TFH细胞促进抗体产生来提高慢乙肝患者对聚乙二醇干扰素α应答

编者按：HBsAg血清学转换被认为是治疗HBV感染的最佳结局。目前慢乙肝领域都在积极地追求临床治愈，基于聚乙二醇干扰素α (PEG IFNα) 的治疗方案是慢乙肝患者获得理想治疗目标的最佳选择，有研究显示B细胞应答在HBsAg清除过程中起到重要作用，但具体的机制尚未明确。

近期，来自吉林大学第一医院的研究团队在J Gastroenterol上发表了一项关于PEG IFNα提高慢乙肝患者HBsAg血清学转换率的机制研究，结果显示PEG IFNα单药治疗的慢乙肝患者中，滤泡辅助性T细胞 (TFH细胞)，特别是表达CD40L的细胞，可刺激B细胞分化，促进HBsAg血清学转换。

研究方法

应用流式细胞术检测15例健康参与者 (HCs) 和45例对标准的PEG IFNα单药治疗48周有不同治疗应答的慢乙肝患者的循环滤泡辅助性T细胞 (TFH)，包括完全应答组 (CRG)、不完全应答组 (ICRG) 和无应答组 (NRG)，探讨循环TFH细胞在慢乙肝患者对PEG IFNα治疗应答中的意义。通过共培养实验，评估不同TFH亚群激活B细胞和刺激IgG产生的能力。

患者特征

本研究纳入62例慢乙肝患者，有45例完成了48周的PEG IFNα单药治疗方案。其中慢性活动性乙型肝炎 (AHB) 32例，慢性无症状HBV携带者 (AHCs) 13例。AHB组HBeAg阳性15例，HBeAg阴性17例；AHC组包括3例HBeAg阳性免疫耐受期患者和10例HBeAg阴性非活动性HBsAg携带者。

AHB患者、AHCs患者和HCs在年龄和性别上无明显差异。AHB组的ALT、AST、APRI和FIB-4指数均明显高于AHC组和HCs组。AHB组和AHC组血清HBV DNA、HBsAg水平无显著性差异。

17例被分为完全应答组 (CRG)，8例被分为不完全应答组 (ICRG)，20例被分为无应答组 (NRG)。

完成48周治疗疗程的参与者的人口学和临床特征

研究结果

1 基线HBsAg低水平与PEG IFNα更好的治疗应答相关

接受PEG IFNα治疗前CRG、ICRG和NRG患者的年龄、性别、ALT、AST、APRI和FIB-4水平无明显差异。NRG组HBsAg明显高于CRG组和ICRG组 (P < 0.05)；NRG组HBV DNA水平明显高于CRG组 (P < 0.05)，而NRG组与ICRG组HBV DNA水平相近 (P > 0.05)。

基于这些结果，可见HBsAg水平比HBV DNA水平预测PEG IFNα治疗的免疫应答更敏感，较低的HBsAg水平与良好的治疗应答相关。更重要的是，我们观察到CRG患者达到完全血清学转换时HBsAb水平显著升高，而ICRG和NRG患者则没有。

PEG IFNα治疗前纳入纵向研究的受试者的临床特征

CRG, ICRG和NRG组的各指标的动态变化

2 在PEG IFNα治疗期间CRG患者的B细胞亚群及血清HBsAb水平明显升高

对PEG IFNα治疗期间B细胞亚群和血清免疫球蛋白水平的纵向分析表明，在PEG IFNα治疗期间CRG患者的CD38hiCD138+浆细胞、IgG+CD21+ B细胞及血清IgG、IgM水平随时间延长而明显升高，48周达到峰值 (P < 0.05)。相反，血清IgA水平没有明显变化。

PEG IFNα治疗不同时间点B细胞亚群和血清免疫球蛋白水平的纵向分析

3 在PEG IFNα治疗期间CRG患者的CD40L+CD4+CXCR5+ TFH细胞明显增加

与NRG组和ICRG组相比，纵向分析显示CRG组的CD40L+CD4+CXCR5+ TFH细胞数量明显增加，48周达到峰值 (P < 0.05)。

PEG IFNα治疗不同时间点TFH细胞亚群的纵向分析

4 CD40L+CD4+CXCR5+ TFH细胞可提高特异性B细胞亚群比例，并诱导HBsAb产生

流式细胞仪检测结果显示CRG组的CD40L+CD4+CXCR5+ TFH细胞与CD38hiCD138+浆细胞、IgG+CD21+ B细胞以及血清HBsAb水平均呈现显著正相关 (P = 0.0018; P = 0.0025; P = 0.0053)。

CRG患者中CD40L+CD4+CXCR5+ TFH细胞与CD38hiCD138+浆细胞、

IgG+CD21+ B细胞以及血清HBsAb水平的相关性

CRG组的CD40+CD3-CD19+ B细胞明显多于NRG组或ICRG组 (P均 < 0.001)。这些细胞的频率与CD40L+CD4+CXCR5+ TFH细胞的频率呈明显的正相关 (P = 0.0449)。

TFH与B细胞亚群的相关性分析

（PEG IFNα治疗48周后，不同治疗应答患者的CD40+CD3-CD19+的频率）

这些结果显示CD40L+CD4+CXCR5+ TFH细胞在提高特异性B细胞亚群比例和抗体诱导方面的作用，表明这些细胞有可能诱导对PEG IFNα治疗的良好应答，并可预测慢乙肝患者是否对该治疗方案有免疫应答。

肝霖君有话说

该研究显示TFH细胞，尤其是表达CD40L的细胞，能刺激B细胞分化，可提高接受PEG IFNα单药治疗的慢乙肝患者的HBsAg血清学转换率。之前，中山大学附属第三医院高志良教授团队也发表了相关机制研究，是对珠峰项目部分患者外周血单核细胞进行了B细胞亚群分析，发现慢乙肝患者接受PEG IFNα治疗后B细胞亚群会重塑，且与HBsAg清除有关(相关链接)。PEG IFNα治疗慢乙肝患者的机制涉及复杂的免疫细胞调控(T细胞、B细胞、NK细胞等)，需要更多的研究来探索。

参考文献：

Liu Y, Hu X, Hu X, et al. T follicular helper cells improve the response of patients with chronic hepatitis B to interferon by promoting HBsAb production[J]. J Gastroenterol, 2022.