外泌体转化应用的临床挑战

标题：外泌体转化应用的临床挑战

与其他生物医学研究类似，基于外泌体的应用也因将研究转化到临床而受到严重影响。外泌体研究最困难的方面是重现性、翻译和从体外到体内的召唤，同时保持一致性。

由细胞产生并从其上清液中收集的外泌体用于大多数早期外泌体研究。必须优化与外泌体生产相关的多种条件，以实现验证和可重复性。从肿瘤细胞释放的外泌体负责免疫抑制功能。癌细胞产生的外泌体含有肿瘤相关抗原并排放到体液中表明肿瘤的存在。利用这一特性，分析外泌体的胰腺癌细胞蛋白质组，并发现胰腺癌细胞和由它们衍生的外泌体中GPC1蛋白多糖富集（glypican 1）。患者血清中GPC1+外泌体（crExos）的存在可以使用荧光激活细胞分选（FACS）技术进行测量。研究表明，使用GPC1 +外泌体可以促进胰腺癌的早期诊断，并在疾病进展的不同阶段区分患者。调节淋巴细胞活性的能力取决于HNC患者的疾病活动度，根据对头颈癌（HNC）患者血浆中发现的外泌体的调查。然而，对常规用于定量人血清中外泌体的方案的可重复性、效率和可靠性知之甚少。如果可以引入和应用广义和ptimized协议，则可能会克服可重复性问题。

外泌体分离和表征技术正在不断发展和适应。不同的科学小组建立了分离和保存外泌体的方案。然而，在非人灵长类动物的临床前阶段，外泌体的大规模生产具有挑战性。因此，外泌体在cGMP指南下仍处于早期阶段。然而，各种研究报告了外泌体生物发生的途径，以操纵一些基因以增加外泌体的产生。 通常，采用两种主要策略来增加外泌体的产生。首先，通过基因操纵以过表达在外泌体生物发生中起作用的激活基因并下调参与外泌体循环途径的基因的卵子发生途径。其次，调整细胞培养基，用特定疗法处理，并限制某些可能迫使细胞产生更多外泌体的生理条件。必须考虑在放大和设备更换期间调整细胞表型的可能性。由于外泌体生物发生的动力学才刚刚开始，任何因素的改变都可能改变外泌体的产生、组成、表面标志物或功能。如前所述，除了细胞质量扩增要求外，还必须控制预先确定的生产环境参数，例如细胞的表型、培养pH值、CO2百分比，因此分泌外泌体特征。

近年来，外泌体蛋白质组学无疑取得了重大进展。外泌体分离方法的进步是这一现象的关键因素，但蛋白质组分析改进仪器的进步以及灵敏度的提高使外泌体研究有了显着改善。尽管在过去十年中取得了重大进展，但仍有许多未解决的差距有待解决。例如，仍然没有通用的外泌体标志物可以精确识别这些囊泡并与其他EV区分开来。此外，体外和体内研究跟踪和表征外泌体的标准方法仍然不可用。然而，由于目前用于分离和表征的方法之间存在巨大的技术差异，外泌体研究的主题仍处于起步阶段。必须解决这些技术障碍，以便能够使用外泌体对癌症和传染病进行诊断或预后监测，并建立创新的基于外泌体的个性化疗法。国际细胞外囊泡学会是一个驱动细胞外囊泡、外泌体和微囊泡分析师的全球学会。ISEV拥有2多名个体，其主要目标是在国际上推进细胞外囊泡研究。

随着外泌体翻译的大量努力，了解临床转化取得的进展和持续的挑战至关重要。尽管外泌体分析方法已经有了巨大的发展，但生物发生的确切机制仍然未知。相反，需要改进分离方法和纯化来研究货物内容物、标记物和功能，从而揭示生物发生机制和疾病状况。一旦克服了这些缺点，就可以确定新的生物标志物进行表征，外泌体可用于诊断和药物输送应用。此外，随着对外泌体生物发生和功能的更多研究，将有很大的机会来操纵它们的组成、性质、生物发生机制和细胞相互作用，以进一步推进其临床应用。外泌体作为诊断，检测和治疗应用的潜在用途在很多研究中中得到了证明。综上所述，开发高效、可重现、放大和可靠的分离方法对于该领域的进一步发展迫在眉睫。为了充分利用初级研究的潜力，需要整合临床数据和新兴新技术，为外泌体的临床转化和治疗应用奠定基础。

（ANEXT安龄生物科技研发中心）

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