启函生物首次公布NK细胞疗法临床前数据，抗血液瘤和实体瘤效果出色

撰文 | 王聪

编辑 | 王多鱼 排版 | 水成文

       2022年4月9日，启函生物在美国癌症研究协会（AACR） 2022 年会上公布了 NK 细胞项目的临床前数据。AACR 是全球规模最大的癌症研究会议（之一），聚集了来自全球各地高质量的肿瘤学研究和临床进展。

       启函自主研发的自然杀伤细胞（NK Cells）来源于通过基因编辑的诱导多能干细胞（iPSCs），具有成为下一代异体细胞治疗产品的巨大潜力。

       启函生物创始人兼首席执行官杨璐菡表示，很高兴能在这里分享这些数据，也相信启函的技术平台可以推进细胞治疗药物在临床上的应用。我们在学术海报（Poster）中提供的数据呈现了 “Super NK”细胞，经过基因工程处理后的 NK 细胞在功能性上明显增强，对血液瘤和实体瘤具有显著的杀伤能力。此外，我们还在非人类灵长类动物模型中展示了启函的免疫兼容细胞治疗平台，我们建立的猴子 iPSC 库包含多达 21 种基因修饰，可以降低同种异体免疫排斥。因此我们成功地将它们分化为功能性猴 NK 细胞。这些都为我们提供了研究 NK 药代动力学（PK）和药效学（PD）的独特转化机会。

标题：Functional natural killer cells derived from engineered hiPSC with hypoimmunity gene combo demonstrate hypoimmunity features in evadinghost attacks（具有低免疫基因组合的工程化 hiPSC 来源的功能性自然杀伤细胞在逃避宿主攻击中表现出低免疫特征）

摘要 ：工程化

       人诱导多能干细胞 （hiPSC） 来源的同种异体自然杀伤 （NK） 细胞正在成为有前途的安全有效的现货型细胞治疗药物。与 CAR-T 细胞相比，NK 细胞的重复给药可以部分补偿 NK 细胞相对较短的持久性；然而，随着重复给药，宿主先天免疫和适应性免疫的激活对持久性和有效性的挑战越来越大。因此，降低同种异体 NK 细胞的免疫原性，有望带来更好的疗效。在这项研究中，启函报告了“低免疫”基因编辑的组合，包括多个基因敲入以及 MHC I 和 MHC II 的敲除 （2KO） 。通过低免疫组合工程改造的 hiPSC 可以有效地分化为 NK 细胞，效率与非工程改造的细胞相当。这与小鼠研究中的概念相反，即缺乏 MHC I 的 NK 细胞是低反应性的，这些工程化 NK 细胞可以通过 aAPC （人工抗原呈递细胞，一种表面表达 mbIL-21 和 CD137L 的 K562 细胞系） 进行扩增，并且能够杀死肿瘤细胞，此外，通过体外 T 细胞增殖和细胞毒性试验检测表明，工程化 NK 细胞可以逃避 T 细胞免疫。移植了 CD34 阳性人类造血干细胞的人源化小鼠模型证实，工程化 NK 细胞可以比野生型 NK 细胞和 2KO NK 细胞持续更长时间。 Hypoimmune-QN-019 NK 细胞 是通过将低免疫基因组合编辑整合到 hiPSC 来源的 NK 细胞临床候选者 QN-019 中产生的，QN-019 具有 3 个转基因，包括 膜结合型 IL-15 、 高亲和力抗切割 CD16 和 靶向 CD19 的 CAR 。与 QN-019 相比，hypoimmune-QN-019 NK 细胞在人源化 CDX 小鼠模型中显示出更好地清除 CD19 阳性癌细胞的效果。总的来说， 启函设计了具有低免疫特性的 hiPSC 来源的同种异体 NK 细胞，有望成为一种现货型细胞治疗药物，具有更强的体内持久性和重复给药的效果。 

原文链接 ： https://www.abstractsonline.com/pp8/#!/10517/presentation/17990  

标题 ： "Super NK cells" - natural killer cells derived from engineered hiPSC withenhanced NK receptor expression demonstrate excellent anti-tumor effects forsolid tumors （“Super NK 细胞”——工程化 hiPSC 来源的自然杀伤细胞，NK 受体表达增强，抗实体瘤效果出色） 

摘要 ：表达嵌合抗原受体 （CAR） 的 CAR-T 细胞在治疗血液系统恶性肿瘤方面获得临床成功，但它们在实体瘤中的疗效有限，这主要是由于肿瘤异质性和免疫抑制性肿瘤微环境。源自人诱导多能干细胞 （hiPSC） 的自然杀伤 （NK） 细胞具有成为下一代细胞疗法的巨大潜力，因为它们具有既定的安全性和独特的生物活性，尤其是其靶向实体瘤的潜在有效性。与 T 细胞相比，NK 细胞无需通过 MHC 复合物识别抗原即可发挥抗肿瘤活性；相反，它们是通过连接多个激活和抑制受体的信号来激活的。由于各种实体瘤高度表达 NK 细胞的激活配体，因此，增强 NK 细胞上激活受体的表达有望提高其对实体瘤的杀伤活性。启函的“ Super NK 细胞 ”，其 NK 细胞受体 （如来自工程化 hiPSC 的 NKG2D 和 NCR） 的表达高出 10 倍以上,与非工程化 NK 细胞相比，其对实体瘤的细胞毒性更高。“Super NK细胞”可在体外对 K562 和 THP-1 细胞株进行十余轮连续杀伤。更重要的是，“Super NK细胞”在体外系统和体内异种移植小鼠模型中均显示出对多种实体瘤的更强的细胞毒性。总的来说， 启函设计了可以分化为“Super NK 细胞”的 hiPSC，作为一种潜在的细胞治疗产品，以提高对实体瘤的疗效。  

原文链接 ： https://www.abstractsonline.com/pp8/#!/10517/presentation/14669 

启函生物 于2017年成立于中国杭州，是一家将高通量基因编辑技术应用于细胞治疗和器官移植领域的生物科技公司。成立以来，启函生物累计融资金额超1亿美元，目前正处于同种异体细胞治疗的IND前期准备阶段。 启函生物希望利用其高通量的基因编辑技术平台和对免疫移植知识的深刻理解开发免疫兼容的同种细胞治疗和异种器官治疗，为世界上千千万万的病人及家属带来希望。

2013年2月，杨璐菡博士作为共同第一作者，在 Science 期刊发表了题为RNA-Guided Human Genome Engineering via Cas9 的研究论文，这篇论文与张锋团队的CRISPR-Cas9论文同一天上线。这两篇论文首次将CRISPR基因编辑成功应用于哺乳动物和人类细胞，也标志着CRISPR基因编辑时代的正式到来。

       两年后，杨璐菡博士与她的哈佛导师 George Church 教授共同创立了美国公司 eGenesis，成为了美国异种移植的一支生力军。 2017年，第一只基因编辑猪在eGenesis诞生。在担任eGenesis首席科学官的时候，杨璐菡团队已完成用CRISPR技术编辑猪细胞，完全去除了可传播给人体的猪内源性逆转录病毒 （PER V） 。

       同一年，杨璐菡回到国内，在杭州创办了杭州启函生物科技有限公司。2019年，启函生物和eGenesis的团队共同创造了基因编辑猪3.0，科学家将CRISPR-Cas9和转座子技术结合在一起，培育出了一种特别的猪，根除了猪内源性逆转录病毒 （PERV） , 具有13个独立的基因修饰，启函生物修改了猪与人之间免疫和凝血方面的不兼容性。同时，该基因工程猪和其器官都具有正常的生理特征、生育能力以及转基因向下一代传递的能力。  

       猪3.0 “猪3.0”的诞生标志着异种器官移植在安全性和有效性上迈出了重要的一步，同时这项成果也证明了启函生物利用其高通量的基因编辑技术平台为细胞赋予了新的功能，使其在肿瘤免疫细胞疗法和再生医学应用中有较大的潜力。 此前，杨璐菡博士在接受《生物世界》专访中谈及了对基因编辑的细胞治疗的一些思考，详情：专访启函生物杨璐菡：用基因编辑普及细胞和器官治疗  

杨璐菡 杨璐菡 

       博士表示：细胞疗法是我们近期的重点，异种移植一如既往仍然是我们的长期愿景。 细胞疗法是同种异体移植，启函生物的目标是 利用CRISPR基因编辑技术和移植排斥方面深厚的专业知识，生产能够躲避宿主免疫攻击的新一代细胞和器官，可应用于同种异体和异种移植 。同种异体方面的研究工作仍然会给未来的异种移植带来巨大的助力。  

参考资料 ： https://www.abstractsonline.com/pp8/#!/10517/presentation/17990 https://www.abstractsonline.com/pp8/#!/10517/presentation/14669