本文将针对对“干细胞3D微载体规模化生产工艺”,进行探讨。
首发:干细胞者说
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不同规模化制备工艺和微载体的选择
平皿制备工艺可满足于中小规模的细胞生产需求,但存在人工成本高、生产空间需求大、细胞产品批次生产数量有限、批次间质量不稳定等问题,严重制约着干细胞产业化的发展。
生物反应器制备工艺,可作为细胞体外培养的平皿制备工艺替代品。主要有两类:以中空纤维生物反应器为代表的灌注式生物反应器和基于微载体的悬浮搅拌式生物反应器。
中空纤维生物反应器可用于贴壁细胞、悬浮细胞、细胞分泌物(外泌体等)的生产制备,一次运行可生产4-6×10*8 数量的间充质干细胞(MSCs);但在贴壁细胞培养过程中,无法实时监测细胞增殖状态和质量情况,且收获过程面临着胰酶消化时间长,细胞的收获效率及质量都难以保障。
定制化3DTableTrix® 微载体的基本特性
2D培养与3D培养的衔接
连续动态扩增培养
细胞在不同规模体系中的起始接种密度及培养的时间;
细胞如何从微载体上收获并转移到新的体系中;
细胞是连续逐级扩增放大最终形成工作细胞库,还是在某个三维扩增体系节点建立主细胞库,进而再放大到工作细胞库;
培养基换液时间节点、如何在不损失细胞的情况下进行换液;
如何界定细胞代次;
在干细胞大规模扩增时如何监测细胞的增殖状况和质量,经三维扩增培养的细胞质量检验项目及标准如何设定。
细胞收获和冻存
3D干细胞微组织原位冻存后细胞特性
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