疑难血型：亚型？抗体干扰？看包大人如何断案！

输血相容性检测中疑难血型的鉴定犹如包公断案，需要对详细可靠的证据和数据进行精准的推理和分析，最终求得事件的真相。

下面这个疑难血型案例，就让我们跟着“包大人”，一起来断一断！

Part 1 报案 案件信息：

2023年5月25日，某输血实验室在常规血型鉴定中发现一例ABO正反定型不符的事件。

分析：正定型：AB型，反定型：B型，正反不一致。

疑问：红细胞问题？血浆问题？或其他？这引起了工作人员的警觉，立即上报给了包大人，包大人随即对此展开了调查。

Part 2  查案

包大人唤来四大护法：王朝、马汉、张龙、赵虎，每个人分配了任务。

1.王朝：排除试剂、人为操作问题对试验结果的干扰。

2.马汉：查病史、输血史，排除病理及生理因素影响ABO血型。

3.张龙：盐水试管法复查ABO血型。按照正常程序，如果ABO血型全自动微柱凝集卡血型检测结果有疑问，需用试管法复检，试管法复检项目包括：

4.赵虎：抗体筛查试验，包括盐水试管法和IAT（间接抗人球蛋白法）或聚凝胺法。

接到指令，四人立即执行，不久便有了结果：

1.王朝排除试剂、人为操作问题对试验结果的干扰。

2.马汉所查病史为：

患者女性，69岁，乏力一月收治入院，临床诊断：全血细胞减少、肝功能不全、HP感染。

既往史：孕1产0，无输血、移植史。

RBC:1.88×1012/L,  HGB:77g/L,  

 PLT:49×109/L,  WBC:1.79×109/L

ALB: 45.1.0g/L, GLO:24.9g/L,  A/G:1.81

3.张龙的实验结果：

红细胞三洗后ABO盐水试管法结果为（单克隆抗体）

分析：大家看了看张龙的试验结果，结合患者病史，考虑正定型抗A和抗B均凝集为4+，且柱凝集卡Ctrl孔阴性，排除非特异性凝集和自身抗体干扰可能，Tn多凝集细胞不与试剂抗体反应（强生柱凝集卡），试管法复检与柱凝集法一致，正定型结果可信；反定型只有A细胞有凝集，而B细胞、O细胞和自身均为阴性，可以排除自身抗体、冷反应性同种抗体以及非特异性凝集的干扰，所以三人觉得试验结果很像ABO亚型A2B的血清学格局，反定型多出了抗-A1，与试剂A细胞发生了凝集反应。疑问：然而包大人对他们的这个答案还有一点疑虑，会不会还有其他原因造成Ac凝集呢？接下来赵虎带来的证据则更加坚定了他的怀疑。

4.1.抗体筛查及结果：

分析：抗体筛查结果表明：患者血浆中存在IgM和IgG形式的ABO以外的不规则抗体且具有特异性。疑问：既然血浆中存在IgM形式的不规则抗体，那么使反定型A细胞凝集的，会不会就是这个抗体呢？为什么O细胞和B细胞不凝集呢？包大人令赵虎继续收集证据

4.2. 不规则抗体鉴定及结果：

4.3. 用4组E抗原阴性和1组E抗原阳性的A型RhD阳性献血者红细胞与患者血浆反应

结果：血浆中检出IgM和IgG型抗-E 

4.4.患者、反定型试剂Rh分型检测及结果

结果：患者Rh分型CCee,反定型试剂Bc和Oc均不表达E抗原，仅Ac表达E抗原。

4.5.复查血型（反定型A细胞为E抗原阴性的A RhD+献血者红细胞）

结果：ABO正反一致，为AB型。

Part 3 结案

收集所有的证据，包大人最终拍案判定：抗-E是此次ABO正反定型不符的“真凶”！

患者血浆中检出IgM和IgG型抗-E，抗-E抗体与反定型试剂A细胞的E抗原发生凝集反应，干扰了ABO反定型试验正常结果。患者真实血型为AB RhD+，CCee。         

Part 4 总结与讨论

ABO正反定型不符的疑难血型是临床输血相容性检测工作中不时会碰到的事件，对疑难血型的正确鉴别与判定直接关系到临床输血的安全性。ABO正反定型相符是指在仪器试剂质控在控及按照标准方法判读的血型鉴定结果，需同时满足正定型≥3+、反定型≥2+的凝集强度、正反定型格局相符的血型，否则都可能是正反定型不符的疑难血型，包括正定型是O型，反定型也是O型，但反定型A细胞和B细胞的凝集强度差别≥2+。

引起ABO正反定型不符的原因主要有人为试剂因素、病理和生理因素，包括疾病干扰、生理性血型抗原抗体减弱及亚型。解决血清学ABO正反定型不符的第一步是排除试剂、人为操作问题对试验结果的干扰；第二步查患者病史、近期输血史、用药史等，了解可能造成ABO正反定型不符的病理和生理因素；第三步进行试管法ABO血型复检，必要时抗体筛查及鉴定、基因检测等相关试验，最终结合病史判断是否是ABO亚型或是病理生理因素造成ABO正反定型不符。

由意外血清反应导致的ABO正反定型不符常见原因包括自身抗体、冷反应性同种抗体、缗钱状凝集、产生抗-A1的弱A亚型。本案例中IgM型的抗-E是导致ABO正反不一致的原因。Rh抗体中的抗-E为常见同种抗体，具有IgM和IgG两种性质。抗-E抗体可免疫产生，也存在自然产生的抗体。D阳性人产生抗-E比抗-C更普遍。在试管法反定型试验中，添加了O型红细胞试剂（以下简称O细胞）和自身对照。如果自身对照和O细胞均凝集，表明可能存在冷凝集素或缗钱状凝集。

如果单是O细胞凝集，而自身对照阴性，则表明被检者血清或血浆中可能存在ABO系统以外的抗体干扰定型。但O细胞和自身对照阴性并不表示被检者血清或血浆中一定不存在ABO系统以外的抗体，即使是多人份的O型红细胞组成的O型红细胞试剂也不可能表达所有红细胞抗原，所以就有可能出现O细胞阴性而血清或血浆中存在未被检出的ABO系统以外的抗体。抗体筛选和抗体鉴定红细胞表达的红细胞抗原相对较多，可作为补充试验检测ABO系统以外的抗体。若反定型红细胞试剂开瓶时间较长，出现细菌污染或溶血，试剂变质失效，也可能造成假阴性或假阳性。         

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