罗氏电化学发光原理(动画演示)!

2021
03/15

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通过循环过程,测定信号不断的放大,从而使检测灵敏度大大提高,所以 ECL 测定具有高灵敏的特点。



今天复习经典 — 罗氏电化学发光,


抗原抗体的免疫反应过程与吖啶酯直接发光,酶催化发光别无二致。这里不做表述。有兴趣了解抗原抗体反应和利用磁珠洗脱的同学,可以观看后面全流程的视频。


电化学反应过程:

  • 工作电极上(阳极)加一定的电压能量,二价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]2+ 释放电子发生氧化反应,成为三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy) 3 ] 3+ 
     
     


  • 同时,电极表面的TPA释放电子发生氧化反应,成为阳离子自由基 TPA+ ,并迅速自发脱去一个质子而形成三丙胺自由基 TPA·
     
     


  • 这样在反应体系中就同时存在
    • 具有强氧化性的三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy) 3 ] 3+
    • 具有强还原性的三丙胺自由基 TPA·。

化学发光过程:
  • 具有强氧化性的三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy) 3 ] 3+ 和具有强还原性的三丙胺自由基 TPA· 发生氧化还原反应。三价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy)3]3+ 还原成激发态的二价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy) 3 ] 2+ ,
  • 激发态 [Ru(bpy) 3 ] 2+ 以荧光机制衰变并以释放出一个波长为 62Onm 光子的方式释放能量,而成为基态的 [Ru(bpy) 3 ] 2+ 。
     
     


循环过程:
  • 上述化学发光过程后,反应体系中仍存在二价的三氯联吡啶钌 [Ru(bpy) 3 ] 2+ 和三丙胺(TPA),使得电极表面的电化学反应和化学发光过程可以继续进行,这样,整个反应过程可以循环进行。
     
     


通过上述的循环过程,测定信号不断的放大,从而使检测灵敏度大大提高,所以 ECL 测定具有高灵敏的特点。

电化学过程的视频如下,觉得有用的及时收藏。

微信视频预览查看


对于刚进IVD的新同学,可以看下面这个全流程视频,它包括抗原抗体的免疫反应的部分,以及利用磁珠洗脱的部分,和最后电化学发光的部分。

微信视频预览查看

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关键词:
三氯联吡啶钌,三丙胺,原理,三价,电极,磁珠

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