干细胞治疗卵巢早衰的两个临床案例结果发现：具有临床应用价值

卵巢早衰(POF)是一种相对常见的疾病，影响1-3%的成年女性。当40岁以下的女性卵巢功能丧失时，就会发生卵巢早衰。原因主要是医源性或特发性的。闭经和不孕是最重要的临床表现。

此外，POF与严重的健康后果有关，包括心理困扰、骨质疏松症、自身免疫性疾病、缺血性心脏病、阿尔茨海默病、代谢综合征、糖尿病和死亡风险增加。

迄今为止，尚无治疗干预被证明可有效恢复卵巢早衰患者的生育能力。通过激素操纵来刺激卵巢功能的尝试通常被证明是不成功的，并且患者通常求助于卵子捐赠来实现怀孕。在我们的临床前工作中，人骨髓间充质干细胞的卵巢内给药能够恢复卵巢激素的产生，重新激活卵泡发生。

这两年在《Stem Cell Research & Therapy》杂志上发表了一篇《卵巢内注射自体人间充质干细胞可增加卵巢早衰女性的雌激素产生并减少更年期症状：两例病例报告》。两则案例表明卵巢内移植干细胞可能是卵巢早衰（POF）潜在的治疗方法。

干细胞移植治疗卵巢早衰临床应用案例

根据以下纳入标准招募患者进入研究：年龄超过18岁，原发性或继发性闭经至少6个月，至少两个绝经期促卵泡激素 (FSH) 水平 (>40IU/L)，正常核型46，XX，并且存在至少一个卵巢。纳入和排除标准总结在表1中。此外，将间充质干细胞注射到右侧卵巢之前和之后12个月的激素水平总结在表2中。

表1：FSH促卵泡激素，POF卵巢早衰

表2：缩写：AMH抗苗勒管激素、CA125癌症抗原125、FSH促卵泡激素、LH促黄体激素、P1患者#1、P2患者#2*数据不可用

患者具体状况

第一种情况：一名36岁的白人女性出现继发性闭经4年。入院时，她所有的常规术前实验室检查结果均正常，见表3。

第二种情况：一名42岁的白人女性，G0P0，出现继发性闭经。体检及实验室检查正常，结果见表3。

表3

表3，缩写：APTT活化部分凝血活酶时间、Hct血细胞比容、Hgb血红蛋白、INR国际标准化比值、MCH平均红细胞血红蛋白、MCHC平均红细胞血红蛋白浓度、MCV平均红细胞体积、MPV平均血小板体积、RBC红细胞、RDW红细胞分布宽度、WBC白细胞、 WNL在正常范围内、HENT头、耳、鼻、喉.

方法

腹腔镜和右卵巢直接注射：我们使用腹腔镜将收获的BMSCs (4 ml) 直接注射到右侧卵巢中。将相似量（4ml）的生理盐水注射到左侧卵巢中作为对照。在案例2中，没有这样做，因为患者之前曾接受过左卵巢切除术。使用5毫米注射器（22号针头）进行注射。助手使用无创伤抓握器牢牢固定卵巢（图1）。

图1，间充质干细胞注射后卵巢形态学变化

a注射前萎缩的卵巢（绿色箭头）（低放大倍数）。

b注射前萎缩的卵巢（绿色箭头）（放大）。

c腹腔镜抓握器（绿色箭头）通过干细胞注射器（红色箭头）在注射过程中稳定卵巢。

d萎缩的卵巢（绿色箭头）在注射过程前稳定到位。e注射干细胞。f子房（绿色箭头）注射过程接近尾声（注意肿胀和卵巢大小明显增加

经阴道超声成像：MSC植入后，使用标准的经阴道超声技术在1周、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月时测量子宫内膜厚度、卵巢体积和窦卵泡计数 (AFC)。

血清激素水平生化评价及症状评价：在移植后1周和1、3、6、9 和12个月检查血清激素谱。检查的激素包括FSH、LH、抗苗勒管激素 (AMH)、E2和黄体酮。使用标准实验室技术通过放射免疫测定法对血清激素进行定量。两名患者都向研究协调员自我报告了症状。

结果

将自体骨髓间充质干细胞通过腹腔镜注射到右侧卵巢中。左侧卵巢（在第一种情况下）进行了假手术以进行控制（图1）。注射后，右侧卵巢的体积显着增加，证实了卵巢内的正确注射和细胞递送。在每个研究方案的不同时间点监测卵巢体积和激素水平；但是，由于不合规，第二种情况下缺少几个数据点。

图2、3、4和5来自第一种情况。

图2，间充质干细胞植入患者1卵巢后测量的卵巢体积（以立方厘米为单位）

图3，在间充质干细胞卵巢植入前后量化的血清雌激素水平

箭头表示间充质干细胞移植后7个月内恢复的月经

图4，间充质干细胞卵巢植入前后的血清促卵泡激素 (FSH) 水平报告

图5，检查间充质干细胞卵巢植入前后的血清黄体生成素 (LH) 水平

第一个案例

测试卵巢的卵巢体积从注射前的0.63cm3增加到随访第1周的2.5cm3 ，然后在3周后增加到2.05cm3。第3个月和第6个月的随访显示卵巢体积稳定，分别测量为2.3cm3和2.7cm3，在7个月恢复月经后大小增加（图2）。这些数据表明，右侧卵巢对原位BMSC注射有特异性反应。

此外，我们注意到BMSC植入后血清雌激素水平总体增加（图3）。MSC植入前和MSC植入1周后，雌激素水平<10.9pg/ml，增加了3倍至20pg/ml（图3）。MSC注射后6个月，雌激素水平达到26.1pg/ml。血清FSH和LH水平也有变化，如图1和图4所示。分别如图4和5所示，但与术前水平相比，BMSC植入后血清孕酮水平、抗苗勒管激素水平或窦卵泡计数未观察到变化。

第二种情况

我们在9个月的随访中观察到雌激素水平升高。FSH、LH或孕酮水平没有变化。两名患者都报告了更年期症状的减少，例如潮热、盗汗和性交疼痛。两名患者均在BMSC植入后7个月报告了1次月经事件（阴道出血3天，量为轻度至中度）。

结论

第一个病例的结果表明，将自体骨髓间充质干细胞注射到POF患者的卵巢中具有可测量/可量化的效果，并且具有可喜的结果，这可能使该方法成为未来这些患者的潜在治疗选择。

第二个病例结果表明在POF患者中使用类似方案导致一名患者自然妊娠。

研究揭示了自体骨髓间充质干细胞植入POF患者卵巢后观察到的令人鼓舞的初步数据。在术前评估中观察到的BMSC输送到卵巢减少了更年期症状。接受治疗的患者能够在MSC植入后7个月内恢复月经。此外，我们的研究没有报告并发症或安全问题。

卵巢早衰是女性生殖系统健康的最大威胁之一。通过卵巢内注射间充质干细胞成为治疗卵巢早衰的新途径。相信在不久的将来干细胞一定会带给人类更多的惊喜。

参考文献：Igboeli, P., El Andaloussi, A., Sheikh, U. et al. Intraovarian injection of autologous human mesenchymal stem cells increases estrogen production and reduces menopausal symptoms in women with premature ovarian failure: two case reports and a review of the literature. J Med Case Reports 14, 108 (2020). https://doi.org/10.1186/s13256-020-02426-5.