关于聚凝胺实验的几个小建议
哈喽,亲爱的临床输血小伙伴们!小编有幸参加上海市血液中心主办的《免疫血液学质量控制和新技术培训班》,从中获益良多,近期会将学习到的一些知识点及心得分享给大家,希望对大家日常的工作有所帮助。
在分享聚凝胺实验的几个小建议之前,先给大家来两个名词解释(查阅很多工具书上都没有具体定义)。
ABO疑难血型:指ABO血型鉴定时出现不符合ABO血型系统抗原-抗体规则(兰德斯坦纳一般规律)的实验结果,无法正确判断ABO血型的情况。
疑难交叉配血:是指患者血浆中存在意外抗体(ABO以外抗体)的交叉配血。
言归正传,回到聚凝胺实验,因其简单快捷、灵敏度高,被广泛使用,想必输血相容性检测实验室的各位老师们最熟悉不过啦,具体原理、操作步骤、实验结果判读等就不再一一赘述啦。
小编通过这次学习,发现在进行聚凝胺实验时需要注意以下几个问题。
1.在进行聚凝胺实验时是否要设置阴、弱阳性对照(IQC)?答案是肯定的。
阴性对照:抗筛阴性的AB型血浆+商品化O细胞或抗筛O细胞。
弱阳性对照:IgG抗-D(效价约为2)试剂+商品化的O细胞或抗筛O细胞(D阳性);对于凝集强度低于弱阳性对照的可判读为阴性,高于弱阳性对照的可判读为阳性。阴性及弱阳性对照需与待检标本进行平行实验。
2.增强聚凝胺法。
实验步骤:
①加入血清、细胞、LIM;
②37℃孵育一分钟;
③加入聚凝胺,离心;
④弃上清,悬浮细胞扣;
⑤37℃孵育一分钟,室温孵育4分钟;
⑥加入重悬液;
⑦摇动试管看结果。
通过与小编所在实验室改良聚凝胺法步骤相比,不同之处在于步骤②及⑤,增加了孵育时间,小伙伴们所在实验室的不同之处又在哪里呢?当怀疑存在弱抗体时,不要忘了增强聚凝胺法也是一种选择哦。
3.肝素对聚凝胺实验的影响。
熟悉聚凝胺实验原理的小伙伴们都知道,聚凝胺(Polybrene)试剂带正电荷,若患者用药,且药物分子带负电荷(比如肝素),那么该药物很有可能会中和聚凝胺试剂,导致离心后红细胞不凝集。
那么,遇到这种情况该怎么办呢?有小伙伴说增加聚凝胺用量,增加多少呢?小编也遇到过类似情况(试剂在控),在给感染科及新生儿科的两位患者进行聚凝胺配血时,加入常规剂量聚凝胺试剂并离心后并未出现凝集(查阅病史,患者用肝素类药物所致),遂继续增加聚凝胺试剂并离心,直致出现凝集,但小编发现此凝集并非正常呈现出的细胞扣,而是管底呈现出片状或糊状。这是神魔情况??对于出现此类似情况,小编有所怀疑并查阅相关资料(可能是反应体系中蛋白被稀释所致),解决办法为加入白蛋白或抗筛阴性AB型血浆进行纠正,或选择更换配血方法。
4.聚凝胺方法的局限性
①无法检测Kell血型系统的抗体,反应微弱或无反应。
②对冷抗体检出率高,容易产生假阳性;当怀疑存在冷抗体时,可放37℃进行聚凝胺实验。
③对Rh血型系统抗体比较敏感。
④基本不受CD38单抗药物影响。
⑤实验手法很重要,“用力过猛”容易导致假阴性(摇动试管看结果时,需试管平行,缓慢摇动)。
本次分享内容希望对小伙伴们有所裨益,不足之处,请不吝赐教。
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