聚乙二醇干扰素α增强NK细胞对Tregs增殖分化的抑制作用

编者按：自然杀伤（NK）细胞通过直接的细胞毒性或细胞因子的产生在病毒感染的清除和控制中起着关键作用。最近，关于在慢乙肝患者抗病毒治疗过程中NK细胞的免疫调节作用的研究越来越多（相关链接一、二）。CD4+ CD25+的调节性T细胞（Tregs）在维持免疫平衡中发挥重要作用，Tregs可通过细胞间接触和分泌免疫抑制细胞因子（包括TGF-β和IL-10）来抑制HBV特异性免疫应答，从而导致HBV感染的持久性。

近日，华中科技大学同济医学院附属同济医院宁琴教授团队在The Journal of Infectious Diseases上发表的最新研究显示：聚乙二醇干扰素α（PEG IFNα）治疗可增强慢乙肝患者NK细胞对CD4+ CD25+ Tregs细胞的增殖分化的抑制作用，这可能有助于恢复HBV特异性CD8+ T细胞应答和良好的临床疗效。

研究背景

在之前的研究结果中发现NA治疗获得病毒学抑制的慢乙肝患者在序贯PEG IFNα治疗的早期表现出Tregs比例的显著下降。然而，在慢乙肝患者感染和治疗过程中NK细胞对CD4+ CD25+调节性T细胞（Tregs）的免疫调节作用还尚不清楚。

研究方法

共入组116例两个多中心随机临床试验（OSST研究和Anchor研究）中的慢乙肝患者。所有患者接受NA治疗 > 9个月，且HBV DNA < 103 copies/mL。患者随机分配，继续ETV治疗或换用基于PEG IFNα的治疗方案。应答者定义为48周获得HBeAg血清学转换和/或HBsAg清除的患者。

研究结果

PEG IFNα治疗组的疗效显著优于ETV组

两组患者的年龄、性别分布、基线HBeAg阳性比例和HBsAg水平无差异。

治疗结束时PEG IFNα治疗组的HBsAg水平显著低于NA治疗组，且HBsAg下降幅度更显著（P均 < 0.0001)。PEG IFNα组的应答率达37.5%，显著高于ETV组的3.33%（P < 0.0001)。

PEG IFNα组患者外周NK细胞比例与Tregs比例呈负相关

PEG IFNα组患者在治疗过程中NK细胞和Tregs的比例呈现出相反的趋势，尤其是在治疗前12周。

进一步分析表明，在所有入组患者中，0周时NK细胞比例与Tregs比例呈负相关。在PEG IFNα治疗组中这种线性相关性持续存在，而在ETV治疗组中未持续存在。

在PEG IFNα治疗组患者中，从基线到第12周或第24周，NK细胞比例的增加伴随着Tregs比例的降低。这显示在HBV治疗过程中NK细胞和Tregs之间可能存在相互作用。

NK细胞通过分泌IFN-γ抑制Tregs的增殖和分化

实验证实：在NA治疗的慢乙肝患者和HBV携带小鼠模型的肝脏循环中，NK细胞通过分泌IFN-γ抑制Tregs的增殖和分化。

PEG IFNα组患者的NK细胞对Tregs的抑制作用显著强于ETV组

PEG IFNα组患者NK细胞对Tregs的抑制程度（ID，ID = Tregtreat - Tregcon）和抑制率（IR， IR =  (Tregtreat - Tregcon)/ Tregcon × 100%）均显著高于继续ETV治疗的患者（P = 0.0021和P = 0.0116）。PEG IFNα治疗的应答者的NK细胞对Tregs的抑制作用比无应答者更强烈（P < 0.05）。

在PEG IFNα组中，与治疗48周HBsAg下降 < 0.5 lg IU/mL的患者相比，HBsAg下降 > 0.5 lg IU/mL的患者的NK细胞对Treg的抑制作用更强烈（P = 0.03和P = 0.0375)。此外，在PEG IFNα组中，NK细胞对Tregs的抑制程度与HBsAg从基线到第48周的下降更多相关。

NK细胞对Tregs的抑制能力与HBsAg水平呈负相关

NK细胞对Tregs的抑制能力与HBsAg水平呈负相关。HBV感染的持续性与HBV特异性CD8+ T细胞应答的损伤有关，这可能是由于Tregs的过度调节。治疗后高IR患者HBV特异性CD8+ T细胞和产生IFN-γ的HBV特异性CD8+ T细胞比例明显高于低IR患者（P均 < 0.05）。

在4例有代表性的患者中发现，HBV特异性CD8+ T细胞比例和HBsAg定量均有动态变化。其中低IR患者似乎严重抑制了HBV特异性CD8+ T细胞应答，未能降低HBsAg水平，而高IR患者更倾向于恢复HBV特异性CD8+ T细胞应答，并且HBsAg显著降低。

基于PEG IFNα的治疗改善了NA治疗的慢乙肝患者的预后，这可能是由于NK细胞对Tregs的抑制能力增强和随后HBV特异性T细胞应答的恢复所致。

肝霖君有话说

该研究显示NA经治获得病毒学抑制的慢乙肝患者接受PEG IFNα治疗后，可增强NK细胞对Tregs细胞增殖分化的抑制作用，而且NK细胞对Tregs的抑制能力与HBsAg水平呈负相关，抑制作用越强，患者HBsAg水平越低。这与更强烈的HBV特异性T细胞应答和HBsAg的显著降低有关。本研究揭示了NK细胞的免疫调节机制，为PEG IFNα作为慢乙肝患者的免疫治疗方案提供了理论依据。

参考文献：

Yuan W, Huang D, Wu D, et al. Peg IFN-a Treatment Enhanced the Inhibitory Effect of NK Cells on the Differentiation and Proliferation of CD4 +CD25 + Tregs via IFN-gamma in Chronic Hepatitis B[J]. J Infect Dis, 2021.