mRNA疫苗的挑战

最近批准的mRNA疫苗中，增强细胞内传递和内吞体逃逸已被证明是成功的递送策略。然而，仍有一些关键问题，比如需要进一步加强mRNA的易位效率、增加细胞靶向性和患者的依从性等。

充分了解mRNA纳米颗粒的细胞内运输和影响因素，将有助于开发更有效和更安全的递送策略。然而，氮:磷酸基(N:P)比值、粒径和表面电荷及其与细胞质传递效率的相互作用等还未研究透彻。对siRNA传递的研究表明，只有不到2%的LNPs-siRNA从内吞体逃逸到细胞质。这表明，通过内吞体逃逸途径提高易位效率仍有很大的空间。

此外，尚不清楚从内吞体逃逸的是裸mRNA还是LNPmRNA。据设想，在内吞体和溶酶体的酸性腔内(pH5-6)有利于阳离子脂质与带负电荷的mRNA复合物，而不是释放单纯的mRNA。

更特异性的APC靶向将通过两种方式提高转染效率，同时减少脱靶副作用。一是选择性地将mRNA传递给树突状细胞，二是通过受体配体介导的内吞作用促进摄取。值得注意的是，mRNA“靶向”是为了最大数量的mRNA纳米颗粒靶向足够数量的树突状细胞，而不是将大量纳米颗粒靶向相同的树突状细胞。

为了增强APC的特定细胞摄取，选择一个适当的传递途径是很重要的，如上所述。对于每种给药途径，优化的配方参数可能会有所不同，包括脂质组成、颗粒大小、表面（净）电荷、聚乙二醇化的程度，以及基于靶组织位置的靶配体选择。

聚乙二醇聚合物可能触发抗聚乙二醇抗体的产生，在随后的给药中导致加速血液清除(accelerated blood clearance，ABC)现象，及产生过敏反应。因此，报道的用于mRNA传递的LNP配方使用PEG2000-脂质很少超过1.5mol%。

在递送平台方面，细胞分泌的内源性纳米微囊泡（Nano-EV）(30-150nm，也称为外泌体)已成为一种新的传递载体，具有显著优势，包括生物相容性、非免疫原性、组织定位等。体外用DC细胞包装mRNA（电穿孔），以实现对细胞靶点的精确控制。有趣的是，这种加载过程可以产生mRNA微囊泡，可能用于saRNA的递送，然而，对放大生产规模构成了挑战。

需要进行研究来克服与ID、SC和IM给药相关的注射部位反应（水肿和红斑），这可能是由可电离成分引起的。

迫切需要了解并最终预测递送系统的局部和系统转运和吸收动力学，这些动力学可以进一步与下游的药理和免疫反应相结合。这种定量系统药理学方法建立了配方设计、患者条件和治疗结果之间的联系，确保了安全性和最大限度地提高疗效。

mRNA疫苗虽然展示出其区别于传统疫苗的优势，但是也存在一些挑战。比如如何提高内吞体逃逸，更好靶向APC细胞，甚至PEG化引起的致命过敏反应等，都是进一步发展所需要解决的问题。