴；（注：改良抗人球蛋白法是非正式用语,这里指经典抗人球法的后半方法,即最后一步在没有瓶装抗人球试剂的情况下，用抗人球卡代替。）→根据进一步试验结果，判定抗体特异性，避开相应抗原供者，进行交叉配血。

②进一步试验结果：

不同条件及方法抗筛结果如下：

改良抗人球法抗鉴(10谱）结果如下：

③部分试验图片展示： 

抗筛结果对比：

常规抗人球蛋白法

改良抗人球蛋白法

10谱里的其中3个阳性细胞（改良抗人球蛋白法）：

根据所有试验结果及本实验室既往抗体产生经验，对照格局表，判定该意外抗体为抗-E抗体。选取E抗原阴性供者血液行盐水法、凝聚胺法、微柱凝集抗人球蛋白法交叉配血试验，结果均相合，与临床沟通后备用。（注：本实验所用试剂和卡均已通过当日的室内质控，且改良抗人球蛋白法同时用已知抗-D阳性的标本作为平行对照）

思考：

抗球蛋白法又称Coombs试验，是经典的检测IgG抗体的方法之一，分为直接抗球蛋白法和间接抗球蛋白法。后者用于检测血清中游离的IgG抗体,检测时要做阴性和阳性对照,用盐水代替抗球蛋白试剂作阴性对照，IgG抗-D致敏的O型RhD阳性红细胞作阳性对照。间接抗球蛋白试验用于交叉配血和抗体检测，其特点是红细胞致敏后的再次洗涤，可以去除血浆蛋白等非特异性干扰因素,这是卡式法所欠缺的。

经典间接抗球蛋白试验作为金标准方法，试验结果可靠。但因其操作复杂，所需时间较长,因此不作为常规方法使用,通常用于疑难配血。但是对于一些实验手段有限，通过常规延长反应时间没有达到增强效果的抗体，可以选择此方法。传统的抗人球试剂不宜保存，结果易受操作人员等因素影响，改良抗人球法在大多实验室就较容易实现。需要注意的是，因其整个反应在37℃进行，部分冷反应性抗体用这个方法可能效果欠佳，为了保证试验的可靠性，请务必同时加做平行试验。 

总结：

影响意外抗体筛查结果的因素很多,如实验室人员操作和判读能力、试验方法的敏感性、抗体筛查细胞的抗原覆盖面、剂量效应、自身抗体干扰等，每个实验室都很有必要定期回顾、分析、总结本实验室既往抗体产生规律（如:抗体产生人群、特异性、性质等），还要对本实验室所用的实验方法进行深入研究，熟知不同实验方法的优、劣之处，进而优化、完善自己实验室的检测手段，最终制定适合本实验室的检测流程，尽可能提高对新产生未知抗体的鉴定能力。 

参考文献： 

《输血技术操作规程》主编：汪德清、宫济武 

《AABB技术手册》主译：桂嵘、王勇军、黄远帅等

《中华输血学》主编：杨成民、刘进、赵桐茂

打赏