肝胆资讯｜HBV RNase H抑制剂在体外可有效抑制病毒复制和cccDNA形成

核糖核酸酶H（RNAse H）是HBV多聚酶基因4个功能域组成之一，HBV RNAse H与所有逆转录病毒中RNAse H的活性相同，可降解DNA RNA杂交体中的RNA，为HBV DNA中负链DNA合成不可缺少的一种酶，参与HBV DNA包装过程。

自另一个HBV多聚酶基因4个功能域组成之一的逆转录酶抑制剂类药物[核苷（酸）类似物]被成功开发用于慢性乙型肝炎治疗，但却无法实现根治之后，研究人员将目光投向了HBV RNAse H这一新的靶点，相关药物研究已有近30年，遗憾的是至今尚未有一款药物被推进至人体临床研究阶段，基本处于临床前研究阶段。

究其问题主要有3个方面：（1）多数研究仅在转染细胞系中评估了这类药物的功效；（2）细胞毒性数据来自转化细胞系而非原代细胞；（3）尚不清楚这些化合物是如何对抗核苷（酸）类似物耐药 HBV 菌株的。 

来自美国圣路易斯大学等机构的研究人员开展了一项解决上述3个问题的研究并于近日发表文章（DOI：10.1128/AAC.01460-21）。研究将3种不同化学类型的RNAse H抑制剂——110(α-羟基托波酮)、1133(N-羟基吡啶二酮)和1073(N-羟基甲状腺素)在HBV感染的HepG2NTCP 细胞中测试了其对抑制 cccDNA 积聚和HBV产物形成的影响。

研究结果显示，在感染研究中，50%有效浓度(EC50)为0.049~0.078 μM，而在转染细胞中为0.29~1.6 μM。所有化合物在感染后不久加入5μM，cccDNA的形成抑制率均＞98%。HBV RNA、细胞内外DNA和HBsAg分泌均受到强烈抑制。在感染后不久添加抑制剂的功效更大可能是由于阻断了 HBV cccDNA 的扩增，从而抑制了 cccDNA 形成的下游事件。 这些化合物在 HepG2 衍生细胞系中的 50% 细胞毒性浓度 (CC50) 为 16~100 μM，但在原代人肝细胞中无毒，这可能是由于肝细胞处于静止状态。 

正如预期的那样，这些化合物对野生型、拉米夫定耐药和阿德福韦/拉米夫定耐药 HBV 的复制抑制具有相似的 EC50，因为 RNase H 抑制剂不靶向病毒逆转录酶活性位点。 

这项研究增加了业界将抑制HBV RNase H作为治疗慢性乙型肝炎新型药物策略的信心，并支持将 RNase H 抑制剂纳入新的 HBV 治疗药物组合中。期待不久的将来能有一款 RNase H 抑制剂获得推进至人体临床，其实际表现令人拭目以待。

来源：肝脏时间