震锋笔记 | 非血液样本检测心衰患者利纳肽水平

血浆B型利钠肽（BNP）水平已经是心衰诊断及预后判断的金指标之一，被写进了心衰指南的流程。

但是抽血化验不适合家庭随访，有没有可能通过体液来检测心衰患者的利钠肽水平？今天笔记来介绍三个非血液样本测定利钠肽的研究。

唾液采集方便、非侵入性，也无交叉感染、被采血针刺伤等风险。这一研究是用商用的酶联免疫吸附法测定唾液样品中 NT-proBNP 的含量，评估了线性关系、基质效应、敏感度、回收利用率和测定精密度。

结果显示了整个测试浓度信号有线性趋势，最小可检测浓度为 1 pg/mL，NT-proBNP 回收利用率令人满意（95–110%），精度可接受（变异系数 ≤ 10%）。

作者观察了唾液标本储存温度和时间对测定NT-proBNP稳定性的影响，显示最佳储存条件是 -20°C，最多可保存 2.5 个月。

该方法还测定了10 例急性心衰住院患者唾液样本中的 NT-proBNP。初步结果表明，从入院到出院，唾液中的 NT-proBNP 降低，表明基于唾液的NT-proBNP可以作为心衰监测的指标。

唾液是血液的“超滤液”，作为临床信息的潜在来源越来越重要，因为它能反映生物活性、健康或病理状态。与血液相比，唾液样本可以轻松方便地收集，还适用于大量人群的筛查，减少心理压力（特别是需要重复采样时），还能降低面对采血发生的患者和医护人员的健康风险。唾液诊断还正在芯片实验室 (LoC) 和护理站点 (PoC) 设备得到开发和利用。

目前血浆和血清样品中 NT-proBNP 定量的免疫测定法之一是罗氏公司的 Elecsys NT-proBNP II 测定法，测定的浓度范围为 10–35000 pg/mL，检测限 (LoD) 为 10 pg/mL，定量限 (LoQ) 为 50 pg/mL。2012 年，Foo 等人使用来自 Perkin Elmer 的 NT-proBNP AlphaLISA 免疫测定法分析唾液中NT-proBNP ，但他们需要先进行一个预浓缩步骤，然后再执行 ELISA 试剂盒。他们没有专门验证用于唾液分析的 Elecsys NT-proBNP II 检测方法，也没有研究不同储存条件下唾液中 NT-proBNP 的稳定性。

该研究的目的不是关联血浆和唾液中的 NT-proBNP 水平，而是测试和验证基于血浆/血清 NT-proBNP ELISA 试剂盒的分析方法在唾液的 PoC 中的潜在用途。

这一方法要在2006就有文献报道，发表在European Journal of Heart Failure上。

研究对 96 名 心衰患者和 20 名对照受试者测量了尿液和血浆 NT-proBNP 水平。根据NYHA标准对患者进行功能分类。

结果显示心衰患者的尿液 NT-proBNP 高于对照组（94 ± 31 pg/ml vs 67 ± 6 pg/ml，p< 0.0001），与血浆 NT-proBNP 水平相关（r= 0.78,p< 0.0001)。

检测尿液 NT-proBNP 水平诊断心衰的曲线下面积 (AUC) 为 0.96 ± 0.02 (p< 0.0001），能预测 12 个月的心脏事件（o= 0.011）。

但是尿液NT-proBNP水平在肥胖患者中下降，会影响部分患者的判断。

C型利钠肽（CNP ）是一种保护性激素，在肾脏和内皮细胞中合成，具有抗重构的作用。在病理生理条件下，尿液和血浆 CNP 水平升高；然而在心力衰竭 (HF) 中的调节和预后价值尚不清楚。

研究测量了 109 名健康受试者和 208 名 急性失代偿心衰（ADHF ）患者的尿液和血浆 CNP；用来自健康受试者的 CNP 值的第 95 个百分位建立正常截止值。ADHF 患者根据尿液和血浆 CNP 水平进行分层，然后进行临床表征和不良预后风险评估。

在两个队列中，尿液和血浆 CNP 之间均无显著相关性。ADHF 患者的尿液和血浆 CNP 显著升高，并且心衰严重程度越重水平越高，与血浆NT-proBNP 呈正相关。在 ADHF 患者中，23% 的患者尿液和血浆 CNP 均升高，24% 的患者 CNP 水平正常。平均随访 3 年，在校正年龄、性别、左心室射血分数、肾功能和血浆 NT-proBNP 后，尿液和血浆 CNP 升高的患者再住院（HR：1.79；P=0.03）和/或死亡（HR：2.16；P =0.01) 的风险显著升高。

尿液和血浆 CNP 在 ADHF 中受到不同的调节，两者的升高为预测不良结果提供了独立的预后价值。

如果进一步扩大样本，确定出心衰患者唾液与尿液利钠肽的正常截止值，并做成测试芯片，可以对心衰进行快速简便的评估，也有利于心衰患者的家庭监测。

参考文献

1.https://www.nature.com/articles/s41598-021-92488-2

2.https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1016/j.ejheart.2005.11.011

3.https://www.jacc.org/doi/10.1016/j.jchf.2021.04.013