2023ASCO—TCR相关细胞治疗，为你提供idea

AFNT-211：一种针对KRAS-G12V表达实体瘤的具有干细胞样特性的FAS-41BB增强的TCR-T细胞疗法

【Affini-T Therapeutics】

背景：KRAS是实体瘤中最常见的致癌基因突变，促进了许多无法治愈的癌症的发生和发展，包括结直肠癌、胰腺癌和肺癌。虽然针对KRAS-G12C突变的小分子抑制剂已经获得批准，但对于高度流行的KRAS-G12V突变患者还没有针对性的治疗方法。TCR-T细胞疗法在临床试验中显示出显著的疗效，但其持久性受到免疫抑制的肿瘤微环境(TME)的限制。AFNT-211是一种自体T细胞疗法，旨在表达HLA-A*11:01 KRAS-G12V特异性TCR，并通过CD8α/β辅助受体和FAS-41BB开关受体进一步增强，以推动T细胞的持久性和持久的临床反应。CD8α/β共受体使协调的CD4+/CD8+T细胞反应，而FAS-41BB通过41BB激活将FAS配体(FASL)TME死亡信号转化为共刺激信号。

方法：体外评价AFNT-211对一组表达KRAS-G12V的肿瘤细胞株的抑制作用，并用人异种移植小鼠模型评价AFNT-211的体内药效。进行了体外安全性研究，以评估潜在的交叉反应、同种异体反应和细胞因子非依赖性生长。临床制造过程由慢病毒转导的自体CD4+/CD8+T细胞组成，并使用培养条件进行扩增，在保持干细胞特性的同时推动强劲的扩增。

结果：AFNT-211与一组表达KRAS-G12V的肿瘤细胞株共培养，可显著促进效应细胞因子的分泌、T细胞的增殖和肿瘤细胞的杀伤。CD8α/β共受体使CD4+T细胞能够识别KRAS-G12V，并具有更大的整体细胞毒性。FAS-41BB开关受体显著增强了针对表达FASL的肿瘤细胞的抗肿瘤反应的幅度和持久性。XScan突变和潜在的非靶标多肽测试显示没有显著的交叉反应。没有观察到对呈现人群中最常见的HLA类型的淋巴母细胞系的同种异体反应。在小鼠异种移植模型中观察到了有效的抗肿瘤反应。Affini-T用于生产AFNT-211的Thrive制造平台持续提供＞30-40e^9 TCR工程T细胞和高频率naïve T细胞，以及表达可忽略的衰竭标志的中央记忆T细胞。

结论：AFNT-211的制造过程产生了大量的TCR-T细胞，具有理想的干细胞样特性，优化了临床剂量。临床前数据表明，AFNT-211是一种有效和安全的药物，支持具有KRAS-G12V突变的晚期/转移性实体肿瘤患者的临床发展。

以实体瘤表达的共有KRAS和TP53突变为靶点的睡美人TCR-T细胞的安全性和有效性，人首个1期研究

【MD安德森癌症中心+Alaunos Therapeutics】——NCT05194735

背景：实体瘤表面存在KRAS、TP53和EGFR基因的驱动突变，与T细胞表达的TCR的HLA分子相关。利用睡美人转座子/转座酶系统对患者T细胞进行非病毒基因工程可以产生驱动突变反应的TCR-T细胞。

方法：这是一项人类首例1/2期自体睡美人TCR-T细胞治疗研究，用于NSCLC、结直肠癌、子宫内膜癌、胰腺癌、卵巢癌和胆管癌患者，这些患者的肿瘤至少包含KRAS、TP53和EGFR中的一个靶标驱动基因突变。

结果：截至2023年2月14日，已有3名患者接受了睡美人TCR-T细胞治疗。第一例为34岁女性，IV期NSCLC化疗和免疫治疗无效，接受靶向KRAS-G12D和HLA-A*11:01的DL1(0.9×10^10 TCR-T细胞)；第二例54岁女性，IVA期结直肠癌接受靶向p53-R175H和HLA-A*02:01的DL2(6.4×10^10 TCR-T细胞)；第三例为60岁男性，胰腺癌IV期化疗无效，接受靶向KRAS-G12V和HLA-A*11:01的DL2(5.8×10^10 TCR-T细胞)。总体而言，观察到可控的安全概况，没有意外的不良事件、DLTS或ICANS。患者1、2和3的CRS分级分别为2、3和1级，患者2为自限或经标准治疗和抗IL 6抗体缓解。患者1的总有效率为部分缓解，6个月无进展生存，患者2为稳定，患者3为进展期。所有患者在最后一次随访时均观察到TCR-T细胞的持续存在，患者1的患者持续到6个月。根据持续可控的安全概况，加速到DL3（7-15×10^10 TCR-T细胞）的可能性正在考虑中。

结论：这是人类第一次使用睡美人TCR-T细胞。观察TCR-T细胞的有效性、安全性和持久性。因此，这种治疗方法对实体瘤患者来说是有希望的，因为他们在驱动基因中表达了共同的突变。该试验正在积极招募新患者，并以两个最高剂量水平之一进行治疗。

转移性肾透明细胞癌患者(PTS)内源性逆转录病毒E(HERV-E)TCR转导T细胞的I期结果

【NIH + T-cure】——NCT03354390

背景：CT-RCC HERV-E在大多数肾细胞癌中表达，而在正常组织中不表达。转导表达HERV-E TCR的T细胞对人肾细胞癌具有细胞毒作用，并在小鼠模型中介导人肾细胞癌的肿瘤消退。开发了一种用于临床的HERV-E TCR转导T细胞(HERV-E TCR)的制备方法。

方法：进行了I期剂量递增试验(DL1：1×10^6、DL2：5×10^6、DL3：1×10^7和DL4：5×10^7细胞/kg)，以评估过继输注HERV-E TCR在mccRCC患者中的安全性。HERV-E TCR含有经工程设计的T细胞，可表达HLA-A*11限制性HERV-E TCR和用于体内监测的截短CD34 cassette。符合条件的HLA-A*11例患者接受了mccRCC、ECOG 0-1和既往的抗血管生成和检查点抑制剂治疗。先给予环磷酰胺和氟达拉滨，然后静脉滴注HERV-E TCR和IL-2。

结果：共治疗14例HLA-A*11+患者，中位年龄56岁，其中DLS1~3各3例，DL4是5例。86%的患者既往有3条治疗路线：36%的患者接受大剂量IL2治疗，57%的患者接受Ipiimumab-Nivolumab治疗，50%的患者接受抗VEGFR治疗的3条路线。骨、肝和脑转移分别占71%、43%和14%。所有HERV-E TCR产品均符合释放和输注的无菌、纯度和效力标准(表)。没有发生HERV-E TCR剂量限制性毒性或与治疗相关的死亡。PTS平均接受12剂IL-2(IQR 11-14)。57%的患者出现G3-4发热中性粒细胞减少症，7%的患者出现G3-4毛细血管漏综合征。1例出现G2期皮疹，可能与HERV-E TCR有关。最好的反应包括7%的患者部分缓解，29%的患者病情稳定，8周内有效。mPFS：62天(IQR 31,90)。DL4，第4、7、14和21天，TCR转基因在PBMC中的平均表达分别为6.3%(r=0.02~25)、12.3%(r=0.01~61.2)、3.45%(r=0.00~13.7)和2.89%(r=0.00~11.5)。恶性胸腔积液1例，HERV-E TCR阳性。

结论：这是第一次在慢性肾细胞癌中评估针对人类内源性逆转录病毒的TCR工程T细胞。所采用的制造方法生产了大量高纯度的CD8+HERV-E反应性T细胞，当剂量高达5x10^7个/kg时，这些T细胞没有任何剂量限制毒性。对于DL4中的PTS，观察到HERV-E TCR在体内增殖，转移到转移部位，并在1例mccRCC中诱导肿瘤消退。

TCR mimic CAR-T细胞靶向PRAME治疗AML的临床前评价

【Fred Hutchinson Cancer Center + Project StElla】

背景：CAR-T细胞治疗给肿瘤治疗带来了革命性的变化，但在治疗AML方面的成功有限，部分原因是AML和正常造血细胞表达的细胞表面抗原存在重叠。为了确定AML限制性靶点，测了3000多名AML患者转录组，发现PRAME是一种高度表达的AML限制性靶点。通过一种新的靶向细胞内抗原的方法，开发了一种使用TCR mimic抗体(mTCR)的PRAME CAR T细胞，它能够识别肿瘤细胞表面的PRAME肽/HLA-A2复合体。建立了体内患者来源的异种移植(PDX)模型PRAME mTCR CAR T细胞。在这里，展示了PRAME mTCR CAR T细胞对PDX AML模型的体内活性。

方法：利用来自PRAME TCR mimic抗体(Pr20)的VL和VH序列，将scFv构建到41-BB/CD3ζ CAR载体中。PDX模型来源于一名PRAME+/HLA-A2+的AML儿童患者。用荧光素酶转导PDX细胞，进行无创性生物发光IVIS成像，以监测白血病的进展。在注射后1周，以5×10^6个/只小鼠(1:1 CD4:CD8)注射未修饰的T细胞或PRAME mTCR CAR T细胞。采用IVIS成像法和外周血细胞分析仪测定白血病负荷。

结果：用PRAME mTCR CAR T细胞治疗的小鼠在治疗100天后全部存活，而对照组小鼠(未修饰的T细胞)在治疗后50天出现疾病进展(p=0.001)。对照组的平均白血病负荷在第6周为3.5%，第11周为41.75%，而接受CAR T细胞治疗后未发现白血病。此外，对照组在治疗后6周和11周有明显的白血病扩大，IVIS的照度分别增加了7.75和429.6倍。在PRAME mTCR CAR T细胞处理组中未见明显的辐射增加。未修饰组和CAR T细胞处理组在治疗后第7天和第14天外周血中均可检测到人T细胞(CD45+/CD3+)。

结论：证明了靶向PRAME的mTCR CAR T细胞在AML中的治疗潜力。显示了在使用PRAME mTCR CAR T细胞治疗后，对携带PDX的小鼠的白血病根除的强大疗效，从而延长了生存时间。这些结果提供了一种以CAR T细胞靶向PRAME的新方法，并为评估PRAME mTCR CAR T细胞用于治疗AML的临床试验提供了令人信服的数据。

Therapeutic targeting of PRAME with mTCRCAR T cells in acute myeloid leukemia. Blood Adv. 2023 Apr 11;7(7):1178-1189.

T-Plex的产品特征和临床试验设计：实体瘤的多重、增强型TCR工程T细胞疗法

【TScan Therapeutics】

背景：检查点免疫疗法使实体肿瘤的治疗发生了革命性的变化，但由于依赖于内源性抗肿瘤T细胞，少数患者可持续受益。对于缺乏功能性抗肿瘤T细胞的患者，一个解决方案是利用外源性T细胞受体(TCR)改造其的T细胞，以有效地靶向和杀死肿瘤细胞。TCR工程T细胞疗法(TCR-Ts)的初步临床试验只产生了部分、短期的反应，因为它们针对的是单一的肿瘤抗原。实体肿瘤是异质性的，不仅具有高度可变的抗原表达水平，而且最近发现高达40%的实体肿瘤发生了HLA基因缺失，使肿瘤细胞能够逃避T细胞的攻击。

方法：为了克服这种异质性，TScan开发了T-Plex，这是一种多重疗法，由2-3种不同的TCR-T组成，从称为免疫库的TCR-T的富集中选择，以确定肿瘤表达的不同HLA型上的不同肿瘤抗原为靶点。

结果：为了深化临床反应，TCR-T细胞被设计成表达CD8α/β辅助受体，在临床前实验中，这种受体使CD4+辅助T细胞在靶抗原水平降低＞100倍的情况下，成为＞100倍的细胞毒作用和分泌细胞因子。最后，为了在肿瘤微环境中TGF-β的情况下使T细胞持续存在，工程的TCR-T细胞表达主导的负转化生长因子受体，允许在TGF-β存在的情况下使增殖增加约10倍，细胞因子产生增加约2倍。这些额外基因的加入是由转座子制造系统实现的，没有载量限制。第1阶段研究的患者选择使用单独的筛查方案，以在标准临床护理期间的任何时间识别患者，以便他们可以在病情进展时快速加入治疗方案。筛查包括胚系检测，然后是肿瘤中的抗原表达和缺失检测。治疗包括标准淋巴清除，然后间隔28天输注两剂T-Plex。T-Plex最初以两个针对不同的MAGE-A1抗原的TCR-T开始，这些抗原出现在HLA-A*02:01或HLA-C*07:02上。剂量升级始于在剂量1和2中分别测试单个TCR-Ts。然后，将两种TCR-Ts合并，并在剂量3和4中逐步增加。添加到免疫库的额外TCR-T将经过1和2剂量级别的单一治疗，然后才可用于多个剂量3和4。主要终点包括安全性和可行性，次要终点是响应率和反应持续时间，探索性终点衡量T细胞的持久性。

结论：到2023年，免疫库将再增加4个TCR-T，这将使50-80%的常见实体肿瘤患者有资格接受多路TCR-T治疗。

FDA 已批准 TScan Therapeutics 的 TCR-T 细胞治疗项目中的 3 个项目 T-Plex、TSC-204-A0201 和 TSC-204- C0702 用于实体瘤的潜在治疗。

试验START-001：STAR0602的1/2期研究，一种一流的选择性TCR靶向、双功能抗体融合分子，用于检查点抑制剂(CPI)治疗后抗原丰富的肿瘤患者的单一治疗

【Marengo Therapeutics】——NCT05592626

背景：许多患者对基于CPI的疗法没有反应，大多数应答者最终产生抵抗力。因此，开发更有效的治疗CPI耐药性的方法是一个重大的未得到满足的医学需求。STAR0602是一种融合到共刺激分子上的一流的TCR β链靶向双功能抗体，它与人α/β T细胞的Vβ6/Vβ10结合，并通过同时直接激活TCR与IL-2受体结合和顺式激活来促进CD8+和CD4+ Vβ6/Vβ10效应记忆T细胞的选择性激活和扩增。STAR0602及其小鼠替代物的临床前研究显示，在多种CPI耐药的人器官和小鼠同基因肿瘤模型中，STAR0602具有强大的单药抗肿瘤活性，在猴子和小鼠中的耐受性和细胞因子释放有限。持久的抗肿瘤反应，具有抗肿瘤再攻击的长期保护作用，与靶向Vβ T细胞亚群的从头扩增和肿瘤侵袭有关，这些细胞亚群具有新的效应记忆基因特征和TCR谱系多样性的显著增加。这些数据为研究STAR0602在CPI耐药癌症患者中的安全性和有效性提供了强有力的科学依据。

EBV阳性鼻咽癌TCR-T细胞-免疫检查点阻断，人类首例1/2期试验

【TCRCure，重庆新桥医院+广东天科雅】——NCT04139057

背景：鼻咽癌(NPC)是常见的，但治疗方法有限。随着过继免疫治疗对其他癌症有效的出现，携带EB病毒(EBV)特异性转基因TCR(TCR-T)的工程T细胞代表了一种治疗EBV相关鼻咽癌的可行方法。鉴于PD-1/PD-L1诱导的T细胞功能低下，在此报告了一项针对两种或更多标准治疗失败的患者的EBV靶向TCR-T细胞的I期试验的初步结果。

方法：对符合条件的晚期鼻咽癌患者进行EBV血清型和HLA单倍型筛查。EBV+/HLA-A*02+患者进入快速滴定环境，将单次输注剂量从5×10^6增加到1.0×10^7和5.0×10^7/kg TCR-T细胞。在安全性评价后，扩大了5.0X10^7/kg组，用于联合IL-2治疗的进一步研究。在TCR-T细胞转移前给予氟达拉滨/环磷酰胺。患者监测和外周血液分析在第一个月每周进行一次，然后每月进行一次，直到疾病进展或患者停药。主要目标是确定安全性和推荐的第二阶段剂量(RP2D)，而次要目标是研究人员评估的ORR(RECIST v1.1)。

结果：每TCR-T剂量治疗1例，由于未观察到剂量限制性毒性(DLT)，在TCR-T细胞输注时增加了IL-2剂量3 (5.0x10^7/kg)。截至2023年1月，已有6名患者接受治疗。1例(16.7%)CRS分级为1级(n=6)。没有观察到4级治疗相关不良事件(TRAE)，白细胞减少和发热是最常见的不良事件。2名患者(33.3%)被评估为部分缓解(PR)，其中1名患者迄今的有效时间为9个月。3例患者(50%)被评估为稳定型疾病(SD)。对于所有患者，药代动力学分析显示，外周血中TCR-T细胞的水平在输注后3-14天达到峰值，最长持续180天。

结论：携带PD-1阻断剂的EBV靶向TCR-T细胞耐受性良好。这项正在进行的研究的初步结果表明，EBV蛋白可能是安全有效的TCR-T靶点，可以在EBV阳性的晚期鼻咽癌患者中实现更好的疗效。

NY-ESO-1特异性TCR基因转导T细胞治疗晚期滑膜肉瘤患者的I/II期研究结果

【Takara】­——NCT03250325

背景：滑膜肉瘤是一种预后较差的恶性软组织肿瘤。肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-1在50%-80%的滑膜肉瘤患者的肿瘤中表达。本研究目的是评价表达亲和力增强的NY-ESO-1特异性TCR和siRNA沉默内源性TCR的逆转录病毒载体NY-ESO-1 siTCR基因工程自体T细胞制品(TBI-1301)的安全性和有效性。

方法：这是一项开放标签的I/II期研究，旨在评估安全性、复制能力逆转录病毒(RCR)的出现、克隆性出现、体内细胞动力学和临床反应。用抗CD3抗体和逆转录病毒载体NY-ESO-1 siTCR转导受试者外周血中的白细胞制成TBI-1301。TBI-1301在环磷酰胺750 mg/m2治疗后以5×10^9细胞的分批剂量输注给HLA-A*02:01或HLA-A*02:06阳性滑膜肉瘤患者，这些滑膜肉瘤表达NY-ESO1，手术无法切除且对蒽环类药物治疗无效。

结果：8名受试者入选并接受了TBI-1301治疗。根据RECIST v1.1/irRECIST标准，客观有效率为50.0%，其中4例部分缓解，中位生存期为650天。CRS发生率为50.0%(4/8)，其中1级CRS 1例，2级CRS 3例。所有发生CRS的患者均经预先指定的治疗痊愈，其中2例患者接受对症治疗，1例患者接受tocilizumab治疗，1例患者同时接受tocilizumab和皮质类固醇治疗。没有受试者出现免疫效应细胞相关神经毒性综合征(ICANS)。在整个研究期间，在任何受试者中都没有检测到RCR和克隆显性。

结论：TBI-1301选择性靶向NY-ESO-1阳性肿瘤的过继免疫治疗将成为治疗晚期或复发性滑膜肉瘤的一种有希望的治疗方法，且毒性可接受。

SPEARHEAD-1试验：afami-cel [ADP-A2M4]晚期滑膜肉瘤患者总存活率分析

【Adaptimmune】——NCT04044768

背景：Afami-cel是一种自体TCR-T细胞疗法，用于治疗HLA-A*02的MAGE-A4阳性晚期实体瘤患者。治疗晚期/转移性滑膜肉瘤或粘液样/圆形细胞脂肪肉瘤的预治疗患者的有效性和安全性正在进行2期、两个队列、开放标签、SPEARHEAD-1试验。在这里，报告了队列1中晚期滑膜肉瘤患者的中期总生存期(OS)数据。

结果：截至2022年8月29日，队列1中44例滑膜肉瘤患者接受了afami-cel (2.68-9.99x10^9个T细胞)。中位年龄41岁(19-73岁)，女性占50%，白人占89%，HLA-A*02:01占96%，肿瘤MAGE-A4表达H值中位数为257(132~300)。PTS患者接受严格的预治疗，治疗前的中位数为3条。数据截止点的中位随访期为20.8个月。经独立和调查者回顾，中位PFS分别为3.8个月和4.1个月。独立审查的中位OS为15.4个月，52%的PTS在数据截止点被审查。12个月的OS概率为60%，24个月的OS概率为40%。21例患者在长期随访中接受了补充治疗(系统治疗20例，放射治疗6例，其他治疗4例)。在通过独立审查获得RECIST应答的17例患者中，中位OS未达到，12个月OS的概率为90%，24个月OS的概率为60%。

结论：晚期滑膜肉瘤患者采用SPEARHEAD-1 afami-cel治疗，特别是有RECIST反应的患者存活率较高。