不同剂量灵芝多糖预处理对体外循环大鼠海马神经元凋亡的影响

王丽 孙莹杰刁玉刚 陈晓宇

北部战区总医院麻醉科，沈阳 110016

国际麻醉学与复苏杂志,2022,43(10):1006-1020.

DOI：10.3760/cma.j.cn321761-20220601-00646

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【论著】

本研究旨在评价不同剂量灵芝多糖（GLP）预处理对CPB大鼠海马神经元凋亡的影响。 

1 材料与方法      

清洁级雄性SD大鼠100只，体重350~450 g，采用随机数字表法分为5组（每组20例）：假手术组（S组）、CPB组（C组）、GLP低剂量组（G1组）、GLP中剂量组（G2组）、GLP高剂量组（G3组）。各组大鼠均麻醉状态下用透光法行气管插管机械通气，右颈内静脉、左侧股动脉和右侧股动静脉穿刺置管，C组和G1组、G2组、G3组建立无血预充CPB伴心脏不停搏模型，行CPB 1 h，S组不建立模型只观察1 h。G1组、G2组、G3组分别于术前连续7 d给予12.5、25.0、50.0 μg/g GLP溶液灌胃，S组和C组给予等量生理盐水。于CPB结束即刻、CPB结束后5 h取血清，并于CPB结束后5 h麻醉下处死大鼠取海马组织，用ELISA 法检测血清S100钙结合蛋白β（S100β）和脑损伤标志物神经元特异性烯醇化酶（NSE）浓度，Western blot法检测海马组织B淋巴细胞瘤/白血病‑2（Bcl‑2）和Bcl‑2相关X蛋白（Bax）的表达，计算Bcl‑2/Bax，TUNEL法计算海马组织神经元凋亡指数。

2 结 果      

2.1　大鼠血清 S100β和NSE浓度比较

与S组比较，C组、G1组、G2组、G3组CPB结束即刻、CPB结束后5 h血清S100β、NSE浓度均明显升高（P<0.05）。与C组比较，G1组、G2组、G3组CPB结束即刻、CPB结束后5 h血清S100β、NSE浓度均明显降低（P<0.05）。与G1组比较，G2组、G3组CPB结束即刻、CPB结束后5 h血清S100β、NSE浓度均明显降低（P<0.05）。与G2组比较，G3组血清CPB结束即刻、CPB结束后5 h S100β、NSE浓度均明显降低（P<0.05）。见表1。

2.2　大鼠海马神经元凋亡指数和Bcl‑2、Bax表达及Bcl‑2/Bax的比较

与S组比较，C组、G1组、G2组、G3组Bcl‑2表达下调，Bax表达上调，Bcl‑2/Bax降低，海马神经元凋亡指数升高，差异有统计学意义（P<0.05）。与C组比较，G1组、G2组和G3组Bcl‑2表达上调，Bax表达下调，Bcl‑2/Bax升高（P<0.05），海马神经元凋亡指数降低（P<0.05）。与G1组比较，G2组和G3组Bcl‑2表达上调，Bax表达下调，Bcl‑2/Bax升高（P<0.05），海马神经元凋亡指数降低（P<0.05）。与G2组比较，G3组Bcl‑2表达上调，Bax表达下调，Bcl‑2/Bax升高（P<0.05），海马神经元凋亡指数降低（P<0.05）。见表2。

3 讨 论      

本研究采用股动脉灌注，右颈内静脉采用改良的4孔16 G导管置入右心房进行静脉引流建立CPB，转流时间1 h，监测血流动力学和血气变化。80只大鼠顺利建立CPB，3只死于大出血。CPB期间MAP维持在60~80 mmHg，平均灌注流量100~150 ml·kg−1·min−1，动脉血气正常。CPB停止后心肺功能顺利恢复。

本研究选择CPB后5 h观察各项指标，结果表明在CPB之前预防性应用GLP确实可以在一定程度上减少S100β和NSE的浓度。本研究结果显示，CPB后血清S100β和NSE浓度升高，Bcl‑2/Bax降低，海马神经元凋亡指数升高，表明机体Bcl‑2和Bax的失衡。

综上所述，GLP预处理可呈剂量依赖性地减轻CPB大鼠海马神经元的损伤，此机制可能与GLP调节Bcl‑2/Bax失衡抑制细胞凋亡有关。

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