结石研究（18）：草酸钙肾结石形成中的巨噬细胞功能：文献系统评价

草酸钙肾结石形成中的巨噬细胞功能：文献系统评价

背景        

肾结石在全球患病率和复发率均非常高。最近对体内和体外（包括基因操作）兰德尔斑块和尿液成分的研究试图揭示肾结石的发病机制。然而，证据仍然不足以促进新型治愈性疗法的开发。肾脏和外周巨噬细胞参与炎症过程提供了可能导致治疗靶点发展的希望。本系统文献综述旨在确定目前关于巨噬细胞在肾晶体发育和抑制中的功能的共识，并综合证据为未来的免疫治疗提供基础。 方法    我们在 2021 年 2 月期间根据系统评价和元分析的首选报告项目 (PRISMA) 指南系统地审查了文献。 从 PubMed、MEDLINE、Embase 和 Scopus 中提取了研究巨噬细胞与尿石症之间关系的文章，特别是草酸钙 (CaOx) 结石。 研究主题、语言和出版日期不受限制。 两位作者对出版物进行了检索和筛选。 

结果    

尽管有几项研究采用了混合模式，但我们在 380 篇分别描述培养细胞、动物模型和人体样本的文章中选择了 10 篇、12 篇和 7 篇（总共 n = 29）。 自 1999 年发现巨噬细胞参与肾结石以来，研究趋势已转向巨噬细胞表型和信号通路，包括微 (m)-RNA。 早期研究小鼠相关巨噬细胞加速和抑制肾晶体形成。 后来的研究发现，促炎 M1 和抗炎 M2 巨噬细胞参与其中。 对人源性和其他巨噬细胞 的体外 和 离体 研究表明，M2 巨噬细胞（由 CSF-1、IL-4 和 IL-13 刺激）可以吞噬 CaOx 晶体，从而抑制结石的发育。 促进 M2 样巨噬细胞极化向 CaOx 肾钙质沉着的信号传导机制包括 NLRP3、PPARγ-miR-23-Irf1/Pknox1、miR-93-TLR4/IRF1 和 miR-185-5p/CSF1 通路。 蛋白质组学研究表明，形成肾结石的患者主要表达 M1 样巨噬细胞相关蛋白，这可能是由于 CaOx 刺激巨噬细胞外泌体途径所致。 结论       该系统评价提供了有关巨噬细胞参与 CaOx 肾结石的现状的最新信息。 靶向 M2 样巨噬细胞功能可能提供一种治疗策略， 通过 晶体吞噬作用来预防结石。 

关键词：尿石症，肾钙质沉着症，草酸钙（CaOx），兰德尔斑块，巨噬细胞，M1-巨噬细胞，M2-巨噬细胞，单核细胞 介绍        肾结石的患病率在全球范围内呈上升趋势，其高复发率也是影响医疗和经济资源的一个因素（ 1-4 ）。尽管最近的技术创新，肾结石形成的病理学是复杂的，并且有待阐明。肾结石被认为是一种类似于代谢综合征 (MetS) 的多因素疾病 ( 5 , 6 )。肾功能、矿物质和脂质代谢、炎症过程、氧化应激和胰岛素抵抗可导致草酸钙 (CaOx) 晶体形成 ( 7 )。        

大多数肾结石由草酸钙 (CaOx) ( 8 , 9 ) 组成。为解释 CaOx 结石的发病机制而提出的假设是自由和固定粒子机制 ( 10 )；后者也被称为 Randall 斑块 (RP)，它包含由磷酸钙形成的磷灰石，在 Henle 环周围的间隙空间中生长 ( 11 )。与在管腔或肾集合系统内形成的结石相比，RP 的晶体前体被其他分子和细胞结构包围，这可能受到体内平衡受损的影响 ( 12 , 13）。在这些成岩环境中，化学和矿物质成分超载或其他炎症刺激源可能作为第一个触发因素，随后是活性氧 (ROS)，随后诱导肾上皮细胞损伤，导致 CaOx 晶体沉积 ( 14 )。针对这种细胞损伤的主要防御机制是涉及内吞作用的自噬 ( 15 )，而次要防御机制延伸到间质空间中的管周细胞和循环中的免疫细胞 ( 16 )。清除肾组织中晶体沉积物的先天防御系统是找到开发肾结石新疗法的根本解决方案的关键。        

了解巨噬细胞 (Mφ) 在肾晶体形成中的作用有助于确定解决方案。de Water 等人首先报道了肾脏或外周 Mφ 参与肾结石疾病。1999 年（17）。他们发现Mφs迁移到晶体沉积位置并吞没晶体。鉴于 M1 促炎和 M2 抗炎（18）极化，Mφ 参与肾晶体形成可能以不同的方式多样化。由于 M2 类 Mφs 吞噬晶体的能力大于 M1 样 Mφs ( 19 )，因此调节它们的极化可能具有治疗价值 ( 20 )。在过去的二十年里，关于 Mφ 预防肾结石发展的临床应用已有很多报道（21）。        

本系统综述旨在为 Mφ 在肾晶体发育和抑制中的功能提供集体证据，并为 Mφ 研究在 Mφ 免疫治疗的临床应用中的未来方向提供思路。 材料和方法 本系统文献综述是根据系统评价和元分析的首选报告项目 (PRISMA) 指南 ( 22 ) 进行的。 搜索策略  我们使用 MeSH 关键词“巨噬细胞”或“巨噬细胞”、或“单核细胞”、“尿石症”、或“草酸钙”或“肾结石”搜索了 PubMed、MEDLINE、Embase 和 Scopus 数据库。 文章类型、出版日期、语言或物种在初始搜索期间不受限制。 

资格标准    

重点关注 Mφ 和单核细胞功能与尿石症发病机制之间的关系的文章被纳入。 描述由 Mφs 和单核细胞分泌的炎性细胞因子/趋化因子的发现的文章被排除在外，因为与 Mφs 和/或单核细胞的直接联系是有限的。 由于我们专注于实验和转化结果，原创文章比评论或评论文章更受青睐，评论或评论文章引用和/或总结了其他人发表的发现。 数据收集和描述    两位作者（KT 和 RU）独立审查了 2021 年 2 月 8日 在初始检索中确定的文章的标题和摘要。 数据是从符合资格标准的文章中提取的，并在初级和二级筛选期间在全文文章中重新评估， 分别。 包括最近的重复发表的文章。 通过与其他作者的讨论和共识，解决了两个筛选之间的分歧和差异。 从所有符合条件的全文文章中提取以下数据： 第一作者、期刊名称、出版年份、研究类型、方法、实验来源类型以及有关 Mφ/单核细胞功能的主要发现。 根据最新的命名法、实验指南 ( 18 ) 和有关器官特异性发现的评论 ( 20 , 23 , 24 ) 报告了 Mφ 表型。 结果        我们在最初的文献搜索中确定了 380 篇符合所有数据库搜索策略和标准的文章。在标题和摘要的第一个屏幕之后，全文的第二个屏幕将它们过滤成 29 篇符合审查条件的文章。图1显示 PRISMA 流程图。 图1 根据 PRISMA 指南进行系统文献综述的方法流程图。 

表格1总结了 29 篇文章的发现，这些文章描述了 1999 年至 2020 年间在中国、德国、日本、荷兰、泰国和美国发表的各种研究。这些文章主要描述了转化研究，包括高草酸尿症引起的大鼠和小鼠肾钙质沉着模型体外的体内、鼠、犬和人肾小管上皮细胞系，以及体外人肾乳头、外周血和尿液样本。*第一行根据 2014 年公布的命名法（Murray 等人免疫）描述了巨噬细胞（非极化/M1 样/M2 样）的体外和离体特征。第 2行和第 3行分别描述了文献中用于 M1 和 M2 样检测的标记。       

细胞系和动物：3T3/L1，鼠脂肪细胞；Cdh16-ARKO，肾小管特异性雄激素受体敲除；HEK-293，人胚肾细胞；HK-2，人近端小管上皮细胞；I9.1，鼠巨噬细胞；J774.1，鼠巨噬细胞；Jurkat，人类 T 淋巴细胞；M-1，鼠集合管；MDCK，犬肾小管上皮细胞；RAW264.7，鼠巨噬细胞；SD 大鼠、Sprague Dawley 大鼠；THP-1，人单核细胞；U937，人单核细胞。 AC、氯化铵；AR，雄激素受体；Arg1，精氨酸酶 1；ASC，凋亡相关斑点样蛋白；BMDM，骨髓来源的巨噬细胞；Ccl，CC基序趋化因子配体；Ccr，CC趋化因子受体；Chi3l3，几丁质酶3样3；COM，草酸钙一水合物；CSF-1，集落刺激因子-1；EG、乙二醇；FOXO1，叉头箱O1；GM-CSF，颗粒巨噬细胞集落刺激因子-1；HFD，高脂肪饮食；HLP，羟基-L-脯氨酸；HSP，热休克蛋白；IAI，腹腔内注射；干扰素，干扰素；Irf，干扰素调节因子；Mφ，巨噬细胞；MAPK，丝裂原活化蛋白激酶；MCP-1，单核细胞趋化蛋白-1；MetS，代谢综合征；MIP1β，巨噬细胞炎症蛋白-1β；NA，不适用；Nos1，一氧化氮合酶 1；Nfkb，活化 B 细胞的核因子 kappa-轻链增强剂；NLRP3, 核苷酸结合寡聚化结构域，富含亮氨酸的重复和含有 3 的 pyrin 结构域；OPN，骨桥蛋白；PET-CT，正电子发射断层扫描-计算机断层扫描；PPARγ，过氧化物酶体增殖物激活受体-γ；Retnla，抵抗素样分子α；ROS，活性氧；RP，兰德尔牌匾；RTEC，肾小管上皮细胞；SIRT3，sirtuin 3；TNFα，肿瘤坏死因子α。 体外和离体人单核细胞对肾结石形成剂中草酸钙晶体的作用         Thongboonkerd 等人。是第一个报道人类单核细胞和CaOx一水合物（COM）晶体之间的蛋白质组学相互作用的人。研究人员发现，COM 可以驱动氧化应激，导致细胞凋亡和抑制素、纤溶酶原激活物抑制剂 2、Alix、核纤层蛋白 A/C 和 moesin 的表达增加，并降低细胞存活率、蛋白质合成和稳定性、mRNA 稳定性, 和脂质代谢。此外，La 蛋白、异质核核糖核蛋白 H1、延伸因子 2、otubain-1、热休克蛋白 (HSP) 105 和酰基辅酶 A 硫酯水解酶的水平降低（25）。还研究了与 COM 在肾小管上皮细胞 (RTEC) 中诱发的单核细胞功能相关的蛋白质组学。研究人员在与 COM 晶体一起孵育的 Mardin-Darby 犬肾 (MDCK) 细胞中发现了六种表达水平显着改变的分泌蛋白。此外，他们报道了 enolase-1，一种 COM 晶体结合蛋白，通过与单核细胞表面结合来激活单核细胞迁移 ( 26 )。     威廉姆斯等人进一步研究了人血清样本中的单核细胞线粒体功能，并报告与健康对照组相比，CaOx 结石患者的单核细胞线粒体最大呼吸、储备能力和生物能量健康指数显着降低 ( 27 )。 

体外M (–)（非极化巨噬细胞）吞噬作用和草酸钙晶体反应       

共聚焦激光扫描显微镜显示，与巨噬细胞集落刺激因子 (M-CSF) 共孵育的 I9.1 Mφs（源自小鼠脾细胞）溶解了内化的 CaOx 晶体 ( 28 )。冈田等人。通过使用 Lysotracker、透射电子显微镜 (TEM) 和共焦光学显微镜研究小鼠 J774.1 Mφ 细胞系，进一步研究了 Mφs 的晶体溶解。作者证实了 Mφs 中吞噬的 COM 晶体的历时消除（图 2）。内化的 COM 晶体被吞噬体包围，吞噬体与溶酶体融合以促进溶解和自发消除 ( 29 )。Mφ 函数也已在 RTEC 中进行了研究。与鼠 Mφs 一起孵育的 M-1（鼠集合管）和 RAW264.7 细胞发展为具有增加的 COM 晶体粘附的促炎状态，尤其是当这些细胞与脂肪细胞共培养时。这种旁分泌机制与 OPN、MCP-1 和肿瘤坏死因子 (TNF)-α 的 mRNA 和蛋白质水平升高有关 ( 30 )。 

图 2 草酸钙晶体被巨噬细胞吞噬。(A)代表性照片显示用一水草酸钙晶体培养的巨噬细胞 (RAW264.8) 的荧光免疫组织化学染色。红色，鬼笔环肽；绿色：一水草酸钙晶体；蓝色，核心。放大倍率：×400。(B)吞噬草酸钙一水合物晶体的巨噬细胞 (RAW264.8) 的透射电子显微镜图像。比例尺，左右面板，分别为 5 和 10 μm。       

先前对来自与 COM 晶体体外培养的人单核细胞的 Mφs 的研究确定了 HSP90 和 F-肌动蛋白在吞噬 COM 晶体的吞噬体膜上的关联。用 siRNA 阻断 HSP90 会降低吞噬活性和 Mφ 迁移，这表明 HSP90 和 F-肌动蛋白在 CaOx 相互作用期间参与 Mφ 功能 ( 31 )。Mφs 分泌的外泌体也受到 COM 晶体的影响。特别是，COM 处理的 Mφ 外泌体增加了膜的脆性，并能够进入肾间质并触发 RTEC 释放 IL-8，从而加剧组织炎症（32）。因此，COM 处理的 Mφ 外泌体增强了单核细胞和 T 细胞迁移、单核细胞活化和 Mφ 吞噬作用。然而，用 siRNA 抑制波形蛋白消除了这些影响，这表明 Mφ 外泌体波形蛋白在对 COM 晶体的免疫反应中起重要作用 ( 33 )。 

体内巨噬细胞参与草酸钙肾钙质沉着症     

虽然由于人类肾结石形成和啮齿动物肾钙质沉着之间的差异，将研究结果应用于人类患者存在局限性，但基于管内晶体形成和保留的相似性，高草酸尿大鼠和小鼠的 CaOx 肾钙质沉着模型被广泛用于研究( 34 )。1999 年在高草酸大鼠模型和草酸中毒患者的双肾中描述了 Mφs 和包裹间质 CaOx 晶体的多核巨细胞（17）。作者进一步证实，在大鼠高草酸尿症的时间过程中，与 CD45 和主要组织相容性复合物 (MHC) II 类阳性和其他单核细胞相比，外胚层发育不良 1 (ED1) 阳性 Mφs 主要在肾晶体沉积部位周围增加 ( 35 ) . 这些早期研究表明，Mφ 溶解 CaOx 晶体，这可能与肾脏防御结石发育有关。冈田等人。在乙醛酸盐诱导的肾钙质沉着症小鼠模型中发现自发消除肾 CaOx 晶体沉积 ( 36)，并且随后的转录组研究将单核细胞/巨噬细胞的激活与这种现象相关联，涉及趋化因子（CC 基序）配体 6、波形蛋白、Cd14、细胞色素 P450 家族 1 亚家族 b 多肽 1、moesin、载脂蛋白 E、组织相容性 2 II 类抗原 A α、组织相容性 2 II 类抗原 A β 1 和脂多糖 (LPS) 诱导的肿瘤坏死因子。免疫组化结果也证实了 F4/80 阳性的 Mφs 可视为晶体沉积峰（37）。单核细胞趋化蛋白 (MCP)-1、骨桥蛋白 (OPN)、纤连蛋白、分化簇 (CD)44 和主要组织相容性复合物 (MHC) II 类的表达与肾晶体沉积量和 F4/ 80 正 Mφs。TEM 还揭示了肾 Mφ 对晶体的吞噬作用 ( 38 )。 

对草酸钙晶体的体外和离体极化巨噬细胞功能        

使用鼠骨髓来源的 Mφs 检查 M1 和 M2Mφs 在 CaOx 晶体中的作用表明，M(IL-4) 比 M(LPS) 具有更强的吞噬 COM 晶体的能力 ( 39 )。此外，与 M(LPS+IFNγ) 相比，M(IL-4+IL-13) 抑制 COM 晶体对 M-1 鼠集合管细胞的粘附，并且具有更高的 COM 吞噬细胞率 ( 19 )。    于等人 使用人 RTEC、HK-2 细胞和从人单核细胞系 U937 分化的 M(LPS)检查了 Mφ 在 体外 RP 形成中的作用。 他们发现，与羟基磷灰石共同培养的 M(LPS) 和 HK-2 细胞可增加氧化应激、MCP-1 和 OPN 表达，并降低胎球蛋白-A ( 40）。 同一组评估了M2Mφ在HK-2细胞CaOx晶体诱导的氧化应激损伤和细胞凋亡中的作用，发现M(IL-4+IL-13)从人单核细胞THP-1细胞系分化而来。 与夹竹桃麻素类似，M(IL-4+IL-13) 降低 NADPH 氧化酶 p47phox 蛋白的表达，增加线粒体膜电位，并抑制 cleaved caspase-3、细胞色素 c 和磷光体 p38 MAPK 的蛋白表达，以及随着与 CaOx 晶体一起孵育的 HK-2 细胞中的 ROS 释放 ( 41 )。 这些结果表明M1和M2Mφs在CaOx结石发育过程中RTEC的氧化应激损伤和细胞凋亡中的作用相反。        源自人类外周血单个核细胞的 M(CSF-1) 比 M(GM-CSF) 具有更强的吞噬 CaOx 晶体和天然肾结石的能力。抑制剂测定表明，肾结石清除是通过网格蛋白依赖性吞噬作用和内吞作用介导的 ( 42 )。多明格斯-古铁雷斯等人。据报道，CaOx 而非钾或 ZnOx 诱导人单核细胞系和表达 CD86 和 CD68 的原代人单核细胞的 M1 样 Mφ 分化，并分泌细胞因子和趋化因子。此外，CaOx 处理的单核细胞的上清液可以增强 M2Mφ CaOx 晶体的吞噬作用 ( 43 )。 

肾CaOx晶体发育中的体内极化巨噬细胞功能       

几项研究评估了肾结石形成中的 Mφ 极化。与高草酸尿症肾钙质沉着症小鼠模型一致，与野生型相比，CSF-1 缺陷型小鼠的肾和尿晶体沉积更多，M2 样 Mφs（确定为 CD11b + F4/80 + CD163 + CD206 hi细胞）较少。型小鼠（39）。相比之下，在用乙二醇（ EG _ _），并以高脂肪饮食喂养（44）。对 M1 和 M2Mφ 在结石发育中作用的进一步研究表明，在每天腹内注射乙醛酸盐的 C57BL/6J 野生型小鼠中，M1 和 M2 样 Mφs 的诱导/输注分别加速和减弱肾晶体发育( 19 )。安德斯等人。研究了核苷酸结合寡聚化结构域、富含亮氨酸的重复序列和含有 pyrin 结构域的 3 (NLRP3) 在高草酸盐饮食下 Nlrp3 缺陷小鼠 CaOx 肾钙质沉着形成中的作用，NLRP3 是晶体病中炎症的中心分子介质. 他们发现 NLRP3 抑制诱导浸润性肾 Mφs 从 M1 样（CD45 + F4/80 + CD11b + CX3CR1 + CD206- ) M2 样 (CD45 + F4/80 + CD11b + CX3CR1 + CD206 + TGFβ - ) 表型和肾纤维化减弱。因此，NLRP3 似乎通过促进从抗炎 M1 转变为促炎和促纤维化 M2 样 Mφs 来促进肾钙质沉着症相关的纤维化肾病（45）。 

巨噬细胞在人体组织中的作用和极化    

人类肾脏的微阵列分析显示 M2 样 Mφ 相关基因、过氧化物酶体增殖物激活受体 γ (PPARγ)、CD163 和 CD206 的表达降低，以及 M1 样 Mφ 相关基因（包括一氧化氮合酶 2）的表达增加、CSF2、IL10 和 2 型 CC 趋化因子受体，在 CaOx 结石患者的肾乳头组织中与未形成结石的患者相比 ( 19 )。因果网络分析的结果将 RP 乳头状组织中差异表达的基因与显着更高的免疫细胞活性相关联，包括 Mφs 和浆细胞，它们与 IL11、PG-内过氧化物合酶 1、谷胱甘肽过氧化物酶 3 和单核细胞转 Mφ 相关RP 的分化高于正常的乳头状组织 ( 46）。还研究了结石形成青少年的尿 Mφ 相关细胞因子。在一项研究中，尿 IL-13/肌酐和 Mφ 炎症蛋白-1β (MIP-1β)/肌酐水平可作为结石的有用生物标志物，其敏感性分别为 50% 和 58%，特异性为 93%。一个小样本（47）。对未形成结石的个体、首次形成 CaOx 结石的个体以及形成复发性 CaOx 结石的个体进行尿液多重比较，确定了 IL-1a、IL-1b、IL-4、IL-10 和 GM-CSF作为影响结石发育中 Mφ 和中性粒细胞功能的潜在生物标志物（48）。此外，与未形成 CaOx 结石的患者相比，M1 样 Mφ 极化增加了促炎细胞因子，例如 TNFα、IL-1β 和 IL-1，以及来自 CaOx 结石患者的血液样本中的 M1/M2 样单核细胞比率石头（49）。 改变巨噬细胞表型对抗肾结石病的治疗靶点     Sirtuin 3 (SIRT3) 是线粒体基质中的一种 NAD +依赖性脱乙酰酶，通过将叉头盒 O1 (FOXO1) 脱乙酰化促进 M2 样 Mφs，从而在体外和体内抑制肾 CaOx 晶体沉积( 49 )。肾结石的患病率受性激素影响 ( 47 )。在体外抑制 RTEC 中的雄激素受体 (AR) 表达会增加 Mφ 募集并导致 M2 极化转变，从而增加肾内 CaOx 晶体的吞噬作用 ( 47 )。体内给予肾小管特异性 AR 基因敲除小鼠和羟基-L-脯氨酸处理的大鼠与 AR 降解增强剂研究表明，AR 信号通过上调 miR-185-5p 抑制 CSF-1 表达，从而导致 M2 样 Mφs 降低并加速 CaOx 晶体发育 ( 50 )。PPARγ 激动剂吡格列酮治疗肾结石的潜力已得到认可 ( 51 , 52 )。吡格列酮增加 M2 样 Mφ 极化并减少肾 CaOx 晶体沉积和炎症损伤，以及体外小鼠骨髓来源的 Mφ和体内CaOx 肾钙质沉着症小鼠模型. 这些结果表明，PPARγ 上调 miR-23 表达，随后减弱干扰素调节因子 1 (Irf1) 和 Pknox1 的表达，从而将 Mφ 表型从 M1 转变为 M2 ( 53 )。已经研究了核因子红系 2 相关因子 2 (Nrf2) 对 CaOx 结石患者 PPARγ 和抗炎过程的影响。研究结果表明，Nrf2在体外通过抑制 toll 样受体 4 (TLR4) 和 IRF 来减弱 M1 样 Mφ 极化转变。此外，萝卜硫素是 Nrf2 的激活剂，通过Nrf2-miR-93-TLR4/IRF1 轴对 CaOx 晶体形成和肾损伤发挥保护作用，促进 M2 样 Mφ 极化并抑制体内RTEC 炎症在 CaOx 肾钙质沉着症的小鼠模型中 ( 54 )。已经研究了芳烃受体 (AhR) 作为 M1 和 M2 样 Mφs 之间的表型平衡调节剂在肾 CaOx 结石发育中的作用 ( 55 )。对骨髓来源的 Mφs 和 CaOx 肾钙质沉着症小鼠模型的转录组学和蛋白质组学分析表明，刺激 AhR-miR-142a-IRF1/缺氧诱导因子 (HIF)-1α 轴可减少 M1 样 Mφs 并促进 M2 样 Mφs ，导致肾 CaOx 晶体沉积和结石相关肾损伤的抑制 ( 55 )。 限制 该系统评价有几个局限性。首先，我们发现的大多数文章都使用了 M1/M2Mφ 定义，这与肾脏病学和泌尿学领域的现有文献一致；因此，在某些情况下，很难根据最新的术语来概括它们。其次，由于肾小管内晶体沉积和 CaOx 结石形成之间的病理差异，肾钙质沉着症小鼠模型的研究结果可能不适用于肾结石患者。最后，只有少数研究评估了 CaOx 结石/晶体与人体组织中 Mφs 之间的直接关系；因此，需要进行额外的活组织研究。 结论 已在体外、体内和离体人体标本中研究了 Mφs 在 CaOx 肾结石发展中的作用。体外和离体研究表明，单核细胞和 M(-)（非极化 Mφs）具有通过吞噬作用消除 CaOx 晶体的能力。用 COM 晶体处理 RTECs通过细胞因子、趋化因子和外泌体刺激 Mφ 迁移。体内研究表明，M1 样 Mφs 促进肾脏 CaOx 晶体发育，伴有肾脏炎症、纤维化和细胞损伤，而 M2 样 Mφs 抑制 CaOx 晶体发育。M2-like Mφs，如 M(CSF-1)、M(IL-4) 和 M(IL-4+IL-13)，具有更强的吞噬 CaOx 晶体的能力，最终溶解晶体碎片，自分泌和旁分泌机制与 RTEC 一起增强 Mφ 吞噬作用（图 3）。此外，虽然只有少数研究调查了人体组织中的 Mφ 极化，但肾结石形成者的尿液、血清和肾组织中可能存在主要的 M1 样 Mφ 细胞因子/趋化因子表型。

  图 3从当前文献中合成的关于 M1 和 M2 巨噬细胞在 CaOx 结石发育中的作用的证据架构。M1 或 M2Mφs 通常通过CaOx 晶体的直接和间接影响通过各种细胞因子/趋化因子与单核细胞和 M0（具有中性极化）Mφs 区分开来。M0 Mφs 自分泌机制通过AhR-miR-142a-IRF1/HIF-1α、PPARγ-miR-23a-IRF1/PKNOX1、Nrf2-miR-93-IRF/TLR4 和 SIRT3-FOXO1 轴将表型转变为 CaOx 晶体发育。单核细胞通过enolase-1 和波形蛋白反映单核细胞/Mφs 和肾小管上皮细胞分泌的外泌体，然后被激活并变成 M1 或 M2Mφs。相反，肾小管上皮细胞的旁分泌受累通过NLRP3和AR-miR-185-5p-CSF-1也是调节Mφ极化的重要因素。M1Mφs 通过促进 iNOS、IL-6、IL-10 和 TGF-β 等促炎和氧化应激分子促进 CaOx 结石的发育，而 M2Mφs 则减弱 CaOx 晶体的发育，并通过吞噬作用消除它们。溶酶体和网格蛋白介导，并诱导包括 Arginase-1、Ym-1 和 PPARγ 在内的抗炎分子。AhR，芳烃受体；AR，雄激素受体；CSF-1，集落刺激因子-1；FOXO1，叉头箱O1；GM-CSF，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子；HIF-1α，缺氧诱导因子 1 α；iNOS，诱导型一氧化氮合酶；IRF1，干扰素调节因子 1；LPS，脂多糖；Mφ，巨噬细胞；M-CSF，巨噬细胞集落刺激因子；NLRP3、核苷酸结合寡聚化结构域、富含亮氨酸的重复序列和含有 3 个的 pyrin 结构域；PPARγ，过氧化物酶体增殖物激活受体-γ；SIRT3，Sirtuin 3；TLR4，toll 样受体 4。     

研究重点已从识别 Mφ 表达转移到分析 Mφ 功能并寻找改变 Mφ 表型以创建新治疗靶点的触发因素。然而，关于尿沉渣中 Mφs 的证据很少，需要确定直接操纵 Mφ 表型以供临床使用 ( 56 )。未来的研究应努力建立用于液体活检的尿液生物标志物 ( 57 )，以及使用抗体、载体和纳米粒子 ( 58 , 59 )的 Mφ 特异性靶向治疗。