【肾世图卷】Journal Club - 03期

💊DEPICT(Dapagliflozin Evaluation in Patients with Inadequately Controlled Type 1 Diabetes)即：控制不佳的1型糖尿病患者应用达格列净的评估研究。DEPICT-1和DEPICT-2两个III期临床研究表明：达格列净作为调节胰岛素的辅助药物，可改善糖尿病预后。post-hoc分析是对尿白蛋白(UACR)基础值≥30mg/g的1型糖尿病受试者，达格列净作为胰岛素治疗辅助药物，评估其对UACR和eGFR的影响。

💊1646名受试者随机分组，其中239名基线UACR≥30mg/g，且具有完整的分析数据

① 达格列净5mg组：n=76

② 达格列净10mg组：n=76

③ 安慰剂组：n=87

主要转归：从基线到第24和52周的UACR和eGFR的百分比变化，如下图所示👇👇👇。

💊结果

① 从基线至52周的UACR变化

与安慰剂组相比，达格列净5mg组的UACR平均变化为-13.3%(95％可信区间[CI]为-37.2～19.8)，达格列净10mg组的UACR平均变化为-31.1％(95％CI为-49.9～-5.2)，提示剂量依赖效应

② eGFR三组之间没有显著变化

③ 和安慰剂组相比，两种剂量的达格列净均降低患者HbA1c和体重

💊安全性分析显示，不论是安慰剂组还是不同剂量的达格列净组不良事件发生率相似

💊Post hoc分析的结果提示：使用达格列净作为胰岛素辅助治疗时，可以显著降低UACR并且对有白蛋白尿的1型糖尿病患者起到肾脏保护作用。尽管其对肾脏的影响还需要更多研究支持，但这些数据对SGLT2抑制剂在具有肾脏疾病的患者中的应用仍有指导意义。

💊器官芯片(Organ-on-a-chip，OOC)是模拟整个器官和器官系统活动、力学特性和生理反应等的多通道3D微流体细胞培养芯片。通过微流体技术，诱导细胞表现出体内的表型，而这些表型在传统培养系统中是无法表现出的。Nikolaev等学者开发出了mini-gut芯片，和传统的类器官相比，该结构和体内观察到的细胞多样性相似，并利用该系统研究了肠道损伤和感染模型

💊该小肠芯片包括一个储存培养液的小室以及一个流入道和流出道。这个小室充满了混有I型胶原和基质胶的水凝胶。在水凝胶内部，通过激光消融制造出具有微腔的可灌注微通道，模拟肠道和隐窝的几何形状，从而用于细胞培养👇👇👇。

💊小鼠小肠干细胞接种到微通道上，几周后形成带有隐窝的管腔👇👇👇。

💊细胞类型的空间分布与体内相似。还观察到了类器官中未发现的功能重要的细胞类型。分泌和吸收功能也被保留👇👇👇。

💊使用紫外线激光，右旋糖酐硫酸钠和γ射线分别构建上皮病变，溃疡性结肠炎和肠道损伤模型。除了强的γ射线(8Gy)损伤外，其余损伤均可恢复👇👇👇。

💊有趣的是，mini-gut芯片感染腹泻小隐孢子虫。小隐孢子虫是专性寄生虫，难以长期培养。使用器官芯片，小隐孢子虫被诱导为卵囊，维持整个生命周期，并培养了至少4周。

💊其他器官细胞证实也可以形成管状结构。此外，巨噬细胞或肠成纤维细胞也可以嵌入水凝胶中进行共培养。

💊该培养系统结合了类似于体内的可灌输的几何形状和组织的干细胞，有助于开发包括肾脏在内的各种体内稳态类器官。

💊目前已公认，AKI易转变成CKD，其潜在机制包括适应不良的修复，肾小管上皮细胞的持续损害和成纤维细胞的活化，血管变化以及AKI后的慢性炎症。

💊对肾间质周细胞的研究报道甚少。最近已证实肾间质周细胞是产生疤痕的成纤维细胞的祖细胞。

💊在缺血再灌注的单肾切AKI小鼠中，激活的周细胞导致肾间质成纤维细胞大量增加。成纤维细胞数量由于肾功能恢复，在病变第7天开始通过凋亡而减少。

💊AKI后不同时间点分离的肾周细胞的全基因组微阵列还证明了PDGF和TGF-β的瞬时过表达，两者均主要参与周细胞的增殖和活化。

💊通过从正常肾脏分离的静止周细胞和AKI后第28天的肾脏中分离的灭活周细胞培养发现，与静止的周细胞相比，AKI后的灭活细胞保留了更高的再激活潜能，因此在二次AKI的肾脏中更易表现为促纤维化作用。

💊这些证据有力地指出了表观遗传，即在AKI后的周细胞对进一步刺激反应与正常周细胞不同。研究人员发现：Ybx2过度甲基化,与α-SMA基因(Acta2)启动子结合，维持周细胞灭活，非静止状态，从而促进周细胞在二次AKI中的再激活。

💊该假设通过体内实验证实，在诱导AKI或重复性AKI的小鼠中使用5-氮胞苷(5-AZA)处理2周。5-AZA是胞苷的合成类似物，可防止DNA和RNA甲基化。AKI后180天，使用5-AZA治疗可减少纤维化，并改善残余肾功能。5-AZA的去甲基化可逆转活化周细胞的表型，使其与静态周细胞更加相似。

💊针对AKI后周细胞的过甲基化可作为预防AKI向CKD的转变的新治疗靶点👇👇👇。

💊尿路感染很常见，累及肾脏时，可能会导致肾脏瘢痕形成。引起感染的致病菌通过细菌表面的菌毛附着在尿道上皮的特定分子上，导致不易清除。如大多数大肠杆菌菌株具有由粘附素FimH组成的1型菌毛，该粘附素与高甘露糖N-聚糖结合。

💊尿调蛋白是人尿中细丝结构的蛋白质。尿调蛋白的增加与尿路感染的低易感性相关。

💊研究人员将冷冻电子断层扫描与液相色谱结合，通过串联质谱对尿调蛋白中的各个N-糖基化位点进行了映射扫描分析。利用此技术，评估了尿路感染患者的尿液以及体外尿调蛋白与病原体相互作用的尿液，从而将尿调蛋白的结构与针对尿路感染的潜在保护作用的机制联系起来。

💊尿调蛋白的细丝具有锯齿形骨架和横向突出的柔性臂。糖基化位点的图谱分析表明，尿调蛋白作为多价配体与大肠杆菌的1型菌毛FimH结合。冷冻电子断层扫描显示Asn275位点是结合FimH的位点。这些特定的位点存在于侧向突出的臂上。

💊FimH-尿调蛋白之间的相互作用很强，因此防止了菌毛与尿路上皮结合。当病原菌与尿调蛋白侧臂结合时，细菌聚集，阻止其粘附至尿路上皮，从而使细菌更容易通过尿液清除。

💊其他菌群，如克雷伯菌、假单胞菌和链球菌，也是以相似方式通过糖基位点与尿调蛋白结合在一起。

💊 以上数据提示尿调蛋白的多价长丝，作为FimH拮抗剂，阻止菌毛与尿道上皮的结合从而促进聚集细菌的清除👇👇👇。

Ref

（1）Lancet Diabetes Endocrinol. 2020;8:845–85

（2）Nature. 2020;585:574–578

（3）J Clin Invest. 2020;130:4845–4857

（4）Science. 2020;369:1005–1010

by 很咸的饭团🍙