JMT日本医疗——酒精依赖症药物双硫仑能抑制肾脏病恶化

作为抗GBM抗体型肾炎的原因的巨噬细胞的控制法，着眼于FROUNT

日本东京理科大学于2022年11月21日宣布，新发现了现有的酒精依赖症治疗药双硫仑能够抑制肾脏病的恶化。该研究由同大生命医科学研究所的寺岛裕也讲师、松岛纲治教授、药学部的牧野宏章助教（现武藏野大学药学部）、高桥秀依教授、日本医科大学解析人体病理学的远田悦子助教、清水章教授等研究小组进行。研究成果在线刊登在《Kidney International》上。

巨噬细胞感知生物体的异常，释放炎症性细胞因子和趋化因子，在用于生物体防御的炎症·免疫应答中发挥着中心作用。如果巨噬细胞过度工作，有时会引起组织伤害，导致炎症的慢性化。在抗GBM抗体型肾炎中，由于肾脏对肾小球基底膜（GBM）的抗体，在肾小球中聚集巨噬细胞，活性化释放的细胞因子或趋化因子引起肾小球无法控制的炎症，表现出被称为半月体的特征性形态。产生半月体的肾小球不能发挥本来的功能，如果涉及到整个肾脏的肾小球，就会陷入肾功能的废弃（末期肾功能不全），需要人工透析和肾移植。在治疗中，为了抑制免疫应答，使用类固醇药、免疫抑制药及血浆交换疗法，但治疗效果有限，很多病例都达到了末期肾功能衰竭。另外，伴随治疗的感染症等的副作用也成为问题。

本次研究着眼于研究组2005年发现的控制巨噬细胞游走的分子FROUNT，作为控制抗GBM抗体型肾球肾炎成因的巨噬细胞的方法。巨噬细胞在炎症时从血液中分化出被动员到炎症局部的单细胞。FROUNT通过作用于单细胞、巨噬细胞等白细胞在体内游走时作为标记的趋化因子的受体CCR2和CCR5，来控制单细胞、巨噬细胞的游走活性。研究小组发现，在2020年，现有的酒精依赖症治疗药物双硫仑具有FROUNT抑制活性，并报道了该双硫仑通过调节起到促进癌症作用的巨噬细胞来抑制癌症。

对大鼠模型给予双硫仑，通过FROUNT抑制半月体形成和尿中白蛋白值上升

本次研究探讨了具有FROUNT抑制活性的双硫仑对抗GBM抗体型肾小球肾炎的治疗效果。为了验证双硫仑在抗GBM抗体型肾炎中的效果，使用了对大鼠投用抗GBM抗体诱导肾炎的模型。在该模型中，与人的抗GBM抗体型肾小球肾炎同样，在肾小球体上形成半月体，作为肾小球体伤害的结果，尿中白蛋白值上升。发现以相当于临床用量的剂量给予双硫仑时，能够抑制半月体的形成和尿中白蛋白值的上升。肾炎被诱导后，在丝球体中观察到巨噬细胞、接着观察到淋巴细胞的聚集，但通过给予双硫仑，从早期开始巨噬细胞的浸润被抑制，之后的淋巴细胞浸润也被抑制。此外，研究人员发现FROUNT抑制活性高于双硫仑的衍生物DSF-41以更少的给药量显示出同等的肾炎抑制效果。虽然除FROUNT以外还报道了不同的靶点，但这些结果表明发现的肾炎抑制作用是通过FROUNT的抑制。

抑制巨噬细胞游走假肢的形成

作用于巨噬细胞为什嚒抑制了线球伤害。研究组对双孢拉啡抑制肾炎的机制进行了详细的分析，明确主要有三种机制抑制肾炎。

细胞在移动时会发出被称为“假肢”的突起，但在详细观察被称为肾小球的系蹄的毛细血管内的巨噬细胞（或作为其前体细胞的单球）的形态的结果中，发现在给予了双硫仑的大鼠中，巨噬细胞的假肢变少。研究小组此前也用培养细胞进行了观察，明确了FROUNT参与假肢形成，但此次首次捕捉到，在活体组织中，由于FROUNT的阻碍，巨噬细胞的游走假肢的形成受到抑制。

直接抑制巨噬细胞产生细胞生成趋化因子，并减少息肉消失

其次，在肾小球的基因表达分析中，作为炎症性细胞因子的TNF-α以及引起单细胞·巨噬细胞的趋化因子CCL2、淋巴细胞等的CXCL9的表达降低。在研究了双硫仑对培养巨噬细胞刺激诱导的细胞因子产生的作用的实验中，明确了双硫仑具有直接抑制巨噬细胞产生这些细胞因子的作用。一般认为，双硫仑抑制巨噬细胞产生CCL2可以抑制聚集在肾小球中的巨噬细胞被激活而进一步吸引另一个单球巨噬细胞并放大炎症。

另外，还发现通过给予双硫仑，可以减轻被称为podsite的肾小球的毛细血管衬里而防止蛋白质泄漏的细胞的消失。多细胞的消失是炎症细胞产生的炎症细胞因子TNF-α等的工作导致波德细胞脱落或死亡，被认为是形成半月体的契机。由巨噬细胞引起的TNF-α由于表达降低，可以认为通过抑制炎症性细胞因子的机制抑制了多位点的消失。

抗GBM抗体型肾炎的人病例，病变部位有很多FROUNT阳性的巨噬细胞

在本次研究中，FROUNT抑制抑制了巨噬细胞在丝球体上的聚集，同时抑制了细胞因子的产生，可见FROUNT复合参与了丝球体内巨噬细胞的应答。在研究中，以临床应用为目标，也研究了双硫仑的长期效果，显示了在抗GBM抗体型肾小球肾炎模型中，炎症产生的胶原对肾组织的沉积被抑制。并且在人类抗GBM抗体型肾炎的病例中，明确了病变部位存在着大量FROUNT阳性的巨噬细胞，显示了强烈提示FROUNT抑制药双硫仑对抗GBM抗体型肾炎有效的结果。

所获得的见解有望导致与巨噬细胞相关的炎症、组织伤害成为问题的各种疾病的治疗方法的开发。另外，关于参与趋化因子受体信号调节细胞迁移的FROUNT如何控制巨噬细胞的活性化的分子机制尚不清楚，继续致力于阐明。研究小组说：“根据本研究的成果，可以期待阻碍FROUNT的既存药双孢拉用于治疗导致肾功能衰竭的难治性肾炎。”