“组合拳”式打击肿瘤！溶瘤病毒联合PD-1治疗PD-1失败晚期癌症患者

程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）是一种众所周知的免疫检查点，可调节T细胞功能。虽然靶向PD-1在临床实践中治疗各种肿瘤方面表现出显著的效果，但其在大多数晚期肿瘤患者中的反应仍然不令人满意。

有证据表明， PD-1阻断治疗的效率与基因微卫星状态、肿瘤微环境（TME）和干扰素γ（IFN-γ）信号传导有关 。以晚期转移性结直肠癌（mCRC）为例，PD-1抗体单药治疗对一些微卫星不稳定性（MSI-H）水平较高的患者有效，而大多数微卫星稳定（MSS）状态的患者不能从这种单药治疗中受益。然而，约90%的mCRC患者具有MSS基因型，表明他们对抗PD-1治疗反应不佳。因此，确定适当的方法来增强PD-1阻断治疗的疗效至关重要。

不少研究者 将溶瘤病毒联合PD-1抗体用于实体瘤治疗，以期增强抗肿瘤疗效。在今年欧洲肿瘤内科学会（ESMO）年会上，Replimune 公司报告了其 溶瘤病毒疗法RP2作为单药或与PD-1抑制剂nivolumab（纳武单抗）联用，在治疗PD-1治疗失败的晚期实体瘤中的1期临床试验结果。 RP2是一款基于单纯疱疹病毒（HSV-1）的溶瘤病毒疗法。 

结果显示： 单独接受RP2溶瘤病毒治疗的9名晚期患者中有3名从治疗中受益，并且观察到肿瘤缩小。其中1名唾液腺癌患者在开始治疗15个月后肿瘤完全消失并且未再复发。另外两名患者分别患有食管癌和葡萄膜黑色素瘤，分别在18个月和15个月时仍有反应，并且癌症没有发生进展。单独接受RP2溶瘤病毒治疗 而在接受RP2溶瘤病毒+PD-1抑制剂nivolumab联合治疗的30名晚期肿瘤患者中有7名患者从治疗中受益。 这7名患者中：黑色素瘤皮肤癌（4人）、葡萄膜黑色素瘤眼癌（2人）、头颈癌患者（1人），其中有6人在治疗后14个月没有发生进展。 接受RP2 溶瘤病毒+PD-1 抑制剂 nivolumab联合治疗 RP2 溶瘤病毒联合PD-1治疗可以对肿瘤产生“组合拳”式打击 ——直接从内部摧毁癌细胞，同时还可以调用免疫系统来对抗癌细胞。 而今天分享的这篇研究，研究者则是成功构建了 一种新的CXCL10的重组溶瘤腺病毒 ，将其命名为Adv-CXCL10， 重组腺病毒显示出强大的激发TME和增强PD-1抗体的抗肿瘤效率的能力。  Adv-CXCL10杀死肿瘤细胞的同时，还能在体外招募淋巴细胞 为了评估重组腺病毒的溶瘤能力，研究者用更高MOI的腺病毒感染MC38-CAR细胞。重组腺病毒Adv-CXCL10具有与对照腺病毒相似的杀死结肠癌细胞的能力，并能产生具有功能的小鼠CXCL10。 

重组腺病毒 Adv-CXCL10促进T细胞浸润 当使用重组腺病毒单一疗法时，肿瘤生长较慢，没有发现显著差异。不过，溶瘤腺病毒增加了肿瘤凋亡并抑制了肿瘤增殖。 研究者还探索了TME中的免疫浸润状态：腺病毒治疗组表现出更好的免疫杀伤TME, CD4+T细胞和CD8+ T细胞增多。特别是在Adv-CXCL10组，CD4+T和CD8+T细胞中CXCR3+细胞的数量都增加了，这导致了CXCL10在TME中的浓度梯度高于其他区域。 为了进一步证实被腺病毒吸引到TME的T细胞具有抗肿瘤特性，我们在体外将其与MC38或CT26结肠细胞共培养，发现这些CD8+ TILs具有肿瘤特异性识别能力，因为它们在受MC38刺激时产生更多的IFN-γ，而受CT26刺激时不会。这些现象在Adv-CXCL10处理组更为明显。 Adv-CXCL10显著提高了抗PD-1治疗的效率 研究者发现，当溶瘤腺病毒处理MC38-CAR细胞时，PD-L1表达增加，而且在体内溶瘤腺病毒治疗过程中也观察到同样的趋势。这表明溶瘤腺病毒的治疗使TME转向“更热”的位置。 在小鼠实验中，Adv-Ctrl-或Adv-CXCL10治疗小鼠的肿瘤体积小于对照组小鼠。令人惊讶的是，Adv-CXCL10显著增强了PD-1抗体的治疗效果，相应组肿瘤体积甚至在数日内保持在较低平台。研究者进一步观察不同组的存活率，发现Adv-CXCL10+抗PD-1组小鼠的寿命比其他组更长。 H&E和TUNEL检测显示，联合使用Adv-CXCL10和抗PD-1治疗对细胞凋亡的促进作用最好，与其他方案相比，联合使用Adv-CXCL10和抗PD-1治疗也能抑制肿瘤增殖。

Adv-CXCL10显著增强了PD-1抗体的治疗效果 Adv-CXCL10通过重塑抗肿瘤免疫微环境增强抗PD-1治疗 研究者用免疫荧光和流式细胞术验证了联合治疗对免疫细胞的招募能力。Adv-CXCL10与PD-1抗体联合组CD4+T和CD8+T细胞较其他组明显增加，而CXCR3+T细胞百分比在联合组同步增加。肿瘤抑制细胞因子IFN-γ在CXCL10-CXCR3轴中起着重要作用研究者也证实了在Adv-CXCL10和抗PD-1联合治疗中IFN-γ的增加。与此结果一致的是，颗粒酶B也出现了相同的变异，进一步证实了Adv-CXCL10在增强PD-1抗体抗肿瘤效率方面的作用。

CD4阳性区域CD8阳性区域 Adv-CXCL10与PD-1抗体在体内的联合效应依赖于CXCR3+细胞 上述结果提示了CXCR3+细胞在联合方案中的重要作用。为了证实这一发现，当小鼠被注射Adv-CXCL10和PD-1抗体的组合时，研究者进行了CXCR3阻断实验。 接种CXCR3抗体后1天，CXCR3+ T细胞被清除，甚至在7天内观察到阻断作用。结果表明CXCR3信号在联合治疗中至关重要。溶瘤腺病毒（Adv-CXCL10）通过增加TME中CXCR3 T细胞的数量来增强PD-1抗体，当CXCR3信号传导阻断时，效果消失。 研究表明，溶瘤病毒可以作为一种安全有效的辅助工具，携带外源性免疫调节因子，如CXCL10，激活TME内的免疫环境，并与PD-1抗体合作，通过多种机制实现抗肿瘤作用。

打赏