临床案例：干细胞疗法对11例乙型肝炎肝硬化患者疗效评估

肝硬化是临床常见的慢性进行性肝病，引起肝硬化的病因有很多，欧美国家以酒精性肝硬化为主，而我国是以乙型肝炎引发的肝硬化为主，肝硬化患者的HBsAg阳性率高达76.7％，其形成机制主要是由于肝炎病毒感染导致广泛性肝细胞变性坏死、肝小叶结构破坏、肝脏弥漫性纤维化、结节性再生同时伴有假小叶形成，肝脏逐渐变形、变硬而发展为肝硬化。

传统疗法常选用保肝、降酶、退黄等基础治疗，而终末期肝硬化临床治疗效果差，缺乏广泛可行的治疗手段。干细胞移植的出现，以其独特的生物学特性，为肝病治疗带来新的治疗思路。

背景：为了提高肝硬化疗效，本研究采用了hUCB-MNCs联合hUC-MSCs治疗肝硬化，笔者前期临床研究发现，hUCB-MNCs具有极其良好的提高患者免疫的功效，因此先行输注hUCB-MNCs，改善患者整体状况，提高其免疫功能。

而后输入hUC-MSCs，使其归巢到肝脏，分化为肝细胞或进入肝脏后修复受损的肝细胞，并可通过某些细胞因子的改变，来调节免疫、减轻炎症反应、抗肝细胞凋亡、促进血管增生、抗肝纤维化等修复损伤肝组织，同时促进hUC-MSCs的多向分化。两种细胞联合治疗，以更好的发挥其疗效。

目的：探讨人脐带血单个核细胞（hUCB-MNCs）联合人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）对乙型肝炎相关失代偿期肝硬化患者的肝功能、炎症程度及免疫功能的影响。

方法：选取2017年11月—2020年6月研究人员选取11例肝硬化患者，所纳入患者第1周输注1次hUCB-MNCs（ ＞18×10^9/次），第2、3、4周每周输注1次hUC-MSCs，每次输注1×10^6／kg，在治疗结束的第４、8、12周进行复查，对比治疗前后肝功能、血氨、凝血因子、血清细胞因子及淋巴细胞亚群的变化，同时观察记录神经、精神症状的改变。

hUCB-MNCs联合hUC-MSCs输注后各项指标评估

肝功能、血氨及其他状况的影响：对PT和PTA影响最快，细胞输注结束后第４周即可显著改善（Ｐ值均＜0.05），而患者的肝功能酶学指标在细胞输注后第８周逐渐恢复到正常水平（Ｐ值均＜0.05），在输注结束第12周时，肝功能指标较之前明显好转（Ｐ值均＜0.01）（表２）。

细胞输注４周后，患者血清中血氨浓度明显降低（Ｐ＜0.05），随着时间的延长，血氨水平持续下降，除患者No.7、10、11外，其他患者在hUCB-MNCs和hUC-MSCs输注12周后均降低到正常水平（Ｐ值均＜0.05）（表３）

细胞输注后第４、８周，５例肝硬化腹水患者的腹水均有所减少，除却N0.10患者仍有少量腹水，且Child-Pugh分级仍然处于Ｃ级。10例患者的乏力、食欲、睡眠、精神、腹胀、下肢水肿等明显改善，血清胆红素及PT基本恢复正常，血清Ａlb也明显升高，Child-Pugh评分随之降低，差异有统计学意义（Ｐ值均＜0.05）（表４）。

血清细胞因子和淋巴细胞亚群的影响：采集患者静脉血，ELISA定量检测hUCB-MNCs和hUC-MSCs输注前后血清炎性和抗炎细胞因子的含量，结果显示输注４周后患者血清炎性细胞因子lL-6、TNFα水平均明显降低（Ｐ值均＜0.01），从８到12周，其血清中含量持续维持在正常水平；患者血清抗炎细胞因子IL-10、TGFβ在治疗后４周显著上升（Ｐ值均＜0.01），４周后基本恢复到正常值，到治疗后的12周，其表达水平一直维持在正常值（表５）。

讨论：hUCB-MNCs联合hUC-MSCs输注治疗可通过影响机体的免疫状况来调节免疫性疾病的转归，可能产生的副作用目前还在随访观察中。截至目前，11例入组治疗患者均未发现明显的不良反应。这些研究结果为hUCB-MNCs联合hUC-MSCs可以优化肝功能且抑制病情发展提供了有力的依据。

总结：hUCB-MNCs联合hUC-MSCs输注可以分化为肝细胞或进入肝脏后修复受损的肝细胞，抑制炎性因子释放，上调Treg水平，从而调节肝硬化患者免疫功能，改善患者一般状态。针对检测指标的改变，对其治疗肝硬化的免疫调节机制进行评价，为终末期肝病的治疗探索新方法。