【肾世图卷】Journal Club - 22期

NO.1狼疮和基因突变狼疮新机制：TLR7遗传变异

间接证据支持增强的Toll样受体7(Toll-like receptor 7，TLR7)信号是人类系统性自身免疫性疾病的机制，但缺乏导致狼疮的TLR7基因变异的证据

对表型严重的个体病例详细研究可为潜在的机制提供独特的见解。Brown等学者首先在一名患有严重系统性红斑狼疮的年轻患者全基因组测序开始，发现TLR7y264H，该突变既往从未报道过

再对其他狼疮患者进行全外显子组测序，鉴定出了TLR7的其它遗传变异

基于TLR7序列的图谱技术，作者认为TLR7y264H变异可能会增强鸟苷或单链RNA的结合

作者通过CRISPR-Cas9技术，将TLR7Y264H变异编辑至C57/B6小鼠，该小鼠(kik/kik)出现了以自身抗体产生和脾肿大为特征的狼疮样综合征

在肾脏中，kik/kik小鼠发展为典型的系膜增殖性肾小球肾炎，伴电子致密物沉积

外周血中，滤泡外辅助T细胞(extrafollicular helper T cells，TFH)增加，浆细胞样树突状细胞激活，缺乏B细胞生发中心，以上表型都表明TLR7y264H诱导的TLR7功能获得性突变推动的病变

骨髓嵌合实验以确定自身抗体是否引发细胞内在或外在表型效应。在突变的小鼠中观察到的T细胞表型都是细胞外源性的，而B细胞表型证明是细胞内源性的，表明B细胞在这种变异诱导的SLE发病机制中是必不可少的

突变可能通过异常信号传导破坏B细胞耐受性，从而导致B细胞异常存活

MyD88为TLR7下游衔接蛋白，通过TLR7y264H小鼠与MyD88敲除小鼠杂交，表明MyD88缺乏可改善自身免疫、异常的B细胞存活以及所有细胞和血清表型。说明TLR7信号对MyD88的依赖性

以上研究结果揭示了SLE的发病机制，TLR7通路，为SLE新的治疗方法提供了免疫学基础

NO.2免疫调节和高血压免疫调节防止高血压诱导的心血管重塑

高血压是心血管疾病的重要风险因素，从而对心血管结构和功能产生有害影响

高血压的发病机制涉及多种机制，包括遗传易感性、RAAS的激活、交感神经系统的过度活跃、其他几种血管活性物质的产生紊乱、肥胖和饮食因素，如钠过多和钾摄入不足

最近，内皮细胞激活和功能障碍引起了研究者的关注。激活的内皮细胞释放炎症介质，如细胞因子、趋化因子和活性氧，这些介质会损害心血管组织并有利于高血压的发生

因此开发特异性免疫调节疗法已成为治疗和预防与高血压相关的心血管疾病的热点治疗手段

Failer等学者研究了Developmental endothelial locus-1(DEL-1)，一种内源性抗炎因子，在血管紧张素II(ANGII)和醋酸脱氧皮质酮盐(DOCA-salt)诱导的心血管器官损伤和高血压中的治疗疗效和作用机制

动物模型：内皮特异性过度表达DEL-1(EC-Del1)的转基因小鼠和注射重组DEL-1的小鼠

内皮DEL-1过度表达减少了ANGII诱导的主动脉和心脏结构和代谢重塑的影响，改善了左心室功能，增加了心肌冠状动脉灌注，防止高血压、内皮功能障碍和心血管组织的炎症变化

在ANGII模型中建立的高血压之前注射重组DEL-1可以防止心血管器官损伤，而在DOCA盐诱导的高血压后注射重组DEL-1可缓解心血管器官损伤

机制：在小鼠和人类分离的主动脉中，DEL-1通过抑制αvβ3整合蛋白依赖的原-基质金属蛋白酶2的激活(图示DEL1过度表达小鼠在ANGII诱导的损伤模型中，心血管组织中表现低MMP2活性)，以及稳定αvβ3整合素依赖的CD25+FoxP3+调节T细胞和血清IL-10水平来发挥作用，这与炎症细胞招募减少和心血管器官促炎细胞因子的产生减少相关

DEL-1在对抗心血管重塑和高血压进展中的作用和免疫调节机制将这种内源性抗炎因子确定为一种潜在的新治疗方法

NO.3干细胞与纤毛病 基于多能干细胞的纤毛病表型建模

纤毛(Cilia)是类似天线的细胞器，在各种细胞过程中起着重要作用。纤毛的结构或功能异常通常与人类疾病状态相关

kinesin-2运动蛋白，如kiesin家族成员3A(KIF3A)和3B(KIF3B)在沿轴突微管的分子货物运输中起着关键作用

Cruz等学者利用CRISPR技术编辑人类多能干细胞(hPSC)敲除kinesin-2。将无意义突变引入KIF3A或KIF3B基因，导致KIF3A或KIF3B蛋白质的去除以及纤毛的完全消失

KIF3A-/-和KIF3B-/- hPSC仍然保持强大的自我更新和多能性。与对照hPSCs相比，kinesin-2敲除hPSCs在体外胚状体形成和中内胚层分化方面具有相似的能力

对于直接分化为肾脏类器官方面，KIF3A-/-和KIF3B-/- hPSC具有特异性表型

① 肾发生和神经发生均显著受损👇，可能是由于hedgehog信号传导的异常激活所致

② 约50%的kinesin-2敲除肾类器官自发发育出与PKD1-/-类似的肾囊肿

总之，这项研究表明，通过KIF3A或KIF3B敲除的纤毛消失导致有缺陷的肾发生和神经发生、肾脏类器官囊肿形成，建立了一个细胞模型来研究各种人类发展和病理生理过程中的纤毛功能 

NO.4IgAN与糖皮质激素 口服甲基强的松龙对IgA肾病临床结局的影响

IgA肾病是全球最常见的原发性肾小球疾病，其特征是含有IgA的免疫复合物肾小球沉积。大约30%的患者会发展为肾功能衰竭

目前没有针对IgAN的病因治疗方法。已经提出了口服强的松、RAASi和其他细胞毒性药物，如硫唑嘌呤和环磷酰胺等治疗方案，特别是对于有疾病快速进展风险的患者

然而之前的证据仅限于观察数据和较小的随机对照试验，具有高偏差风险和不确定的益处

IgA 肾病全球类固醇治疗评估(The Therapeutic Evaluation of Steroids in IgA Nephropathy Global, testing)是一项多中心、国际、双盲、随机的临床试验

该研究于2012年首次启动，随机分配了262名参与者，但由于安全问题于2015年停止。所有参与者都被揭盲，并进行了单独的过渡分析并发表。对方案进行了修订，另外招募了240 名参与者，以接受匹配的安慰剂或减少剂量的0.4mg/kg甲强的松龙(最大剂量：32mg/d)

观察的主要结果是eGFR下降40%、需要透析或肾移植的肾衰竭或因肾脏疾病死亡的综合结果共有503名患者接受了随机分组，257人被随机分配到甲基强的松龙组，246人被随机分配到安慰剂组，疗程总共6到9个月。所有参与者都包括在主要分析中在4.2年的平均随访时间内，使用COX model分析，甲基强的松龙组的主要综合结果发生率显著降低。使用 flexible parametric model分析，也得出一致的结果。这些发现在所有亚组中都是一致的，然而与安慰组相比，甲基强的松龙组的严重不良事件(包括住院和严重感染)更高。

在IgA肾病中，使用口服甲基强的松龙治疗可以降低高危IgA肾病患者eGFR下降和肾衰竭进展的风险，然而口服甲基强的松龙与严重不良事件(主要是感染)的风险增加有关。

Ref

1 Nature 605, 349–356 (2022). https://doi.org/10.1038/s41586-022-04642-z

2 J Clin Invest. 2022 Mar 15;132(6):e126155. doi: 10.1172/JCI126155

3 Nat Biomed Eng. 2022 Apr;6(4):463-475. doi: 10.1038/s41551-022-00880-8

4 JAMA. 2022 May 17;327(19):1888-1898

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