循环型iNKT是CAR-NKT更优来源

NKT细胞是一种先天T淋巴细胞，具有跨越先天和适应性免疫反应的多种功能。

恒定NKT（iNKT）是CD1d限制性NKT，来源于CD4+CD8+胸腺细胞，经CD1d-iGb3复合物阳性选择后分化而来，能通过识别脂质抗原参与免疫反应。

其中iNKT1可以产生IFN-γ和TNF，是iNKT中发挥细胞毒性作用的主要亚型，对于抗肿瘤、抗病毒至关重要。

iNKT1两个亚型

在一篇10月发表在Science子刊的文章《A circulating subset of iNKT cells mediates antitumor and antiviral immunity》中，研究人员发现成熟的iNKT包括三个类型，以C1、C2、C3表示，每个类型各具特征：

CD244：是调节NK细胞毒性的重要受体，C2高水平表达与其高细胞毒性相关。

CXCR6：CXCL6受体，C1高表达CXCR6能够响应CXCL6的募集，保持组织驻留特性相关。

Klf2，S1pr1：C2能够通过Klf2→S1pr1调控其迁移能力。

PLZF：iNKT特有转录因子，表达随细胞成熟而降低，C0表达高，C1、C2表达均降低说明C1、C2为独立的两个表型。

C1、C2都具备IFN-γ的分泌能力，均属于iNKT1的亚型。

Sci Immunol. 2022 Oct 28;7(76):eabj8760. 

外周中C1、C2的基因表达谱分析结果也显示二者异质性很强，C1中T细胞激活相关基因表达更高（ICOS、Lef1、CD5），C2尤其维持iNKT稳态转录因子Klf2更高，说明C1更具T细胞特性，而C2更具NK特性。

Sci Immunol. 2022 Oct 28;7(76):eabj8760. 

不仅如此，外周组织中的C1和C2具有不同的细胞动力学特点。小鼠C1表现出组织驻留性，而C2则能够在肺、脾脏等外周组织中循环。

Sci Immunol. 2022 Oct 28;7(76):eabj8760. 

因此文章也直接将C1定义为驻留型iNKT，将C2定义为循环型iNKT。

对IL-15发育依赖性

在iNKT细胞发育的过程中，IL-15是一种必不可少的细胞因子，主要由胸腺髓质上皮细胞（TEC）、血管内皮细胞（BEC）、骨髓细胞产生。

C1与C2的成熟过程分别依赖不同生态位的IL-15：C1依赖于外周骨髓产生的IL-15，而C2更多的依赖于TEC产生的IL-15。

特异性敲除小鼠TEC中的IL-15使C2完全消失，C1下降一半。 Sci Immunol. 2022 Oct 28;7(76):eabj8760. 

特异性敲除小鼠骨髓中IL-15使C1表达降低，但不影响C2 Sci Immunol. 2022 Oct 28;7(76):eabj8760. 

治疗相关

CAR-NKT用于肿瘤治疗具有相当大的优势，其主要效应类型就是iNKT1。

类似小鼠，人类中也同样存在C1、C2两种类型iNKT。C2型iNKT表达迁移相关的趋化因子受体，在激活后同样能够分泌更高水平的IFNγ、颗粒酶B、穿孔素等细胞毒性因子。

Sci Immunol. 2022 Oct 28;7(76):eabj8760. 

循环型iNKT1不但比驻留型具有更强大肿瘤杀伤效果，而且凭借其循环特性，可能使CAR-NKT对转移性肿瘤的治疗效果大大加强。

在对NKT进行工程化改造的时候需要考虑到以下两点：

供体筛选：

供体筛选是进行CAR改造的第一步，小鼠C2型会随着年龄的增长其数量会逐渐下降，人类同样。因此筛选iNKT时需要增加年龄限制。

Sci Immunol. 2022 Oct 28;7(76):eabj8760. 

也可以通过表面标志物进行循环型iNKT1的获取。  

Sci Immunol. 2022 Oct 28;7(76):eabj8760. 图

IL-15的来源控制：

CAR-NKT治疗常加IL-15以增强其抗肿瘤作用，若能控制髓源性和胸腺源IL-15比例也许可以获得更好的治疗效果。  

参考文献

1. Cui G et al. A circulating subset of iNKT cells mediates antitumor and antiviral immunity. Sci Immunol. 2022 Oct 28;7(76):eabj8760. 

2. Baranek T et al. Deconstructing iNKT cell development at single-cell resolution. Trends Immunol. 2022 Jul;43(7):503-512. 

3. https://www.kuurtx.com/the-car-nkt/

4. Waldmann TA et al. The implications of IL-15 trans-presentation on the immune response. Adv Immunol. 2022;156:103-132. 

来源：闲谈 Immunology 2022-12-30