甲/乙流感病毒抗原检测与核酸检测的差别

流行性感冒，通常称为“流感”，是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，具有很强的传染性，主要通过咳嗽和打喷嚏传播。

流感病毒分为甲、乙、丙三型，甲型流感病毒具有极强的变异性，乙型流感病毒次之，而丙型流感病毒则非常稳定，故甲型流感病毒比乙型流感病毒更为流行和严重。

冬春季是传染病高发季节，随着开学季的到来，近期“甲流”来势汹汹。据不完全统计，我院急诊检验2月份流感病毒抗原阳性检出率达21%，近3天达27%。不少患者同时进行了流感病毒核酸检测，反馈抗原检测结果与核酸检测结果不一致，那么应该怎样看待这两份检测结果呢？

01、注意检测方法不同

流感病毒的检测方法主要包括病毒分离培养、 抗原检测及核酸检测等。流感病毒的分离培养作为传统的金标准是研究病毒抗原性、遗传变异特征和疫苗制备过程中不可缺少的重要手段和方法，但是由于操作复杂、检测时间久，很难在临床展开。目前，最常用的是快速抗原检测和核酸检测，优缺点比较见表1。

流感病毒抗原检测主要应用胶体金是免疫层析技术，定性检测人鼻咽拭子和口咽拭子样本中的甲型和乙型流感病毒抗原，适用于甲型和乙型流感病毒感染的辅助诊断。流感病毒抗原检测操作简单、特异性好、无需仪器、检测速度较快、可随时随地检测，在流感流行季节作为床旁检测或实验室筛查具有明显的优势，但是其灵敏性欠佳，有可能出现漏诊，对阴性结果应进一步甄别。   基于核酸的检测技术针对病毒特异性DNA或RNA序列，可在临床样本中更早地检测到病毒，但这些检测通常需要1-8h完成。基于核酸的检测技术与快速抗原检测相比具有更高的灵敏性和特异性，可以做到对不同亚型流感病毒的鉴别和多重病毒的检测。然而，由于成本高、仪器复杂、需要训练有素的专业人员，基于核酸的检测技术在资源有限的地区不太实用。 

02、注意标本采集和处理的规范

标本由医生用无菌拭子采集，采集部位是鼻腔或咽喉。鼻腔分泌物采集：收集鼻腔分泌物时，应将拭子插入鼻腔中分泌物最多处，轻轻转动并向鼻腔内部推动拭子，直至鼻甲（离鼻孔约 2.0 cm～2.5cm）受阻处，贴鼻腔壁旋转拭子三次，取出拭子。咽喉分泌物采集：应将拭子从口腔完全插入咽喉中，以咽喉壁、上颚扁桃的发红部位为中心，适度用力擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，应避免触及舌部，取出拭子。   标本采集后应尽快采用病毒采样液进行处理，采样拭子应充分洗脱   。如不能立即处理，标本应立即置于干燥、 消毒并严格密封的塑料管内储存，2℃～8℃下可保存 8 小时，-70℃可长期保存。  

03、有关流感病毒抗原检测结果假阴性分析

大多数医院仅开展流感病毒抗原快速检测，核酸检测通常由当地疾控中心进行。当患者核酸结果（核酸阳性）和抗原结果（抗原阴性）不相符时，患者及家属往往第一时间会质疑检验科检测不准确，其实不然！每天进行标本检测前，检验科都会进行质量控制分析，并且在标本检测操作时，检测人员会严格遵守操作指南，确保检验质量。

那么抗原检测仍出现了假阴性是为什么呢？最主要的原因是受抗原类检测试剂方法学的限制，其分析灵敏度普遍较核酸类试剂低，故建议对有疑问的阴性结果采用核酸检测或病毒培养鉴定方法进行复核。

另外的原因还可能包括：

1、样本采集不当、样本储存不当、样本不新鲜或样本反复冻融

2、样本中病毒滴度过低，这时应采用核酸检测，提高检测灵敏度

3、病毒基因变异可能导致抗原决定簇的改变，从而造成假阴性结果

4、采集的样本若存在个别药物如高浓度的非处方药和处方药（鼻腔喷雾剂）会干扰结果

5、感染后的最佳采样时间（病毒滴度峰值）未经验证，因此，在同一患者分次、多部位采集样本可能会避免假阴性

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编辑：青翠欲滴，校审：晨晨