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流感疫苗株重组抗原相关应用

2021

05/21

生物世界

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流感疫苗株重组抗原相关应用

流行性感冒是一种常见的季节性可传染的呼吸道疾病，由流感病毒引起，全球每年因流感可导致300-500万重症病例，29-65万人死亡。目前，已鉴定的流感病毒有4类，包括A型，B型、C型和D型。其中，A型和B型流感病毒可引起大范围的流行性感冒，并且A型流感病毒还会造成全球流感大流行。以往的几次全球性流感大流行基本都是由A型流感病毒引起的，比如Hong Kong flu (1968–1969) 、H1N1/09 flu pandemic (2009–2010) 分别由A/Hong Kong/1/1968 (H3N2) 和A/California/04/09 (H1N1) 导致。

HA、NA、NP是流感病毒最重要的3个抗原蛋白，它们的功能和应用见下表：

蛋白	功能	应用
HA （血凝素）	宿主细胞膜上的唾液酸受体相结合，协助病毒包膜与宿主细胞膜相互融合；凝血作用	流感基础性研究流感疫苗研发抗血凝素抗体研发病毒检测试剂研究
NA （神经氨酸酶）	水解唾液酸受体，促进成熟病毒颗粒释放	抗病毒药物研发流感基础性研究流感疫苗研发抗体研发病毒检测试剂研究
NP （核蛋白）	与流感遗传物质结合，参与病毒基因复制、转录、翻译；维持病毒基因稳定性	抗病毒药物研发流感基础性研究抗体研发诊断产品开发

接种流感疫苗是预防流行性感冒最有效的方法。目前获得许可的流感疫苗主要产生靶向病毒HA蛋白的抗体。每年WHO都会根据最新分离出的毒株检测数据以及上一个季节流感疫苗的性能选择3-4种不同的流感毒株作为疫苗株。近几十年，流感疫苗均为4价或者3价，可预防的流感包括1种H1N1、1种H3N2以及1种或者2种B型流感病毒（Yamagata或/和Victoria ）。

义翘神州流感病毒抗原库覆盖了近600+流感病毒抗原，包括重组HA、NA、NP以及更多流感抗原，覆盖了近些年WHO推荐的所有流感疫苗株以及强毒株、经典株、耐药株等，可用于检测分析疫苗介导的抗体应答反应以及广谱抗体开发、病毒耐药性研究等。除此之外，我们还开发了80余种流感病毒单克隆抗体试剂，可用于相关检测试剂开发。

义翘神州流感病毒产品经过检测具有以下特点：

1. 纯度高：

> 95 % as determined by SDS-PAGE

2. 活性好：

HA蛋白具有血凝活性

40498-V08B （上）：Measured by its ability to agglutinate guinea pig red blood cells. HA titer is 0.5-5 μg/mL for 1% GRBC

11085-V08B （下）：Measured by its ability to agglutinate guinea pig red blood cells. HA titer is 1-6 μg/mL for 1% GRBC

NA蛋白具有神经酰胺酶活性

40767-V08B (MF14DE2313)（上）：Measured by its ability to cleave a fluorogenic substrate, 2'-(4-Methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylneuraminic acid. The specific activity is 40296 pmoles/min/μg.

40569-V08B (MF12SE1101)（下）：Measured by its ability to cleave a fluorogenic substrate, 2'-(4-Methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylneuraminic acid. The specific activity is 29781 pmoles/min/μg.

义翘神州流感病毒产品应用验证

1. 重组疫苗株NP蛋白用于筛选流感检测用抗体

间接ELISA法包被不同的流感NP蛋白，筛选高亲和力广谱抗体。结果显示，抗体2、抗体3与NP蛋白结合能力强，是高亲和力的广谱抗体。

如上用到的重组NP蛋白（His标签）：

蛋白货号	流感病毒株
40205-V08B	Influenza A H1N1 (A/California/07/2009)
40723-V08B	Influenza A H1N1 (A/Guangdong-Maonan/SWL1536/2019)
40724-V08B	Influenza A H1N1 (A/Hawaii/70/2019)
40753-V08B	Influenza A H3N2 (A/Hong Kong/2671/2019)
40754-V08B	Influenza A H3N2 (A/Hong Kong/45/2019)
40499-V08B	Influenza A H3N2 (A/Switzerland/9715293/2013)

注：只列举部分筛选用NP蛋白。更多产品信息，请联系我们。

2. 用于抗体应用研究

A-D：抗NP蛋白鼠单抗

检测样品：40753-V08B（A/Hong Kong/2671/2019 （H3N2））

义翘神州流感病毒相关产品已助力多篇文章发表在Cell、Nature Commun等国际期刊

比如2019年Cell发表的一篇重要研究文章：“A Site of Vulnerability on the Influenza Virus Hemagglutinin Head Domain Trimer Interface”。研究人员称发现流感病毒蛋白的一个“致命弱点”，有一种抗体能够进入稳定的三聚体HA区域。这一结果说明针对这一精准区域的抗体疗法对许多甲型流感毒株有效，并为设计广谱性流感疫苗提供思路。在本次研究中，研究人员利用购自义翘神州的H1N1 A/California/07/2009 HA重组蛋白（ Cat: 11085-V08B ）进行ELISA验证筛选。

部分文献列表：

向上滑动阅览

1	文章标题：A Site of Vulnerability on the Influenza Virus Hemagglutinin Head Domain Trimer Interface 发表年份：2019年发表期刊：Cell（IF=38.637）产品及货号：Influenza A H1N1 (A/California/07/2009) HA重组蛋白（Cat：11085-V08B）应用：ELISA、NK cell activation assay
2	文章标题：Analysis of SARS-CoV-2 antibodies in COVID-19 convalescent blood using a coronavirus antigen microarray 发表年份：2021年发表期刊：Nature Communications（IF=12.121）产品及货号：Influenza B (B/PHUKET/3073/2013) HA重组蛋白（Cat：40498-V08B）应用：Antigen microarray
3	文章标题：Design, synthesis and biological evaluation of "Multi-Site"-binding influenza virus neuraminidase inhibitors 发表年份：2019年发表期刊：European Journal of Medicinal Chemistry（IF=5.572）产品及货号：Influenza B (B/PHUKET/3073/2013) NA重组蛋白（Cat：40502-V07B）应用：In vitro neuraminidase enzyme inhibitory assay
4	文章标题：Memory B Cell Activation, Broad Anti-influenza Antibodies, and Bystander Activation Revealed by Single-Cell Transcriptomics 发表年份：2020年发表期刊：Cell Reports（IF=8.109）产品及货号：Influenza B (B/PHUKET/3073/2013) NA重组蛋白（Cat：40502-V07B）应用：ELISA
5	文章标题：Simulated Respiratory Secretion for Use in the Development of Influenza Diagnostic Assays 发表年份：2016年发表期刊：PLoS One（IF=2.740）产品及货号：Influenza A H1N1 (A/California/07/2009) NP重组蛋白（Cat：40205-V08B）应用：WB
6	文章标题：Genomic Circuitry Underlying Immunological Response to Pediatric Acute Respiratory Infection 发表年份：2018年发表期刊：Cell Reports（IF=8.109）产品及货号：Influenza A H1N1 (A/California/07/2009) NP重组蛋白（Cat：40205-V08B）应用：ELISA
7	文章标题：Development of a DNA aptamer selection method based on the heterogeneous sandwich form and its application in a colorimetric assay for influenza A virus detection 发表年份：2019年发表期刊：New Journal of Chemistry（IF=3.288）产品及货号：Influenza A H1N1 (A/California/07/2009) NP重组蛋白（Cat：40205-V08B）应用：Binding (aptamer)
8	文章标题：Development of Replication Protein A-Conjugated Gold Nanoparticles for Highly Sensitive Detection of Disease Biomarkers 发表年份：2019年发表期刊：Analytical Chemistry（IF=6.785）产品及货号：Influenza A H1N1 (A/California/07/2009) NP重组蛋白（Cat：40205-V08B）应用：Binding (aptamer)