Rho激酶抑制剂可逆转靶向抗肿瘤药物阿帕替尼所致的血压升高

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心血管疾病和肿瘤是全世界范围内导致死亡的两大主要病因，随着新型抗肿瘤药物的应用，使肿瘤患者寿命显著延长，而随着人口老龄化的出现，肿瘤与心血管疾病合并存在的情况日益普遍，另一方面，部分抗肿瘤药物可导致心血管系统损害，从而使肿瘤患者心血管疾病患病率升高，因此，心血管疾病已成为肿瘤幸存者远期死亡的主要原因。

血管内皮生长因子（VEGF）在肿瘤生长和转移中起关键作用，该通路小分子酪氨酸激酶抑制剂（TKI）显示出良好的抗肿瘤作用，但其导致药物相关性高血压的发生率高达11~45%，血压升高不仅会导致抗肿瘤治疗的中断，还会加剧心血管事件的发生。该类型高血压的发病机制尚不明确，目前的降压药物均缺乏有力证据，患者常因为难以控制的高血压而被迫停药。

近期兰州大学第二医院余静教授团队在Journal of Hypertension杂志上发表了一项研究，通过动物实验评估不同剂量阿帕替尼对大鼠血压的作用及是否伴随Rho/Rho激酶（ROCK）信号通路的激活，并在此基础上给予ROCK通路抑制剂Y27632，验证其是否可抑制阿帕替尼所致的血压升高及血管重构，从而为该类型高血压的防治及药物研发提供理论依据。

研究发现无论30mg/kg∙d还是15mg/kg∙d阿帕替尼均可致血压在干预第6天开始即出现迅速的血压升高，且表现为SBP、DBP及MBP均显著升高，但于干预第12天时达到平台期，干预第15天与第12天SBP、DBP及MBP均无显著差异。叠加给予Y27632可使30mg/kg∙d组大鼠MBP增幅下降（ΔΔMBP）17.3±3.0mmHg，下降率64.6%（p<0.001)，而15mg/kg∙d组ΔΔMBP 15.5±2.1mmHg，下降率69.6%（p<0.001)。此过程伴随中段主动脉RhoA及ROCK Ⅱ mRNA及蛋白水平的升高（p<0.001），且30mg/kg∙d组更为明显，而ROCK Ⅰ mRNA及蛋白水平则无显著改变（图1）。

图1 阿帕替尼所致血压及心率变化。给予30mg/kg∙d或15mg/kg∙d阿帕替尼均可导致血压自干预第6天开始迅速升高，伴随心率的下降，于第12天达到平台期。Y27632可逆转上述改变。A，收缩压（SBP）上升趋势；B，舒张压（DBP）上升趋势；C，平均压（MBP）变化幅度；D，心率（HR）变化幅度。

RhoA为一类三磷酸鸟苷酸环化酶（GTPase），在与三磷酸鸟苷酸（guanosine triphosphate, GTP）结合的活化状态或与二磷酸鸟苷酸（guanosine diphosphate, GDP）结合的失活状态之间循环，RhoA与GTP结合后，通过多个下游效应因子交互作用而介导血压调节功能，其中最重要且研究最多的效应因子即为ROCK，包括两个亚型ROCK1和ROCK2，虽然两者具有高度同源性，但仍有研究发现仅ROCK Ⅱ可直接与肌球蛋白结合亚基（myosin binding subunit, MBS）的肌球蛋白轻链磷酸酶（myosin light chain phosphatase, MLCP）相结合，从而在血管平滑肌细胞的收缩中发挥重要作用，ROCK Ⅰ则无此特性。ROCK Ⅱ 激活可剂量依赖性地抑制MLCP活性，导致肌球蛋白轻链磷酸化，从而增强血管平滑肌收缩，导致血压升高。

检测中段主动脉壁MLCP蛋白表达，发现无论是30mg/kg∙d还是15mg/kg∙d阿帕替尼均可使MLCP表达均较对照组显著下降，且呈现出剂量依赖性，即高剂量阿帕替尼组下降更为明显，叠加给予Y27632可使其表达得以逆转。同时，阿帕替尼组eNOS mRNA水平较对照组明显下降，但内皮素受体A（endothelin receptor A, ETA）蛋白表达及血清ET-1水平显著升高，胶原蛋白Ⅰ表达水平亦显著升高，上述改变均可被Y27632逆转（图2）。

图2 血管收缩及增殖相关蛋白表达。给予阿帕替尼可致中段主动脉血管壁MLCP蛋白表达水平显著下降，而ETA、Col Ⅰ 蛋白水平显著升高，叠加给予Y27632可逆转上述趋势。*p<0.05。MLCP，肌球蛋白轻链磷酸酶；ETA，内皮素受体A；Col Ⅰ，胶原蛋白Ⅰ。

图3 中段主动脉血管壁组织学检查。HE染色（a、b）及维多利亚蓝染色（c）均显示各组大鼠具有完整的弹力纤维层。Apa30组MT/LD比值略低于对照组，Apa15组与对照组相比无显著差异，但Y27632在两组中均可致其显著降低（f）；弹力纤维与胶原纤维双染色d）及天狼猩红染色（e）示Apa30组血管壁中膜胶原纤维明显增多，且天狼猩红染色定量分析（g）示Apa15组胶原纤维与对照组相比亦具有显著统计学差异。*p<0.05

通过HE染色、维多利亚篮染色、弹力纤维/胶原纤维双染色以及天狼猩红染色等组织学检测评估血管重构，发现阿帕替尼可致大鼠中段主动脉壁中膜厚度（media thickness，MT）与管腔内径（lumen diameter，LD）比值，即MT/LD比显著增高，中膜胶原蛋白含量增加，而叠加给予Y27632可逆转上述改变（图3）。既往已有针对舒尼替尼的研究证实TKI类药物相关性高血压不伴有RAAS系统的激活，ACEI类药物降压效果欠佳，因此阿帕替尼相关性高血压与Bartter/Gitelman综合征存在相反的临床表现，前者不伴有RAAS系统激活，但存在高血压及心血管-肾脏重构，而后者伴有RAAS系统的激活，但不存在高血压及心血管-肾脏重构。RhoA/ROCK信号通路所介导的RAAS系统反向调节，可能是两者发病的共同机制。ROCK抑制剂可能通过提高ACE2活性及增加具有血管扩张和抗重构作用的Ang1-7的释放，降低阿帕替尼所致的高血压并抑制其所致的血管重构。

虽然RCOK抑制剂对于阿帕替尼所致的高血压具有治疗作用，但对于其应用可能存在另一顾虑，即其是否会影响阿帕替尼的抗肿瘤作用？实际上，肿瘤的生长、侵袭及转移等病理生理过程中存在RhoA/ROCK信号通路的激活，而ROCK通路抑制剂对其具有抑制作用。因此，ROCK抑制剂治疗可能不仅能够预防或逆转TKI类等VEGF通路抑制剂所导致的血压升高，而且对其抗肿瘤治疗具有协同作用。

综上所述，VEGF通路小分子TKI类药物阿帕替尼可致血压升高及血管重构，此过程伴随RhoA/ROCK信号通路的激活，而非选择性ROCK抑制剂Y27632对其具有逆转作用，提示RhoA/ROCK信号通路激活可能是阿帕替尼所致高血压的潜在分子生物学机制，ROCK抑制剂由于既与TKI类药物具有协同抗肿瘤作用，又对其所致的血压升高具有防治作用，因此有望成为该类型高血压的理想潜在治疗药物。

图文设计：三度医学 CtrlZ

排版编辑：三度医学 May

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