银杏叶提取物EGb761对大鼠肝缺血/再灌注损伤的保护作用

【论著】

本研究拟建立大鼠肝缺血/再灌注（I/R）损伤模型，探索银杏叶提取物（EGb761）对肝I/R损伤的影响及其作用机制。

雄性SD大鼠24只，按照随机数字表法分为4组（每组6只）：假手术组（Sham组）、缺血/再灌注组（I/R组）、银杏叶提取物EGb761组（EGb组）和银杏叶提取物EGb761+丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激动剂p79350组（EGb+p组）。Sham组大鼠仅游离肝门处血管；I/R组大鼠采用夹闭肝左叶、中叶脉管共干30 min制备70%肝I/R损伤模型；EGb组大鼠建模前30 min静脉注射EGb761 50 mg/kg；EGb+p组大鼠建模前5 d连续静脉注射20% p79350溶液0.1 ml/d，其余操作同EGb761组。再灌注6 h时，取血后处死大鼠，ELISA法检测肝功能指标ALT、AST和谷氨酰转肽酶（GGT），TUNEL法观察细胞凋亡情况，留取肝组织采用Western blot法检测p38 MAPK表达水平。

2.1　大鼠血清ALT、AST、GGT浓度比较

与Sham组比较，I/R组、EGb组和EGb+p组大鼠血清ALT、AST、GGT浓度明显增高（P<0.05）。与I/R组比较，EGb组ALT、AST、GGT浓度明显降低（P<0.05），而EGb+p组ALT、AST、GGT浓度差异无统计学意义（P>0.05）。见图1。

2.2　大鼠肝细胞凋亡情况比较

与Sham组比较，I/R组、EGb组和EGb+p组肝细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；与I/R组比较，EGb组肝细胞凋亡率明显下降（P<0.05）；EGb+p组与I/R组比较肝细胞凋亡率差异没有统计学意义（P>0.05）。见图2。

2.3　大鼠肝组织p38 MAPK表达比较

与Sham组比较，I/R组、EGb组和EGb+p组大鼠肝组织p38 MAPK表达明显增加（P<0.05）。与I/R组比较，EGb组肝组织p38 MAPK表达明显降低（P<0.05）；而EGb+p组与I/R组比较差异无统计学意义（P>0.05）。见图3。

本研究发现EGb761能够明显改善肝I/R所致的肝功能损伤，减轻肝细胞凋亡；其机制可能与EGb761抑制p38 MAPK表达有关。

本研究发现，肝I/R损伤后，肝功能指标ALT、AST和GGT明显升高，肝细胞凋亡率增加，p38 MAPK表达增加；EGb761能够抑制p38 MAPK表达，明显改善肝I/R损伤；当提前注射p38 MAPK激动剂p79350后，EGb761这一保护作用消失；证实EGb761能够明显改善肝I/R所致的肝功能损伤，其机制与EGb761抑制p38 MAPK表达有关。

本研究发现大鼠肝I/R损伤建模之前，静脉注射EGb761能够明显减轻肝功能的损伤，减轻肝细胞凋亡率；当静脉注射MAPK激动剂p79350，EGb761的这一保护作用消失。由此可以推测MAPK信号通路是EGb761减轻肝I/R损伤中的关键分子靶点。

综上所述，本研究表明EGb761对大鼠肝I/R损伤具有保护作用，其保护作用的机制可能与抑制p38 MAPK的表达有关。