氢吗啡酮对脑缺血再灌注损伤大鼠Ca MMKβ及Nrf2/HO‑1信号通路表达的影响

2023-03-17 18:08 古麻今醉

本研究通过动物实验，探讨HM对CIRI的保护作用，并研究其对Ca MMKβ及Nrf2/HO‑1信号通路表达的影响，探讨其治疗机制。

师荣荣1 刘伟2 王海龙3　

1定州市人民医院麻醉科，定州 073000；2天津市眼科医院麻醉科，天津 300020；3河北省第七人民医院麻醉科，定州 073000

国际麻醉学与复苏杂志,2023,43(02):122-127.

DOI：10.3760/cma.j.cn321761-20220408-00726

ORIGINAL ARTICLES

【论著】

本研究通过复制大鼠脑缺血再灌注损伤（CIRI），探讨氢吗啡酮（HM）对CIRI的保护作用，以及对钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶β（Ca MMKβ）及核因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶‑1（HO‑1）信号通路表达的影响，研究其作用机制，从而为临床减轻CIRI提供理论依据。

1 资料与方法

选择雄性SD大鼠54只，采用随机数字表法分为3组（每组18只）：假手术组（Sham组）、脑缺血再灌注组（IR组）、脑缺血再灌注+HM组（HM组）。IR组参照改良Longa线栓法建立大鼠CIRI模型，HM组在IR组的基础上尾静脉注射5 mg/kg HM，Sham组不插线栓（其余同IR组）。记录3组大鼠麻醉清醒后神经行为学评分，测定大鼠脑梗死面积，检测脑组织中氧化应激因子活性氧（ROS）含量、丙二醛（MDA）浓度、超氧化物歧化酶（SOD）活性及TNF‑α和IL‑1β浓度，大鼠脑组织制成石蜡切片进行免疫组化染色检测Ca MMKβ表达量，Western blot法检测脑组织中Nrf2和HO‑1蛋白水平。

2 结果

2.1　神经行为学评分、脑梗死面积比较

与Sham组比较，IR组和HM组大鼠神经行为学评分明显升高（P<0.05），HM组大鼠神经行为学评分明显低于IR组（P<0.05）。见表1。

与Sham组比较，IR组和HM组大鼠脑梗死面积百分比明显升高（P<0.05），HM组大鼠脑梗死面积百分比明显低于IR组（P<0.05）。见表1、图1。

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2.2　ROS含量、MDA浓度和SOD活性比较

与Sham组比较，IR组和HM组大鼠脑组织ROS含量明显升高（P<0.05），MDA浓度明显升高（P<0.05），SOD活性明显降低（P<0.05）。HM组ROS含量和MDA浓度明显低于IR组（P<0.05），SOD活性明显高于IR组（P<0.05）。见表2。

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2.3　脑组织TNF‑α和IL‑1β浓度比较

与Sham组比较，IR组和HM组大鼠脑组织TNF‑α浓度明显升高（P<0.05），IL‑1β浓度明显升高（P<0.05）。HM组TNF‑α、IL‑1β浓度明显低于IR组（P<0.05）。见表3。

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2.4　脑组织Ca MMKβ表达量比较

IR组和HM组大鼠脑组织Ca MMKβ表达量明显低于Sham组（P<0.05），且HM组明显高于IR组（P<0.05）。见表4、图2。

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2.5　脑组织Nrf2、HO‑1蛋白水平比较

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与Sham组比较，IR组和HM组大鼠脑组织Nrf2蛋白水平明显降低（P<0.05），HO‑1蛋白水平明显降低（P<0.05）。HM组Nrf2和HO‑1蛋白水平明显高于IR组（P<0.05）。见图3、表5。

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3 讨论

本研究通过动物实验，探讨HM对CIRI的保护作用，并研究其对Ca MMKβ及Nrf2/HO‑1信号通路表达的影响，探讨其治疗机制。IR组的神经行为学评分和脑梗死面积百分比均明显高于Sham组，结果提示成功制备了大鼠CIRI模型。经过HM处理后的HM组大鼠的神经行为学评分和脑梗死面积百分比较IR组明显降低，结果提示HM对CIRI具有保护作用。

本研究结果显示，CIRI后脑组织中ROS含量和MDA浓度显著升高，而SOD活性却显著降低。HM组经HM处理后，ROS含量和MDA浓度明显降低，SOD活性也明显恢复。本研究结果表明，抗氧化应激反应可能是HM对CIRI的保护作用机制之一，HM可能通过抑制CIRI大鼠氧化应激反应，发挥脑组织保护作用。IR组TNF‑α和IL‑1β浓度明显升高，而HM组经HM处理后，TNF‑α和IL‑1β浓度则明显降低。研究结果提示HM能够有效抑制炎症反应，其也可能是HM对CIRI的保护作用机制之一。但是其具体的作用途径及机制还需要进一步的试验验证。

本研究结果显示，IR组Ca MMKβ表达量明显降低，而HM组经HM处理后，Ca MMKβ表达量显著增加，结果提示有效增加钙信号转导可能是HM对CIRI的保护作用机制之一，HM可能通过上调CIRI大鼠Ca MMKβ表达，增强钙信号转导，减少脑损伤，发挥脑组织保护作用。IR组的Nrf2和HO‑1蛋白表达明显降低，而HM组经HM处理后Nrf2和HO‑1蛋白水平显著提升，结果提示HM可有效上调Nrf2和HO‑1蛋白水平，激活Nrf2/HO‑1信号通路，抑制氧化应激及炎症反应，发挥CIRI的保护作用。

综上所述，HM可能通过上调CIRI大鼠Ca MMKβ表达及Nrf2/HO‑1通路，抑制氧化应激及炎症反应，发挥脑组织保护作用。但是本研究仍有不足之处，其具体的作用机制还需要进一步的实验验证。