丹酚酸B对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的影响及机制研究

陈学英纪文焘 张笑婷 王贤冬 薄禄龙

海军军医大学附属长海医院麻醉学部，上海 200433

国际麻醉学与复苏杂志,2022,43(05):465-470.

DOI：10.3760/cma.j.cn321761-20211119‑00539

 基金项目 

上海市青年科技启明星计划（19QA1408500）

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【论著】

本研究旨在探究丹酚酸B能否改善小鼠急性肺损伤（ALI）程度和潜在作用机制。 

 1 材料与方法     

采用随机数字表法将18只健康成年雄性C57BL/6小鼠分为3组（每组6只）：假手术组（Sham组）、脂多糖（LPS）组、LPS+丹酚酸B组（LPS+SAB组）。予LPS组和LPS+SAB组小鼠气管内注射10 mg/kg LPS，Sham组气管内注射等体积PBS；经过上述处理，LPS+SAB组即刻经尾静脉注射50 mg/kg丹酚酸B，Sham组和LPS组经尾静脉注射等体积PBS。

12 h后通过H‑E染色观察肺组织病理改变，使用BCA法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白浓度，ELISA法检测BALF中TNF‑α、IL‑6和IL‑1β浓度，Western blot法检测肺组织丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）和NF‑κB信号通路中p38、c‑Jun氨基端激酶（JNK）、胞外信号调节激酶（ERK）、p65蛋白及其磷酸化蛋白水平，使用丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒分别检测肺组织中MDA和SOD含量。 

2 结 果      

2.1　3组小鼠肺组织病理学变化比较

Sham组小鼠肺外观为粉红色，肺间质无明显病理改变；LPS组小鼠肺间质充血水肿、表面见瘀斑，镜下见较多炎细胞浸润；与LPS组比较，LPS+SAB组小鼠肺间质水肿减轻，肺组织病理损伤缓解。LPS组和LPS+SAB组小鼠肺损伤评分高于Sham组（P<0.05），LPS+SAB组小鼠肺损伤评分低于LPS组（P<0.05）。见图1。

2.2　3组小鼠BALF中总蛋白及TNF‑α、IL‑6、IL‑1β浓度比较

与Sham组比较，LPS组和LPS+SAB组小鼠BALF中总蛋白浓度及TNF‑α、IL‑6、IL‑1β浓度升高（P<0.05）；LPS+SAB组小鼠BALF中总蛋白浓度及TNF‑α、IL‑6、IL‑1β浓度低于LPS组（P<0.05）。见图2。

2.3　3组小鼠肺组织p‑p38/p38、p‑JNK/JNK、p‑ERK/ERK及p‑p65/p65比较

与Sham组比较，LPS组和LPS+SAB组小鼠肺组织中p‑p38/p38、p‑JNK/JNK、p‑ERK/ERK及p‑p65/p65上调（P<0.05）。LPS+SAB组小鼠肺组织p‑p38/p38、p‑JNK/JNK、p‑ERK/ERK及p‑p65/p65低于LPS组（P<0.05）。见图3。

2.4　3组小鼠肺组织中MDA和SOD含量比较

与Sham组比较，LPS组和LPS+SAB组小鼠肺组织中MDA含量升高，SOD含量降低（P<0.05）；LPS+SAB组小鼠肺组织中MDA含量低于LPS组，SOD含量高于LPS组（P<0.05）。见图4。

3 讨 论     

本研究结果发现，丹酚酸B能够减轻肺部炎症并缓解LPS导致的小鼠肺损伤。

在本研究中，丹酚酸B使p‑p38/p38、p‑JNK/JNK、p‑ERK/ERK及p‑p65/p65降低，表明丹酚酸B可以抑制p38、JNK、ERK和p65这些MAPK和NF‑κB信号通路蛋白的磷酸化，从而减轻肺组织损伤水平。

本研究结果显示，丹酚酸B可降低ALI组织中MDA水平并提高抗氧化指标SOD含量。该结果与既往Tang和Zhang研究结果一致，均表明丹酚酸B能够通过抗氧化应激作用减轻组织的损伤程度。

前期预实验结果显示，50 mg/kg丹酚酸B可有效降低小鼠肺组织中IL‑6浓度，故本研究中选用50 mg/kg丹酚酸B进行干预，且50 mg/kg丹酚酸B在此前探究大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的研究中表现出明显的脑组织保护作用。尽管研究中丹酚酸B可缓解小鼠ALI，但研究未对丹酚酸B的给药时间和剂量进行深入探究，无法为丹酚酸B缓解ALI是否存在剂量依赖、最佳治疗剂量和给药时机以及安全剂量提供线索，也是本研究的一大局限。

综上所述，丹酚酸B可减轻LPS引起的小鼠ALI严重程度，其作用机制可能是通过抑制炎症信号通路MAPK和NF‑κB的激活以及抗组织氧化应激来发挥器官保护作用。本研究初步探究了中药单体丹酚酸B在ALI中的作用，或可为中药在临床治疗ALI的应用提供新的方案和理论基础。