CDH6靶点进展：HKT288鹿死临床，DS-6000孤勇前

CDH6 ，又名K-钙黏蛋白，属于II型钙粘蛋白，由三个不同结构域组成，一个含有五个钙粘蛋白序列的胞外结构域（ECD），一个跨膜区和一个胞内尾巴组成。

CDH6在众多恶性肿瘤中高表达，与CDH6蛋白表达水平低或不存在的病例相比，CDH6蛋白的过量表达预后更差。

已有研究表明，卵巢癌和肾癌的肺部转移需要CDH6和αIIb/α2整合素的参与，虽然腹膜转移是卵巢癌最常见的位置，但卵巢癌和肾癌的远处转移优先发生在肺部。因此有学者研究了CDH6沉默以及整合素亚单位αIIb和α2对卵巢癌和肾癌细胞在远处器官的归巢能力的影响。结果揭示了CDH6促进的αIIbβ3/α2β1整合素串联在卵巢癌和肾癌的粘附、侵袭和肺部转移中的关键作用。下图B总结了整合素激活和串扰的不同模式。简而言之，CDH6或CDH17与αIIbβ3整合素的结合促进α2β1介导的粘附和侵袭。然而，除了那些没有αIIbβ3表达的细胞，缺乏αIIbβ3的激活会抑制α2β1的作用。

CDH6最早被发现于肾癌，此外，在卵巢癌、甲状腺癌、胆管癌、肝细胞癌和小细胞肺癌中也观察到CDH6表达。

在研药物

目前全球范围内布局CDH6靶点的企业稀少，但已有候选产品表现出相当的潜力。

第一三共DS-6000

DS-6000是基于第一三共的DXd技术平台开发的ADC，该平台在payload和linker上作出了多项技术创新：1）创新DNA拓扑异构酶I抑制剂（DXd）具有独特的作用机制，与常见化疗药物伊立替康相比，活性提高10倍。2）具有很强渗透细胞膜的能力，让它们在杀伤吞入ADC的癌细胞之后，能够杀死附近的癌细胞，产生旁观者效应。3）DXd在血液中的半衰期显著缩短，有助于减少毒副作用的产生。4）连接子有着非常高的稳定性，让非肿瘤组织不会受到毒性药物的影响。5）它能够特异性被肿瘤中高度表达的溶酶体蛋白酶切割。6）并且可以在一个抗体分子上偶联多个细胞毒性药物，提高药物抗体比例（DAR）。

DS-6000的payload为DXd，DAR值约为8。

临床前研究表明，当DS-6000与癌细胞表面的CDH6结合时，DS-6000被内吞。然后，溶酶体酶分解连接体，释放细胞毒性有效载荷，有效摧毁癌细胞。此外，DS-6000对表达CDH6的肾细胞癌和卵巢癌细胞表现出肿瘤生长抑制和肿瘤消退。2022年ASCO大会上，第一三共公布了DS-6000治疗RCC和OVC的1期人体研究数据。在20例可评估的患者中，有6例患者达到PR，ORR为30%。

剂量爬坡：

入组的患者，前线平均治疗线数为3线，患者CDH表达量H score值在0-250之间，表达量并不算太高：

安全性数据：

在20例可评估的患者中有6例取得PR，其中5例OVC患者，ORR为35.7%（现有末线疗法仅10%左右）；1例RCC患者，ORR为16.7%。6例PR的患者中，3例患者剂量为9.6mg/kg，该剂量下不良反应比较严重，患者的生存获益可能因此受到限制。

普众发现AMT-707

今年6月8日，普众发现与昂阔医药就AMT-707（CUSP06）的开发和商业化达成许可协议。AMT-707是一款潜在高度差异化、Second-in-Class，靶向CDH6的抗体药物偶联物（ADC）。

根据许可协议条款，昂阔医药获得在大中华区以外的全球范围内独家开发和商业化CUSP06的权利。普众发现将获得预付款、开发、注册和销售里程碑付款以及分级特许权使用费。

CUSP06是一款处于临床前开发阶段的靶向CDH6的ADC。CUSP06的结构组成为：与CDH6具有高结合亲和力的专有抗体、蛋白酶可切割的连接子，以及依沙替康（Exatecan）有效载荷（一种有效的经临床验证的拓扑异构酶-1抑制剂）。该连接子专门设计用于连接依沙替康（Exatecan）有效载荷，可生成高度稳定和均一的ADC。该有效载荷不是BCRP/P-gp的底物。临床前研究数据显示，基于这种连接子/有效载荷的ADC比竞品ADC具有更强的“旁观者效应”。CUSP06的药物抗体比值约为8。在几种CDH6高表达和低表达的体内癌症模型中，CUSP06已显示出优异的抗肿瘤活性。目前正在进行IND enabling研究。

诺华NOV-13(HKT288)

这款药目前已经因为1期临床中的不良事件而终止研究，且因为提前终止，无法确定最大耐受量和推荐剂量，由于数据有限而无法对其疗效下结论。

有趣的是，这款ADC发现及优化的路径被发表在了《Cancer Discovery》上。首先，研究者为了挖掘用于ADC治疗的抗原，利用癌症基因信息数据库TCGA和基因型组织表达GTEx从预测的细胞表面表达基因进行了全基因组差异表达分析，结果发现CDH6基因在一种肾细胞癌和两种卵巢癌中mRNA表达升高其频繁，同时在正常组织中表达受限，并通过免疫组化进行了验证。

然后，通过噬菌体上展示的人组合抗体库进行抗体生成运动，筛选出了38个独特的IgG特异性结合CDH6，基于胞内活性、抗体亲和力和抗原表位多样性等指标评价，选择其中10个IgG与SMCC-DM1偶联并在皮下OVCAR3细胞异种移植模型中进行评价。最后得出，LTV977抗体在体外具有高效、靶向性及浓度依赖性的ADC活性。

之后，研究者验证了LTV977的靶向性和细胞活性。通过ELISA检测，LTV977可与CDH6结合而无法结合CDH9和CDH10，并在OVCAR3（内源性表达CDH6）和OVACR8-CDH6阳性中相结合，而在OVCAR8-CDH6阴性细胞中没有结合。

同时展示了与CDH6复合的相应Fab片段的晶体结构，通过免疫共沉淀得出E-cadherin蛋白同源结构域5（EC5）提供足够空间与抗体结合，并揭示CDH6与抗体结合过程中CDH6残基Tyr575和Asp574的必要性。

随后，通过JURKAT-NFAT-luc报告分析和共培养细胞毒试验，LTV977可诱导Fc介导的效应器功能，包括抗体依赖性细胞毒性和补体依赖的细胞作用。

下一步开始优化CDH6-ADC的连接子。选择不可裂解的连接子连接药物（SMCC-DM1）、可裂解的SPDB-DM4和不可裂解的sulfo- SPDB-DM4。通过CDH6表达的OVCAR3细胞异种移植动物模型和肿瘤患者来源动物模型（PDX），得出sulfo- SPDB-DM4为最优的连接子。

再往后就是通过大鼠和猕猴毒性试验考察CDH6-ADC的临床前耐受性。利用CDH6的物种交叉反应抗体检测正常大鼠、猕猴和人组织中CDH6的表达从而评价大鼠和猕猴是否适用于CDH6靶向的安全性评价，结果显示CDH6在正常肾和肝胆管中表达，而在皮肤基底层不表达。将靶向的CDH6-sulfo-SPDB-DM4或无靶向的IgG1-sulfo-SPDB-DM4作用于大鼠和猕猴，CDH6-sulfo-SPDB-DM4的耐受性良好，并称之为ADC HKT288。

最后检验HKT288在肾透明细胞肿瘤的PDX模型中能否起靶向抗瘤：

为了在更广泛的异质性人群中评估临床前疗效，HKT288接下来在卵巢PDX临床试验（PCT）中进行了测试。结果发现与未经治疗的异种移植患者相比，HKT288显示出明显的统计学意义（P = 2.39E-6），提高了无进展结果的概率。

在这个未经选择的卵巢癌PDX模型人群中，40%（12/30）实现CR或PR。

HKT288的抗瘤反应是强大且持久的（超过150天）。

总的来说，这项研究通过将细胞检测与经验性体内候选筛选、多物种毒理学评估、基于人群的PDX临床试验和机制性异种移植研究相结合，体现了ADC药物发现路径。另外这些临床前数据突出了HKT288的潜在优势，然而进入临床后又是另一回事了。