学术前沿｜J Hepatol：胆道闭锁的潜在治疗新方法

已知免疫失调在胆道闭锁 (BA) 中至关重要，但先天免疫细胞的作用仍不清楚。

2022年7月5日，广州医科大学夏慧敏，温哲及陈严共同通讯在Journal of Hepatology（IF=30）在线发表题为“CD177+ cells produce neutrophil extracellular traps to promote biliary atresia”的研究论文，该研究分析了恒河猴轮状病毒 (RRV) 诱导的 BA 小鼠模型肝脏中的免疫细胞，并进行了单细胞 RNA 测序以分析肝脏中的 Gr-1+ 细胞。在 NOD/SCID 小鼠中建立了 RRV 诱导的 BA 模型，并观察到肝脏中 Gr-1+ 细胞水平升高。 

RNA 测序分析显示，CD177+ 细胞是 Gr-1+ 细胞的主要群体，并且表达了高水平的干扰素刺激和中性粒细胞脱粒基因。CD177-/- BALB/c 小鼠表现出疾病发作延迟和发病率和死亡率降低。在 BA CD177+ 细胞中检测到大量线粒体，ROS 和 NET 水平升高，这会诱导共培养中胆管上皮细胞 (BEC) 的凋亡。在一项初步临床研究中，对 BA 患者施用 NAC 可降低 CD177+ 细胞数量和 ROS 水平，这表明潜在的有益作用。总之，该研究表明，CD177+ 细胞通过 NET 形成在 BA 发病机制的启动中起重要作用。

胆道闭锁（BA）是一种新生儿疾病，预后差，死亡率高，无需手术干预，如Kasai门肠造口术或肝移植，作为最终选择。BA的病因和发病机制尚不清楚，但功能失调的免疫细胞，如NK细胞、B细胞、CD4+和CD8+ T细胞，与直接或间接的BEC损伤有关，从而导致胆管损伤。

在 BA 患者的胆管周围观察到中性粒细胞的积累，之前发现在小鼠疾病模型中，作为中性粒细胞标志物的新生儿 Gr-1+ 细胞的消耗阻止了 BA 的发生，这表明了一种病理作用对于这些细胞。由于新生儿 Gr-1+ 细胞是混合群体，因此需要进一步分析以确定 Gr-1+ 细胞群体的细胞成分。

CD177 在中性粒细胞亚群上特异性表达，据报道 CD177+ 中性粒细胞积累与多种自身免疫性疾病有关。然而，在炎症性肠病的发病机制中，CD177+ 中性粒细胞通过释放 IL-22 和中性粒细胞胞外陷阱 (NETs) 发挥保护作用。 

NETs 是由染色质 DNA 细丝和多种杀菌效应蛋白组成的三维网络结构，如组蛋白、中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE)、髓过氧化物酶 (MPO)、组织蛋白酶 G 和乳铁蛋白，可以捕获和杀死病原体，但也可能导致组织和细胞损伤。NETs 可以作为自身抗原，在 SLE 和类风湿性关节炎的发展中诱导自身抗体和炎症产物的产生。有人提出 NETs 可能与 BA 相关，但它们参与疾病过程的机制尚未得到充分探索。

在这项研究中，首先在 NOD/SCID 新生小鼠中建立了 BA 模型，在缺乏适应性免疫系统的情况下，确定出生后24小时内接种RRV诱导的BA中先天免疫反应的功能，并将其与BALB / c小鼠的BA进行比较。然后使用 10x Genomics 单细胞 RNA 测序 (scRNA-seq) 平台分析 Gr-1+ 细胞的组成，确定 CD177+ 细胞的鉴定和功能。CD177基因缺陷小鼠的应用揭示了这些细胞在BA发育中的重要性。

从 BA 患者中分离的体外 CD177+ 细胞释放 NETs，并检查了它们在 BECs 凋亡中的作用。此外，还检查了 NET 抑制剂在 BA 小鼠模型中的作用。进行 RNA 测序以揭示 BA 患者 CD177+ 细胞中的基因表达谱。在一项初步临床研究中，BA 患者接受了 NAC。总的来说，本研究评估了 CD177+ 细胞及其释放的 NET 在 BA 发病机制中的作用。

该研究分析了恒河猴轮状病毒 (RRV) 诱导的 BA 小鼠模型肝脏中的免疫细胞，并进行了单细胞 RNA 测序以分析肝脏中的 Gr-1+ 细胞。在 NOD/SCID 小鼠中建立了 RRV 诱导的 BA 模型，并观察到肝脏中 Gr-1+ 细胞水平升高。 

RNA 测序分析显示，CD177+ 细胞是 Gr-1+ 细胞的主要群体，并且表达了高水平的干扰素刺激和中性粒细胞脱粒基因。CD177-/- BALB/c 小鼠表现出疾病发作延迟和发病率和死亡率降低。在 BA CD177+ 细胞中检测到大量线粒体，ROS 和 NET 水平升高，这会诱导共培养中胆管上皮细胞 (BEC) 的凋亡。在一项初步临床研究中，对 BA 患者施用 NAC 可降低 CD177+ 细胞数量和 ROS 水平，这表明潜在的有益作用。总之，该研究表明，CD177+ 细胞通过 NET 形成在 BA 发病机制的启动中起重要作用。

摘译自：

https://www.journal-of-hepatology.eu/article/S0168-8278(22)00409-3/fulltext#%20

来源：iNature