研究报告 | CD40激动性抗体研发现状

近年来，国内外成功上市抗体药物大多针对抑制性免疫检查点（如PD-1，CTLA-4等）。另一类针对共刺激性检查点（CD27、CD40、OX40、GITR、ICOS等）的激动性抗体药物也在紧锣密鼓地开发中。其中CD40在免疫系统中扮演重要角色，针对该靶点的抗体有很大的临床开拓空间。

01CD40靶点介绍

CD40是I型跨膜糖蛋白，其包膜外氨基酸残基与神经生长因子受体（NGFR）、肿瘤坏死因子受体（TNFR）、Fas抗原（CD95）和T淋巴细胞的CD27等高度同源，这些分子组成了TNFR超家族或称NGFR超家族。

CD40广泛表达于免疫细胞表面，包括B细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞，同时也表达于非免疫细胞的表面如上皮细胞、内皮细胞、脂肪细胞、间质细胞（纤维细胞、平滑肌细胞、滑膜细胞、星状细胞等）、血小板。另外，CD40还表达于白血病B细胞上，且在并指状细胞、树突状细胞、胸腺上皮细胞和某些上皮癌细胞表面也有表达。

人CD40配体也称CD154，CD40与TNF-α、TGF-β同源，他们共同组成TNF基因家族。CD40L主要表达于活化的CD4+T淋巴细胞表面，提供B淋巴细胞活化所必需的协同刺激信号，在部分CD8+T淋巴细胞、血小板、单核细胞/巨噬细胞、外周血嗜碱粒细胞、嗜酸粒细胞、柱状细胞、B细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞、内皮细胞的表面也有少量表达。受体细胞被激活后，表达在细胞表面CD40L随后被切下来流入血液，产生一个仍具有生物活性、可溶性的、三聚态的片段，又称为可溶性CD40L。三聚体结构是其发挥功能的前提条件。引入亮氨酸拉链基序可显著提高可溶性CD40L的生物学活性。

CD40L可共刺激人和小鼠的CD4+和CD8+T淋巴细胞，使CD40L与CD8+T细胞上的CD40相互作用以获得最佳启动效应。CD40-CD40L共刺激途径在胸腺依赖的体液免疫反应中起重要作用，对B细胞激活、分化及记忆的产生至关重要，同时对激活抗原提呈细胞（APC）也非常重要，是T细胞激活的关键。

CD40-CD40L系统通过T细胞和APC细胞的相互作用影响免疫应答，以APC细胞表面的主要组织相容复合物为第一信号，刺激淋巴细胞表达CD40L，后者与CD40结合，激活APC表面的黏附分子，该分子提供激活T细胞的第二信号，放大免疫应答、防止致敏和诱导免疫耐受。

这对共刺激分子对细胞免疫和体液免疫都有调节作用。而CD40-CD40L共刺激途径对多种疾病都有影响，通过对这些疾病的研究发现，这对分子能增强机体的保护能力。病原体可干扰CD40-CD40L共刺激途径从而破坏CD40信号。CD40-CD40L共刺激途径在免疫调节和体内平衡中起重要作用。在炎症反应中，CD40与CD40L在T细胞和其他非免疫细胞中短暂表达，以调节众多细胞与分子的过程，包括细胞及体液的适应性免疫的发生和发展过程。因此，CD40与CD40L参与了众多炎性疾病的病理过程，包括自身免疫疾病、动脉粥样硬化血栓形成、肿瘤及呼吸道疾病。

其中与CD40相关的自身免疫疾病包括以下几种：类风湿性关节炎（CD40不仅与RA中自身抗体的产生有关，而且也由滑膜成纤维细胞直接表达，与CD40L接触，导致炎症介质的产生，如TNF、IL-1b和MMP，导致进一步的炎症和关节破坏）；自身免疫性肾炎；炎症性肠病（IBD的CD40L和CD40在循环和肠粘膜中都有增加。CD40在粘膜和粘膜下的内皮和间充质细胞中强烈过度表达，CD40的表达与UC的临床活性相关）；自身免疫性皮肤病，多发性硬化症等。

CD40-CD40L信号传导对免疫细胞和癌细胞的影响: CD40L在活化的T细胞上表达。CD40-CD40L与巨噬细胞的结合导致TNF-α，一氧化氮合酶和ADCC的产生。CD40-CD40L与树突状细胞和巨噬细胞的结合导致白细胞介素12（IL-12）的分泌，这对T细胞和NK细胞介导的抗肿瘤作用很重要。B细胞上的CD40-CD40L活化支持T细胞免疫和抗体产生。癌细胞也可能直接受到影响，并在CD40激活后发生凋亡。

近年来，随着CD40-CD40L通路机制的逐步清晰，针对该靶点的转化研究也越来越热门。激动性抗体可用于肿瘤的治疗，抑制性抗体则被探索用于治疗自身免疫疾病。本文主要关注激动性抗体。

目前许多不同配方的激动剂CD40抗体已经在临床上进行了评估，发现是可耐受和可行的。给药与轻度至中度（但短暂性）细胞因子释放综合征相关，在门诊治疗中易于治疗。在黑色素瘤患者中观察到了联合抗 CTLA4 单克隆抗体 （mAb）治疗的抗肿瘤活性，在胰腺癌、间皮瘤和其他肿瘤联合化疗的患者中观察到肿瘤消退。

Cancers 2021, 13(6),1302

02CD40激动性抗体临床在研项目概况

来源：药渡数据库

Sotigalimab (APX005M)

CD40激动性抗体这一领域进展速度最快的是创新药公司Apexigen在研的sotigalimab (APX005M)，通过激活免疫功能，逆转影响癌症患者的全身免疫抑制。目前已经获得FDA授予的孤儿药资格，用于治疗食道和胃食管连接部腺癌及胰腺癌的治疗。

Sotigalimab 是一种人源化单克隆抗体，以高亲和力结合CD40并激活抗原呈递细胞（树突细胞、单核细胞和 B 细胞），从而刺激癌症特异性T细胞反应。可用作单一药物，也可与其他免疫肿瘤药物、靶向治疗、化学治疗、疫苗和放射治疗联合使用。

2022 AACR 会议上，Apexigen宣布一项评估肿瘤内sotigalimab (sotiga)的Ⅱ期临床试验的数据。联合系统性pembrolizumab单抗治疗晚期或转移性黑色素瘤treatment-naïve患者。在局部和远处(非注射)病变中观察到广泛的固有和适应性免疫激活。在PD-L1阴性肿瘤患者和LDH升高患者中观察到令人鼓舞的抗肿瘤活性。

然而2021年5月，Apexigen在ASCO 2021年年会上公布了CD40抗体Sotigalimab (APX005M)用于治疗转移性胰腺癌联合用药的2期临床数据。APX005M联用吉西他滨/白蛋白紫杉醇标准疗法，1年总生存期的临床获益为48.1%（P=0.062，n=36），历史标准疗法对照组数据为35%。

同时，Nivolumab联用化疗组1年总生存期的临床获益为57.3%（P=0.007，n=34），Nivolumab，APX005M联用化疗组1年总生存期的临床获益为41.3%，且（P=0.236，n=35）。仅Nivolumab联用化疗组有明确的OS改善的统计学意义。APX005M与PD1抗体联合化疗组，不如两者单药联合化疗组。表明，PD1抗体联用CD40抗体，并没有达到临床前联合用药的效果。由此，我们需要持续关注CD40抗体与免疫检查点抑制剂的联合用药效果。

Cifurtilimab（SEA-CD40）

SEA-CD40是Seagen利用其专有的糖工程化抗体（SEA）技术开发的首个靶向CD40的新型非岩藻糖基化单克隆受体激动剂抗体，可靶向激活CD40信号通路，增强免疫系统的抗肿瘤活性。

2022年，Seagen在美国临床肿瘤学会胃肠道肿瘤研讨会（ASCO GI）上公布了评估SEA-CD40联合化疗及一款PD-1疗法治疗转移性胰腺导管腺癌（PDAC）的Ⅰ期临床试验数据。该Ⅰ期临床试验，对61例未经治疗的转移性PDAC患者，采用SEA-CD40联合化疗GnP和抗PD-1疗法Keytruda进行治疗。其中，40例患者接受了10mcg/kg剂量、21例患者接受了30mcg/kg剂量的SEA-CD40治疗。结果显示，以上疗法在测试的2种剂量水平下均显示出抗肿瘤活性。总体（n=61）cORR为44%、中位PFS为7.2个月（95%CI:5.6-9.0）、中位OS为15.0个月（95%CI:7.8-19.9）。目前，疗效随访仍在继续进行中。

Tecaginlimab（GEN1042）

Genmab与BioNTech共同开发的DuoBody-CD40x4-1BB（GEN1042）是靶向CD40和4-1BB的双抗，也是用于实体瘤。一项针对DuoBody-PD-L1x4-1BB的1/2期临床试验正在进行中，旨在评估该药用于多种实体瘤患者的安全性与疗效，包括与帕博利珠单抗（pembrolizumab）的联合治疗方案，涉及非小细胞肺癌、头颈部鳞状细胞癌、黑色素瘤、胰腺导管腺癌。

BioNTech在2021年SITC大会上以小型口头报告的形式报告正在进行的 1/2 期试验的剂量递增部分的临床数据。总体而言，数据表明晚期实体瘤患者具有良好的安全性，以及生物和早期抗肿瘤活性。截至2021年6月11日，49名患者中的25名（51%）患者实现了疾病控制，其中包括根据RECIST1.1确认的两名在黑色素瘤和神经内分泌肺癌中的部分缓解。

SUMMARY

小结

CD40可能是免疫细胞共刺激分子中最有潜力的靶点之一，对于CD40激动性抗体的研究逐渐深入，也产生了很多不同的结果。CD40靶点临床在研管线竞争程度中等，国内外制药企业都有布局，临床二期7个，临床一期6个，主要适应症为黑色素瘤、非小细胞肺癌、胰腺癌等。