天演药业安全抗体--SAFEbody

激活T细胞的双特异抗体主要是通过激活T细胞对肿瘤细胞进行杀伤，这是因为这种类型的双特异抗体可以同时结合肿瘤相关抗原（TAA）和T细胞上的抗原CD3.抗体结合CD3后可以有效的激活T细胞并作用于肿瘤细胞，进而对肿瘤细胞进行杀伤。但是这类抗体都有计量依赖的CRS副作用，这严重消减了抗体的用药剂量，从而限制了抗体作用的发挥。天演药业依据肿瘤微环境的特点，开发了能在肿瘤微环境中特异性激活的抗体平台SAFEbody。该平台不仅可以用在双特异抗体上，而且可以在单克隆抗体，ADC药物上使用。

SAFEbody

SAFEbody设计如图1，抗体由三部分组成——遮蔽肽，可以被酶降解的Linker,和可以结合肿瘤抗原的抗体。该设计的主要元件是遮蔽肽和可以降解的linker。据其专利描述，该linker可以被肿瘤微环境中特异性酶切割降解，从而将遮蔽肽从抗体上释放出来，进而暴漏抗体的抗原结合位点。在正常组织中，该linker无法被降解，因此抗体无法与正常组织上的抗原进行结合因此不具有活性。

遮蔽肽的筛选主要是通过酵母展示系统，首先将目标抗体的可变区（Fab或者scFv）展示在酵母表面，获得具有结合目标抗原能力的酵母，然后再加入构建好的遮蔽肽库（将遮蔽肽和linker融合到抗体VL的N端）。最后结合酶利用流式细胞仪筛选到目标抗体（无切割酶的情况下不结合抗原，经过切割酶作用后可以结合抗原）

图1：SAFEbody作用原理示意图

该平台CD3型的双特异抗体的安全性已经在体外细胞实验和动物体内实验经过验证。体外实验证明，SAFEbody双特异抗体在相同剂量下，在没有酶切的情况下，其细胞因子释放更低（图2）；在猕猴实验中， SAFEbody双特异抗体与常规抗体相比，高剂量的SAFEbody抗体没有IL-6因子的释放，而较低剂量的常规双特异抗体却有较高的IL-6细胞因子释放（图3）；淋巴计数实验表明，在注射低剂量的常规抗体后，猕猴体内的T细胞下降到几乎检测不到的水平，而注射更高的剂量的SAFEbody后，其T细胞在24小时会返回到正常水平（即使开始T细胞水平有所下降），这说明SAFEbody抗体与常规CD3双特异抗体相比更加安全。

图2：体外细胞水平验证SAFEbody的安全性

图3 ：猕猴体内验证SAFEbody抗体的安全性

图4：猕猴淋巴细胞计数

基于SAFEbody技术的ADG126

ADG126为靶向CTLA-4的单抗，ADG126在肿瘤微环境中被酶切割除去遮蔽肽，进而可以结合CTLA-4，使得CD80/86可以与CD28相结合并增强T细胞的活性。另外，它还可以通过ADCC，ADCP等效应促进Treg细胞凋亡，进而促进T细胞的抗肿瘤效应。

图5：ADG126作用机制

图6：天演药业管线

总结

SAFEbody是天演药业拥有自主知识产权的抗体平台，该平台与Probody类似，主要是利用肿瘤微环境中的特异酶对抗体进行处理，最终激活抗体的结合能力。在正常组织中，抗体无法被酶切处理，因此无法激活，从而保证了抗体的安全性。依赖该技术的CD3相关双抗的安全性已经在体外和动物体内进行了概念验证，实验结果表明该抗体与传统CD3双特异抗体相比，具有较高的安全性。依据该技术平台，天演药业于2020年6月与田边三菱制药的子公司美国田边研究实验室（Tanabe Research Laboratories U.S.A., Inc., TRL）达成战略合作。TRL将利用SAFEbody，联合其独有的细胞毒性负载技术，来开发针对实体肿瘤靶点的新一代抗体偶联药物（ADC）。