液体活检案例解析

液体活检案例

这是一个真实的案例，凭借“液态活检”技术【即循环肿瘤细胞（CTC）检测和循环肿瘤DNA（ctDNA）检测】，完美阐释了什么是肿瘤的（超）早期筛查。（引用宝藤医学的一个案例）

案例还原

2014年12月24日，宝藤医学iFISH-CTC平台实验人员对新收到的一批外周血样本进行了实验质检，准备开始循环肿瘤细胞检测【iFISH-CTC就是莱尔的试剂盒，亦或者是赛特的试剂盒，个人觉得99%是莱尔的试剂盒】。循环肿瘤细胞（CTC）是从实体瘤中脱离出来并进入外周血液循环的肿瘤细胞。在肿瘤形成的早期阶段，会有少量的肿瘤细胞进入外周血，因此在外周血中检测到CTC提示受检者体内可能存在癌变或癌前病变部位。

经过两天实验，CTC检测结果出来了，实验人员发现这批样本有一例样本CTC数目特别多，高达8个，而且其中一个是5倍体CTC【这个说词不对，可以说是某号染色体5体，但不能说是5倍体】。这引起了实验室负责人关注，因为基于已有的临床研究报道，健康人血液中的CTC数目极少，一般不会被检测到，极少数健康人外周血中可能会检出1-2个CTC。检测出CTC则提示受检者体内可能存在肿瘤细胞。

循环肿瘤细胞图

判读标准：

1. 橙色荧光点为染色体着丝粒探针FISH检测结果。正常非肿瘤细胞为二倍体细胞，胞内两个荧光点；肿瘤细胞为多倍体细胞【说肿瘤细胞是非整倍体细胞不就行了，说多倍体，只能呵呵】，胞内大于两个荧光点。

2. 蓝色为DAPI细胞核染色，所有有核细胞均为阳性。

3. 红色箭头所指极为五倍体CTC【呵呵一笑】。

宝藤医学迅速将CTC检测结果反馈给了受检者。受检者得知结果后非常焦急，询问应该怎么办？为了确认肿瘤细胞的来源，宝藤医学建议受检者到医院接受全面的检查，如肿瘤标志物检测【一般为血清标志物：CEA等】等，同时推荐受检者接受宝藤医学的另一项“液态活检”技术----循环肿瘤DNA（ctDNA）检测。循环肿瘤DNA是肿瘤标记物之一，携带有与原发肿瘤组织相一致的分子遗传学改变，通过分析ctDNA的分子特征可以提示肿瘤的原发部位。于是这位受检者立即到医院抽血进行了肿瘤标志物等检查以及ctDNA检测。肿瘤标志物无任何异常，而ctDNA检测提示受检者KRAS基因突变超标。已有的研究表明KRAS突变与结直肠癌或胰腺癌密切相关。因此在ctDNA检测结果的指引下，受检者接受了针对性的肠镜检查，结果在直肠部位发现了一个腺瘤，病理检测表明这是一个直肠低分化腺瘤。我们都知道低分化腺瘤的恶性程度非常高，易发展为结直肠癌。于是这位受检者很快接受了息肉切除手术，手术后一个月再次复查ctDNA，发现ctDNA结果已经正常。宝藤医学提供的分子检测成功的帮助了这位受检者发现了隐藏的癌前病变，将肿瘤扼杀在萌芽状态，有效避免了肿瘤给人带来的经济负担和身心痛苦！

同时，为了验证宝藤医学检测到的循环肿瘤细胞携带有结直肠癌的相应肿瘤分子特征，宝藤医学利用最新的显微切割技术，分离出了一个循环肿瘤细胞，然后运用高通量测序对这个细胞进行了全外显子组测序。数据分析表明该CTC携带48个与肿瘤相关的特有基因突变。通过分析比较受检者体内循环肿瘤细胞突变与肿瘤突变谱，发现这些突变中有16次跟结直肠癌相关，13次跟胃癌相关，6次跟乳腺癌相关。因此受检者外周血中的循环肿瘤细胞最有可能来源于结直肠胃和乳腺。这与临床上肠镜的检查结果完全一致。

癌症是中国居民死亡的首要原因。癌症治疗的最关键是早期发现早期治疗。研究表明，只要早期发现，80%以上的癌症可以治愈。但是遗憾的是，由于癌症缺乏典型的临床表现，以及目前已有癌症早期筛查手段的局限性，我国的大多数癌症患者发现时已是晚期，错过了最佳治疗时机。

本文的案例中，受检者未出现任何肿瘤的临床表征，肿瘤标志物也未发现异常，而我们在受检者的外周血中发现了循环肿瘤细胞，并通过循环肿瘤DNA检测，将肿瘤细胞的来源锁定到结直肠部位，为进一步的临床针对性检查指明了方向。这个案例表明：在常规肿瘤筛查尚未能发现癌变或癌前病变之前，循环肿瘤细胞检测和循环肿瘤DNA检测能发现受检者体内的异常。

随后的CTC单细胞测序及对CTC的分子特征分析，验证了CTC检测和ctDNA检测的可靠性。肿瘤形成的早期阶段，外周血中即存在循环肿瘤细胞，且这些细胞与原发肿瘤具有相同的分子突变特征。血浆游离循环肿瘤DNA的检测结果也证实ctDNA携带原发肿瘤的分子特征。因此，CTC和ctDNA可以在患者尚未出现任何癌症表征之前，（超）早期发现患者体内存在的病变，为肿瘤早期检测提供了参考依据，筛选高危人群并早期干预。【仅仅是个别案例，在此只是想强调下CTC和ctDNA的作用，并不一定适合临床的应用】