Roche等开发SAR-T：2+1双抗作为活性和安全开关

CD19，CD20等明星靶点都存在于淋巴细胞，因而急性淋巴细胞性白血病（ALL）的CAR-T疗法取得了突破性进展，多个产品获批上市。

急性髓细胞性白血病（AML）则缺乏此类特异性靶点，虽然CD33被大家基于厚望，但CD33除了在AML细胞表达，也在正常的髓系祖细胞表达，因而需要控制T细胞治疗的毒性。实现抗肿瘤和可耐受毒性的平衡，是AML CAR-T的技术难点。

基于控制毒性的需求，Roche等开发了SAR-T细胞。

SAR-T细胞治疗平台

与经典的CAR-T不同，由罗氏创新中心、慕尼黑大学等联合开发的SAR-T(synthetic agonistic receptor T)细胞技术，表面存在一个合成的、天然T细胞不存在的受体胞外段（如EGFRVIII），胞内段则为T细胞激活结构域。

    SART细胞治疗AML的机制（文献1）

SART设计及实验数据

图A为合成激动受体及双特异性抗体结构示意图。双特异性抗体参考了Roche 2+1 TCR双抗的设计理念，一个受体激动型抗体，两个肿瘤抗原结合抗体。结果显示：2+2双特异性抗体会产生off-target毒性（图E），而2+1双特异性抗体则基本没有off-target毒性，且其on-target效应强于2+2双特异性抗体（图F）。

所以受体激活只需要1价抗体，肿瘤识别使用2价抗体，2+1双特异性抗体适合此技术平台。

SAR-T细胞、双特异性抗体和肿瘤细胞孵育30mins即可达到60-70%杀伤率，24小时达到100%的杀伤。

双色细胞荧光染色，显示免疫突触的形成以及颗粒酶B（GRZb）的产生，说明细胞杀伤与SAR-T细胞激活及效应分子分泌相关。

和aCD3-aCD33相比，aE3-aCD33的激活具有选择性，不同效靶比的滴度关系明显；而CD3抗体泛特异性活化T细胞，则滴度关系不明显(图A)。

24小时SAR-T分泌IFN-γ活性最好，随着双特异性抗体降解，48小时，72小时SAR-T分泌IFN-γ的活性降低，显示了SAR-T细胞激活是可逆的，双特异性抗体是这个开关。

按照图A注射SAR-T细胞及双特异性抗体，显示SAR-T细胞加aE3-aCD33组存活时间显著延长，显示了良好的抗肿瘤活性。

参考文献：

1.M.-R. Benmebarek et al. A modular and controllable T cell therapy platform for acute myeloid leukemia，Leukemia，https://doi.org/10.1038/s41375-020-01109-w

2.Karches CH, Benmebarek M-R, Schmidbauer ML, Kurzay M,Klaus R, Geiger M, et al. Bispecific antibodies enable synthetic agonistic receptor-transduced T cells for tumor immunotherapy. Clin Cancer Res. 2019;25:5890–900.