【视频介绍】空气、手、内镜、物表、消毒液的采样方法

文字部分均摘自：

医院消毒卫生标准 GB 15982-2012中采样方法

医务人员手卫生检查方法

采样时间

采取手卫生后，在接触病人或从事医疗活动前采样。

采样方法

将浸有无菌0.03 mol／L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30 c㎡），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10 mL采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米(c㎡)计算。若采样时手上有消毒剂残留，采样液应含相应中和剂。

空气采样方法

采样时间

I类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；

Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。

检测方法

I类环境可选择平板暴露法和空气采样器法，参照GB 50333《医院洁净手术部建筑技术规范》要求进行检测。空气采样器法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。检测时将采样器置于室内中央0.8 m～1.5 m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30 min。房间大于10 ㎡者，每增加10㎡增设一个采样点。

Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境采用平板暴露法。室内面积≤30 ㎡，设内、中、外对角线3点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积>30 ㎡，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1m处。将普通营养琼脂平皿(直径90 mm)放置各采样点，采样高度为距地面0.8 m～l.5 m;采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间(Ⅱ类环境暴露15 min，Ⅲ、Ⅳ类环境暴露5 min)后盖上平皿盖及时送检。

物体表面采样方法

采样时机

潜在污染区、污染区消毒后采样。清洁区根据现场情况确定。

采样面积

被采表面<100 cm2，取全部表面；被采表面≥100 cm2，取100 cm2。

采样方法

用5 cm×5 cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03 mol／L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1～4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10 mL采样液的试管中送检。

门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样。

若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。

消毒后内镜采样

取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50 mL含相应中和剂的洗脱液，从活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集（可使用蠕动泵）送检。

将洗脱液充分混匀，取洗脱液1.0 mL接种平皿，将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15 mL～20 mL，36℃±1℃恒温箱培养48 h，计数菌落数(CFU/件)。将剩余洗脱液在无菌条件下采用滤膜(0. 45 μm)过滤浓缩，将滤膜接种于凝固的营养琼脂平板上（注意不要产生气泡），置36℃±1℃温箱培养48 h，计数菌落数。

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使用中消毒液采样方法

用无菌吸管按无菌操作方法吸取1.0 mL被检消毒液，加入9 mL中和剂中混匀。

醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和，

含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂，

洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂中和剂，

醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂，

含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中加入吐温80至3%;

也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。