SABCS | 全基因关联研究照亮化疗之暗面：rs28714259在蒽环类药物诱导心脏毒性的机制研究

● 荧光素酶分析显示，100nm地塞米松激活iPSC衍生的心肌细胞 （iPSC-CMs）的GR活性后，与没有增强子的对照载体相比，转染野生型的心肌细胞活性增加60%。转染风险等位基因iPSC-CM没有显示荧光素酶活性增加，提示A等位基因阻断了 GR 介导的转录激活。

● 采用电泳迁移率实验（EMSA）对地塞米松处理的 iPSC-CM 的核提取物进行分析，我们观察到G或A等位基因探针显著的波段变化。此外，还观察到带有GR抗体的超移频带，确认GR确实与rs28714259区域结合。值得注意的是，与野生型相比，风险等位基因探针的条带强度降低了50%，这表明GR与风险等位基因探针的结合亲和力较弱，与转录活性的降低相一致。

● 最后，为了鉴定蒽环类药物暴露下rs28714259调控的基因，我们对每个基因型的iPSC-CMs进行了RNA-Seq分析。RNA-Seq数据显示，最显著的差异调节网络为包括FADD、FAS和 Caspase-8的死亡受体通路，这些因子导致多柔比星引起的细胞凋亡。此外，GR信号通路中11个基因也受到rs28714259的调节。

总之，该研究表明，rs28714259变异可能具有等位基因特异性GR增强子活性，并调控参与多柔比星诱导的凋亡有关的基因。